一种改善功能性便秘的动物双歧杆菌乳亚种及其应用的制作方法

本发明属于微生物培养，涉及一种改善功能性便秘的动物双歧杆菌乳亚种ba79及其应用，具体涉及一种改善功能性便秘的动物双歧杆菌乳亚种ba79及其在制备预防、改善或治疗功能性便秘的产品中的应用。

背景技术：

1、功能性便秘(functional constipation，fc)是慢性便秘的一种类型，按照排便动力学分为，慢传输型便秘(slow transit constipation,stc)、出口梗阻型便秘(outletobstruction constipation,ooc)和混合型便秘。其临床症状除了表现为排便频次减少、排出困难或排便不尽感之外，无其他特异性。

2、慢性传输型便秘(stc)是一类由胃肠道传输功能障碍引起的顽固性便秘，以结肠传输减慢为特点，发病原因尚未明了，一般认为其发病机制与心理因素、胃肠道动力、神经系统、胃肠激素有关，其的临床症状诊断主要参照功能性便秘罗马ⅲ标准，占便秘发病率的25％；出口梗阻型便秘(ooc)是由于腹部、肛管直肠肌肉和盆底肌肉不协调工作、导致直肠有效排空受阻而出现的、复杂多样的排便不畅症状群，其的临床症状诊断主要参照功能性便秘罗马ⅳ标准，占便秘发病率的60％。其余为混合型便秘。长期便秘会给患者精神和心理上造成负面影响，容易引发肛肠疾病、肠胃神经功能紊乱、心、脑血管发病率，甚至会患结肠癌和猝死等。

3、功能性便秘治疗的方法主要有调理法和药物治疗法。调理法是指日常调整饮食、饮水及适当运动，通过按揉腹部、点按穴位、外敷神阙等改善便秘症状，此方法虽然有一定的效果，但是具有见效慢，易反弹等缺点。药物治疗法一般应用聚乙二醇、芦荟等通便药，但长期使用可引起腹胀、腹痛、肠神经损伤及结肠黑变病等不良反应，副作用较明显。随着高通量测序技术的普及，对人体肠道微生物菌群的组成和功能有了更深入地了解。肠道是人体内微生物群最集中的部位，调理好肠道菌群，有利于肠道蠕动，调节胃肠活性肽、血清素及细胞因子，达到预防、治疗便秘的作用。肠道微生物作为人类的“第二基因组”或“第二脑(肠脑)”，越来越受到研究者的重视。因此微生物疗法治疗具有光明的发展前景。

4、然而，目前现有技术中用于改善便秘的微生物制剂还十分有限，大部分微生物是针对慢性传属性便秘(stc)的改善，而对出口梗阻型便秘(ooc)研究较少，而且相关益生菌及其制品的缓解功能性便秘的效果还有待提高。因此，提供一种改善或治疗便秘的效果好，且在治疗过程中不会导致患者产生不良反应的微生物制剂，已成为本领域技术人员亟待解决的问题。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种改善功能性便秘的动物双歧杆菌乳亚种ba79及其应用，具体提供一种改善功能性便秘的动物双歧杆菌乳亚种ba79及其在制备预防、改善或治疗功能性便秘的产品中的应用。

2、为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：

3、第一方面，本发明提供一种改善功能性便秘的动物双歧杆菌乳亚种，所述改善功能性便秘的动物双歧杆菌乳亚种命名为动物双歧杆菌乳亚种bifidobacterium animalissubsp.lactis ba79菌株，保藏编号为cgmcc no.24111，保藏日期为2021年12月15日。

4、本发明从人母乳样本中分离获得并保藏了一株新的能够改善功能性便秘的动物双歧杆菌乳亚种，将其命名为动物双歧杆菌乳亚种bifidobacterium animalissubsp.lactis ba79菌株，该菌株具有良好的耐胃肠液能力和肠粘附能力，能顺利通过胃肠道到达小肠发挥益生功效；能够抑制食源性致病菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌和肠道固有菌屎肠球菌，更有利于其在肠道内增殖为优势菌种；既能够缓解慢传输型便秘(stc)也能够缓解出口梗阻型便秘(ooc)。该菌株是一种益生菌，安全性高，且其不会产生抗药性，不会导致患者产生不良反应。

5、第二方面，本发明提供一种如第一方面所述的改善功能性便秘的动物双歧杆菌乳亚种的培养方法，所述培养方法包括将动物双歧杆菌乳亚种bifidobacterium animalissubsp.lactis ba79菌株接种于mrs培养基上进行培养，所述培养的温度为35-45℃，例如35℃、36℃、37℃、38℃、39℃、42℃、44℃、45℃等；所述培养的时间为16-28h，例如16h、17h、18h、20h、22h、24h、28h等；该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。

