新型四氢吲唑类抗肿瘤化合物的制备方法及其应用与流程

本发明涉及医药(ipc分类号为a61p31/22)，尤其涉及新型四氢吲唑类抗肿瘤化合物的制备方法及其应用。

背景技术：

1、抗肿瘤药是可抑制肿瘤细胞生长，对抗和治疗恶性肿瘤的药物。过去的药理学曾把抗肿瘤药依据其性质和来源分为6类：烷化剂、抗代谢药物、抗生素、植物药、激素和杂类。经过多年的发展，抗肿瘤药物领域取得了十分瞩目的成就。新药尤其是新化合物的研究开发为个体化治疗抗肿瘤的药物需求的发展诉求奠定了坚实的基础高选择性、高效率和低毒性的药物是未来新药研发的方向。随着人们对医疗水平要求的不断升高，强抑制肿瘤细胞生长活性的同时，还要求药物具有更低的使用浓度，更低的身体毒副作用，这对药物研发尤其是化合物研发带来了挑战。

技术实现思路

1、本发明的第一个方面提供了新型四氢吲唑类抗肿瘤化合物的制备方法，所述制备方法包括：将式ⅰ的化合物与金刚烷醇反应制得，

2、

3、在一些实施方式中，所述金刚烷醇包括反式4-氨基-1-金刚烷醇、顺式-4-氨基-1-金刚烷醇、2-丙基-2-金刚烷醇、2-丁基-2-金刚烷醇、2-乙基-2-金刚烷醇、3-乙基-1-金刚烷醇、(5r,7s)-2-氨基-1-金刚烷醇、2-苯基-2-金刚烷醇、2-异丙基-2-金刚烷醇、2-乙基-1,3-二甲基-2-金刚烷醇、1-苯基-2-金刚烷醇、1-(4-甲氧基苯基)-2-金刚烷醇、2-金刚烷醇、3-甲基-1-金刚烷醇、3-氨基-1-金刚烷醇、2-甲基-2-金刚烷醇、3,5-二甲基-1-金刚烷醇、1-金刚烷醇、1-乙酰氨基-3-金刚烷醇中的至少一种。

4、在一些实施方式中，所述式ⅰ的化合物与金刚烷醇的摩尔比为(1-2)：(4-6)。

5、进一步的，所述式ⅰ的化合物由以下反应制得：

6、

7、进一步的，所述式ⅰ的化合物的制备方法包括如下步骤：

8、s1.将5,5-二甲基-1,3-环己二酮溶于乙酸乙酯中，然后加入et3n、dmap和乙酰氯进行反应，有机层用饱和盐水洗涤，沙芯漏斗过滤，减压提取溶剂，得到黄色油状物，记为中间体2。

9、s2.在室温下将2,4-二氟苯腈加入到乙醇中，然后加入水合肼进行反应，将反应溶液倒入到冰水中，析出白色固体，重结晶后得到白色固体产物，记为中间体4。

10、s3.将中间体2和中间体4、冰醋酸和乙醇加入圆底烧瓶中进行反应，反应完毕后析出固体，将固体过滤、冷却、清洗过滤，得到红色的结晶固体。浓缩母液，重结晶后得到红棕色固体产物，记为5a，即式ⅰ。

11、更进一步的，所述式ⅰ的化合物的制备方法包括如下步骤：

12、s1.将5,5-二甲基-1,3-环己二酮(10.00g，71.34mmol)溶于25ml乙酸乙酯中，然后加入et3n(21.66g，214..05mmol)、dmap(4.36g，35.69mmol)和乙酰氯，在室温(25℃)下让反应进行12小时后，有机层用饱和盐水洗涤，用沙芯漏斗过滤，减压提取溶剂，得到黄色油状物12.58g，产率96.78％，记为中间体2。

13、s2.在室温(25℃)下将2,4-二氟苯腈(10.00g，71.89mmol)加入到20ml的乙醇中，然后加入80％的水合肼(4.10g，81.96mmol)。90℃回流反应5小时。之后，将反应溶液倒入到冰水中，析出白色固体。用乙醇：水(质量比8:1)进行重结晶，得到白色固体产物5.99g，产率55.14％，记为中间体4。

