一株唾液链球菌嗜热亚种JF2及其在制备抗炎和解脂食品药品中的应用的制作方法

本发明属于益生菌及其应用，具体涉及一株唾液链球菌嗜热亚种jf2及其在制备抗炎和解脂食品药品中的应用。

背景技术：

1、唾液链球菌嗜热亚种(streptococcussalivariussubsp.thermophilus)是一种需氧的革兰氏阳性菌，是用于发酵酸奶的主要菌种之一。液链球菌嗜热亚种具有较好的食用安全性，并已获得美国gras(generallyrecognizedassafe)和欧洲qps(qualifiedpresumptionof safety)的安全认证，同时其能通过产生乳糖酶帮助缓解乳糖消化不良症状的功能也获得了欧洲食品安全局的认证。近些年来，唾液链球菌嗜热亚种作为一种具有极大潜力的益生性菌株已成为研究的热点，并且正在不断被用来制作成适用于人和动物的益生菌制剂。

2、目前，唾液链球菌嗜热亚种的不同菌株已被报道具有不同的益生功能：(1)唾液链球菌嗜热亚种的胞外多糖(eps)具有明确的生物活性和益生菌特性，在各种医药行业具有被开发成为抗氧化剂，抗癌药物、抗炎药物和免疫调节剂的潜力。比如，唾液链球菌嗜热亚种st538在脱脂牛奶培养基中可产生高达595μg/ml的eps，能显著提高干扰素β(ifn-β)、白细胞介素6的表达(il-6)和cxcl10的表达，而这三种细胞因子与病毒感染的预防有关。(2)具有产生叶酸的能力：有研究表明，从意大利的乳制品中分离到的两株快速酸化唾液链球菌嗜热亚种均具有体外益生菌特性，并且具有抗癌活性和产叶酸的能力。同时，已有研究证明唾液链球菌嗜热亚种是牛奶在发酵过程中叶酸含量增加6倍的原因。(3)具有产γ-氨基丁酸(gaba)的能力：gaba已被证明对大脑功能有益，可以预防或减轻焦虑、抑郁、失眠和记忆力丧失，并可以刺激免疫系统，预防炎症、高血压和糖尿病，此外还能调节能量代谢。有研究表明，唾液链球菌嗜热亚种84c和唾液链球菌嗜热亚种apc151均可产生gaba。(4)具有抑制病原菌生长的能力：有研究表明，唾液链球菌嗜热亚种klds3.1003的细胞提取物和无细胞上清液(cfs)对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑制作用，前者抑菌效果更好(p<0.05)。(5)对弄些疾病具有缓解作用：有研究表明，唾液链球菌嗜热亚种是一种预防小鼠结直肠癌(crc)的新药物，嗜热链球菌分泌的β-半乳糖苷酶可抑制细胞增殖，诱导细胞周期停滞，促进crc细胞凋亡，延缓crc移植物的生长，并且β-半乳糖苷酶还可以增加双歧杆菌和乳酸杆菌等益生菌的肠道丰度。唾液链球菌嗜热亚种具有阻止慢性肾病(cdk)进展的潜能，补充唾液链球菌嗜热亚种能显著减轻粘膜的炎症。唾液链球菌嗜热亚种可延缓结肠炎的发作，减轻疾病的临床症状(包括体重减轻和消化道出血)，。唾液链球菌嗜热亚种可促进维持粘膜屏障的功能，减少细菌易位，从而减少免疫刺激和相关炎症。

3、唾液链球菌嗜热亚种来源的多样性导致其具有基因的多样性和功能的多样性。然而，目前针对唾液链球菌嗜热亚种的分离鉴定、益生特性和代谢机制的研究依然较少，这在一定程度上也影响了对唾液链球菌嗜热亚种的开发利用。因此，有必要根据唾液链球菌嗜热亚种的不同来源使其更好地发挥作用，如根据菌株的功能或者益生代谢产物确定其功效，明确其应用前景。综上所述，益生性唾液链球菌嗜热亚种的研究及应用具有比较广阔的发展空间。

技术实现思路

1、为了克服上述现有技术的不足，本发明从一名健康成年人的粪便中分离出一株唾液链球菌嗜热亚种streptococcussalivariussubsp.thermophilusjf2(streptococcussalivariusjf2)菌株，所述唾液链球菌嗜热亚种jf2具有多种益生功效，包括产蛋白酶、抑制α-葡萄糖苷酶活性等，具有巨大的潜在应用价值。

