一种粪便DNA提取试剂盒及粪便DNA提取方法与流程

文档序号:34307964发布日期:2023-05-31 19:41阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种粪便dna提取试剂盒,其特征在于,包括:样品处理液和核酸提取液;所述样品处理液包括:蛋白酶k溶液、第一样品处理液、第二样品处理液、第三样品处理液;所述第一样品处理液包括:50-150mm/l的柠檬酸钠缓冲液;所述第二样品处理液包括:50-150mm/l的nacl、400-600mm/l的tris-hcl、600-800mm/l的十二烷基硫酸钠和水;所述第三样品处理液包括:2.0-4.0m/l的氯化钾溶液。2.根据权利要求1所述的粪便dna提取试剂盒,其特征在于,所述核酸提取溶液包括:裂解结合液、磁珠液、洗涤液和洗脱液;所述裂解结合液包括:30-80mm/l的tris-hcl、3-8m/l的盐酸胍、10-30mm/l的乙二胺四乙酸二钠、15-35mm/l的nacl,以及体积百分比为0.05%-0.15%的tritonx-100和水。3.根据权利要求2所述的粪便dna提取试剂盒,其特征在于,所述洗涤液包括:第一洗涤液和第二洗涤液;所述第一洗涤液包括:80-120mm/l的tris-hcl、3-8m/l的盐酸胍、15-35mm/l的nacl和水;所述第二洗涤液为水。4.根据权利要求2所述的粪便dna提取试剂盒,其特征在于,所述磁珠液的浓度为3.5-5.0mg/ml,ph为8.1-8.3;所述洗脱液包括:80-120mm/l的tris-hcl和水,ph为8.5-8.7。5.根据权利要求1所述的粪便dna提取试剂盒,其特征在于,所述蛋白酶k溶液的浓度为40-50mg/ml。6.根据权利要求1至5任一项所述的粪便dna提取试剂盒,其特征在于,所述粪便dna提取试剂盒还包括:离心管,所述离心管内含有陶瓷颗粒。7.一种粪便dna提取方法,其特征在于,使用权利要求1至6任一项所述的粪便dna提取试剂盒进行提取。8.根据权利要求7所述的粪便dna提取方法,其特征在于,所述制备方法包括:向含有粪便样本和陶瓷颗粒的离心管中加入第一样品处理液、第二样品处理液和蛋白酶k溶液,对离心管进行孵育、击打使细胞破碎、离心,得到第一上清液;将所述第一上清液与第三样品处理液混匀、离心,得到第二上清液;将所述第二上清液与裂解结合液、磁珠混匀进行裂解,以使核酸释放并结合在所述磁珠上;使用洗涤液对结合核酸的磁珠进行洗涤;使用洗脱液将洗涤后的磁珠上的核酸进行洗脱,得到粪便dna提取液。9.根据权利要求8所述的粪便dna提取方法,其特征在于,所述“将所述第二上清液与裂解结合液、磁珠混匀进行裂解,以使核酸释放并结合在所述磁珠上”,所需的时间为10~20min,所需的温度为60~70℃。10.根据权利要求8所述的粪便dna提取方法,其特征在于,所述孵育的温度为60-70℃,孵育的时间为8-15min。

技术总结
本申请提供一种粪便DNA提取试剂盒及粪便DNA提取方法,涉及体外诊断技术领域。该粪便DNA提取试剂盒包括样品处理液和核酸提取液,样品处理液包括蛋白酶K溶液、第一样品处理液、第二样品处理液和第三样品处理液,通过分步对样品进行处理,可以对样品进一步剔除杂质,纯化样本提取的核酸,从而从粪便样本中得到高质量核酸。该试剂盒组成简单易得、毒副作用小;操作简便、易于储存运输、省时省力;提取核酸的纯度更高,特异性更强;可配合核酸自动提取仪进行提取粪便核酸;可进行大批量样本自动化提取,提取效率更高;对粪便样本的提取效率更高;其溶液更稳定,可重复性高。可重复性高。可重复性高。


技术研发人员:陈华云 文素珍 张达源 胡风 李永发
受保护的技术使用者:广州和实生物技术有限公司
技术研发日:2023.03.29
技术公布日:2023/5/30
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