6、第三方面，本发明提供一种预防、改善或治疗功能性便秘的益生菌微胶囊，所述预防、改善或治疗功能性便秘的益生菌微胶囊中的菌株包含第一方面所述的动物双歧杆菌乳亚种bifidobacterium animalis subsp.lactis ba79菌株。

7、优选地，所述益生菌微胶囊可以被制成为冻干粉剂，所述冻干粉剂还可以被进一步地制备成胶囊剂、片剂、颗粒剂等剂型。

8、本发明所涉及的动物双歧杆菌乳亚种ba79菌株可以被单独地应用于相关产品中，也可以与其他菌株联合应用于相关产品中。

9、进一步优选地，所述预防、改善或治疗功能性便秘的益生菌微胶囊中的菌株还包含两歧双歧杆菌乳亚种bifidobacterium bifidum bbi32菌株；所述两歧双歧杆菌乳亚种bifidobacterium bifidum bbi32菌株的保藏编号为cgmcc no.16923，保藏日期为2018年12月10日。

10、本发明还创造性地发现上述动物双歧杆菌乳亚种bifidobacterium animalissubsp.lactis ba79菌株能够与两歧双歧杆菌乳亚种bifidobacterium bifidum bbi32菌株进行复配使用用于预防、改善或治疗功能性便秘，具有比单一菌剂或者其他复配方式显著优异的效果，说明ba79菌株和bbi32菌株在缓解功能性病症上具有协同增效作用。

11、优选地，所述两歧双歧杆菌乳亚种bifidobacterium bifidum bbi32菌株与动物双歧杆菌乳亚种bifidobacterium animalis subsp.lactis ba79菌株的活菌数之比为(1-10):(1-10)，例如1:10、1:8、1:7、1:6、1:5、1:3、1:2、1:1、2:1、4:1、5:1、6:1、8:1、9:1、10:1等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。

12、在本发明所涉及的复合益生菌剂中，两种菌株在满足上述特定的质量比例关系时具有更优的协同增效效果。

13、优选地，所述预防、改善或治疗功能性便秘的益生菌微胶囊还包含壁材，所述壁材选自低聚果糖、低聚木糖、低聚乳果糖、乳酮糖、牛乳寡糖、低聚异麦芽糖、大豆低聚糖、壳聚糖、菊粉、氯化钙、螺旋藻或节旋藻中的任意一种或至少两种的组合。

14、优选地，所述预防、改善或治疗功能性便秘的益生菌微胶囊还包含固定剂；所述固定剂选自壳聚糖和氯化钙。

15、第四方面，本发明提供如第一方面所述的改善功能性便秘的动物双歧杆菌乳亚种或如第三方面所述的预防、改善或治疗功能性便秘的益生菌微胶囊在制备预防、改善或治疗功能性便秘的产品中的应用，所述产品包括食品、药品或保健品。

16、所述食品包括酸奶、固体饮料等，在酸奶中，活菌数不低于1×108cfu/100g；在固体饮料中，活菌数不低于1×108cfu/2g。

17、优选地，所述功能性便秘包括慢传输型便秘和/或出口梗阻型便秘。

18、优选地，所述产品中还包含冻干保护剂。

19、相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：

20、本发明从人母乳样本中分离获得并保藏了一株新的能够改善功能性便秘的动物双歧杆菌乳亚种，将其命名为动物双歧杆菌乳亚种bifidobacterium animalissubsp.lactis ba79菌株，该菌株具有良好的耐胃肠液能力和肠粘附能力，能顺利通过胃肠道到达小肠发挥益生功效；能够抑制食源性致病菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌和肠道固有菌屎肠球菌，更有利于其在肠道内增殖为优势菌种；既能够缓解慢传输型便秘(stc)也能够缓解出口梗阻型便秘(ooc)。该菌株是一种益生菌，安全性高，且其不会产生抗药性，不会导致患者产生不良反应。

21、本发明还创造性地发现上述动物双歧杆菌乳亚种bifidobacterium animalissubsp.lactis ba79菌株能够与两歧双歧杆菌乳亚种bifidobacterium bifidum bbi32菌株进行复配使用用于预防、改善或治疗功能性便秘，具有比单一菌剂或者其他复配方式显著优异的效果，说明ba79菌株和bbi32菌株在缓解功能性病症上具有协同增效作用。