2、为实现上述目的，本发明是通过以下技术方案来实现的：

3、本发明第一方面提供了一株唾液链球菌嗜热亚种(streptococcussalivariussubsp.thermophilus)jf2菌株，所述唾液链球菌嗜热亚种jf2菌株于2022年09月27日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为：cctccm20221495；所述唾液链球菌嗜热亚种jf2菌株的16srdna全序列如seq id no：1所示。

4、本发明第二方面提供了第一方面所述的唾液链球菌嗜热亚种(streptococcussalivarius subsp.thermophilus)jf2菌株在产蛋白酶中的应用。

5、经研究发现，益生菌唾液链球菌嗜热亚种jf2可产生蛋白酶，提示唾液链球菌嗜热亚种jf2有望用于生产蛋白酶，并通过产蛋白酶的这一特性用于促进人体对食物中蛋白质的消化吸收，提高对小肽和氨基酸的吸收，抗过敏等领域。

6、本发明第三方面提供了第一方面所述的唾液链球菌嗜热亚种(streptococcussalivarius subsp.thermophilus)jf2菌株在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂中的应用。

7、经研究发现，益生菌唾液链球菌嗜热亚种jf2可有效抑制α-葡萄糖苷酶活性，而a-葡萄糖苷酶与2型糖尿病有关，抑制α-葡萄糖苷酶是控制餐后高血糖的方法之一，提示唾液链球菌嗜热亚种jf2有望用于降血糖和抑制肥胖等领域。

8、本发明第四方面提供了第一方面所述的唾液链球菌嗜热亚种(streptococcussalivarius subsp.thermophilus)jf2菌株在产γ-氨基丁酸中的应用。

9、经研究发现，益生菌唾液链球菌嗜热亚种jf2可产生γ-氨基丁酸(gaba)，提示唾液链球菌嗜热亚种jf2有望用于生产gaba，并通过产gaba的这一特性用于改善机体睡眠质量，抗抑郁，抗焦虑，降血压，改善脂质代谢，增强记忆能力，并提高脑活力等领域。

10、本发明第五方面提供了第一方面所述的唾液链球菌嗜热亚种(streptococcussalivarius subsp.thermophilus)jf2菌株在产透明质酸中的应用。

11、经研究发现，益生菌唾液链球菌嗜热亚种jf2可产生透明质酸(ha)，提示唾液链球菌嗜热亚种jf2有望用于生产ha，并通过产ha的这一特性用于抗炎，抗血管生成，抗衰老，促进伤口消炎及愈合等领域。

12、本发明第六方面提供了一种用于具有益生功能的菌剂，所述菌剂包括第一方面所述的唾液链球菌嗜热亚种(streptococcussalivariussubsp.thermophilus)jf2菌株。

13、优选地，所述唾液链球菌嗜热亚种(streptococcussalivariussubsp.thermophilus)jf2菌株为经发酵后的菌体混合物。发酵所用的培养基为mrs培养基。

14、优选地，在医药应用领域，所述菌剂还包括药学上可接受的载体和/或赋形剂。

15、更优选地，上述赋形剂是指可用于药学领域的稀释剂、黏合剂、润滑剂、崩解剂、助溶剂、稳定剂等以及一些药用基质。上述载体是药物领域中可得到的功能性药用辅料，包括表面活性剂、助悬剂、乳化剂以及一些新型药用高分子材料，如环糊精、壳聚糖、聚乳酸(pla)、聚乙醇酸聚乳酸共聚物(plga)、透明质酸等。

16、优选地，在医药应用领域，所述菌剂的剂型包括注射剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、滴丸剂、缓释剂、口服液制剂。

17、更优选地，上述剂型是指临床上常用的剂型。药物制剂可以经口服或胃肠外方式(例如静脉、皮下、腹膜内或局部)给药，如果某些药物在胃部条件下是不稳定的，可将其制备成肠衣片剂。

18、与现有技术相比，本发明的有益效果是：

19、本发明从一名健康成年人的粪便中分离出一株唾液链球菌嗜热亚种streptococcus salivariussubsp.thermophilusjf2菌株，所述唾液链球菌嗜热亚种jf2菌株具有的多种益生功效，主要包括具有优越的蛋白酶活性，产生和分泌γ-氨基丁酸，产生和分泌透明质酸；抑制α-葡萄糖苷酶活性。因此，唾液链球菌嗜热亚种jf2菌株具有促进对蛋白食物的消化吸收，改善蛋白过敏；抗抑郁和解酒，改善脂质代谢；抗衰和抗皱；降糖等多种功能。可见，本发明新分离得到的唾液链球菌嗜热亚种菌株jf2菌株具有多种益生功效，可用于抗炎解脂等领域，例如，制作成抗炎和解脂食品药品，具有重要的应用价值和经济价值。