1.一种生物合成3-氨基-2-羟基苯乙酮的方法,其特征在于,所述方法为:以硝基苯还原酶nbza、羟胺苯变异酶haba、葡萄糖脱氢酶gdh为催化剂并构成酶混合系统,以葡萄糖和间硝基苯乙酮3nap为底物,合成3-氨基-2-羟基苯乙酮3ahap;
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法的反应过程为:硝基苯还原酶nbza催化间硝基苯乙酮3nap生成3-羟基氨基乙酰苯3haap;羟胺苯变异酶haba催化3-羟基氨基乙酰苯3haap生成3-氨基-2-羟基苯乙酮3ahap;葡萄糖脱氢酶gdh催化葡萄糖生成nadph。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述反应体系中底物间硝基苯乙酮3nap的浓度为2~10g/l。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述硝基苯还原酶nbza以硝基苯还原酶nbza基因工程菌发酵培养的湿菌体破碎后以粗酶液形式加入,所述硝基苯还原酶nbza基因工程菌是核苷酸序列seq id no.1所示的硝基苯还原酶nbza基因插入重组表达载体后转入宿主菌中转化制备得到;
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述羟胺苯变异酶haba以羟胺苯变异酶haba基因工程菌发酵培养的湿菌体破碎后以粗酶液形式加入,所述羟胺苯变异酶haba基因工程菌是核苷酸序列seq id no.23~27所示的羟胺苯变异酶haba基因插入重组表达载体后转入宿主菌中转化制备得到。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,对所述羟胺苯变异酶haba核苷酸序列seq idno.2中的rbs序列seq id no.7进行优化,优化后的rbs序列为seq id no.8~12中的任意一种;将所述优化后的rbs序列通过对应的引物seq id no.13~22置换至所述羟胺苯变异酶haba核苷酸序列中;得到核苷酸序列seq id no.23~27所示的含有优化后rbs序列的羟胺苯变异酶haba基因。
7.如权利要求4或5任一所述的方法,其特征在于,所述湿菌体按如下方法获得:将基因工程菌接入含卡那霉素的lb培养基中,35~37℃培养至od600达到0.8,向发酵液中加入终浓度0.5~1mm的诱导剂iptg,于28~30℃诱导培养,将获得的发酵液离心,收集菌体沉淀,即得所述湿菌体。
8.一种硝基苯还原酶nbza在生物合成3-氨基-2-羟基苯乙酮中的应用,其特征在于,所述硝基苯还原酶nbza的氨基酸序列如seq id no.4所示。
9.一种羟胺苯变异酶haba在生物合成3-氨基-2-羟基苯乙酮中的应用,其特征在于,所述羟胺苯变异酶haba的氨基酸序列如seq id no.5所示。
10.一种葡萄糖脱氢酶gdh在生物合成3-氨基-2-羟基苯乙酮中的应用,其特征在于,所述葡萄糖脱氢酶gdh的氨基酸序列如seq id no.6所示。