14、s3.将中间体2(6.03g，33.08mmol)和中间体4(5.00g，33.08mmol)、冰醋酸(2.98g，49.62mmol)和乙醇(20ml)加入250ml圆底烧瓶中，在80℃下反应12小时。反应完毕后析出固体，将固体过滤并冷却至室温(25℃)，之后用石油醚浸泡清洗过滤，得到红色的结晶固体。浓缩母液，用乙醇重结晶两次，得到红棕色固体产物，合计得到产物9..15g，产率92.99％，记为5a，即式ⅰ。。

15、进一步的，所述式ⅰ的化合物与金刚烷醇反应包括如下步骤：

16、s1.取5a、金刚烷醇、dma、dmso于圆底烧瓶中进行反应，冷却后将反应液倒入冰水中，抽滤固体、干燥，重结晶得到类白色固体产物，记为10a。

17、s2.将中间体10a、koh、dmso加入圆底烧瓶中，冰浴，滴加h2o2进行反应，反应液倒入到冰水中，搅拌，抽滤固体、干燥，重结晶得到白色固体产物，记为jd-10。

18、更进一步的，所述式ⅰ的化合物与金刚烷醇反应包括如下步骤：

19、s1.取5a(0.5g，1.68mmol)、反式4-氨基-1-金刚烷醇(0.84g，5.02mmol)、dmap(0.41g，3.36mmol)、dmso(10ml)于100ml圆底烧瓶中，100℃回流反应过夜，冷却至室温(25℃)，将反应液倒入冰水中，抽滤固体、干燥，用甲醇重结晶得到类白色固体产物0.74g，产率92.5％，记为10a。

20、s2.将中间体10a(0.5g，1.05mmol)、koh(0.06g，1.07mmol)、dmso(10ml)加入125ml圆底烧瓶中，冰浴，滴加30％的h2o2(0.11g，3.23mmol)，室温(25℃)条件下反应3h，倒入到冰水中，搅拌，抽滤固体、干燥，甲醇重结晶得到白色固体产物0.46g，产率93.8％，得到产物2-(((1s,5s)-5-羟基金刚烷-2-基)氨基)-4-(3,6,6-三甲基-4-氧代-4,5,6,7-四氢-1h-吲唑-1-基)苯甲酰胺，记为jd-10，结构式为

21、本发明的制备反应过程如下：

22、

23、本发明第二个方面提供了一种抗肿瘤的药物组合物，所述药物组合物的活性成分包括所制备的新型四氢吲唑类抗肿瘤化合物或其药物可接受盐。

24、在一些实施方式中，所述药物组合物为口服剂、外用制剂、片剂、胶囊剂、散剂、丸剂、颗粒剂、凝胶剂、注射剂或乳剂。

25、本发明第三个方面提供了一种所制备的新型四氢吲唑类抗肿瘤化合物或所述的药物组合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

26、本发明第四个方面提供了一种所制备的新型四氢吲唑类抗肿瘤化合物或所述的药物组合物在制备抑制肿瘤病毒进入靶细胞的药物中的应用。

27、本发明第五个方面提供了一种所制备的新型四氢吲唑类抗肿瘤化合物或所述的药物组合物在抑制肿瘤病毒dna聚合酶相关基因表达中的应用。

28、本发明第六个方面提供了一种所制备的新型四氢吲唑类抗肿瘤化合物或所述的药物组合物在抑制肿瘤病毒早期阶段感染中的应用。

29、本发明第七个方面提供了一种所制备的新型四氢吲唑类抗肿瘤化合物或所述的药物组合物的使用方法，所述新型四氢吲唑类抗肿瘤化合物抑制肿瘤细胞生长的浓度为0.01-1μm。

30、进一步的，所述肿瘤细胞包括hct116、eca109、a549、mda-mb-231和nci-h358中的一种或多种。

31、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

32、本发明研究制备出的2-(((1s,5s)-5-羟基金刚烷-2-基)氨基)-4-(3,6,6-三甲基-4-氧代-4,5,6,7-四氢-1h-吲唑-1-基)苯甲酰胺，经大量实验证实，其相比现有技术的4-(4-腙-3,6,6-三甲基-1-四氢吲唑)-2-(4-羟基环己氨基)苯甲酰胺化合物具有更强的抑制肿瘤细胞生长活性，具有普遍更低的ic50值，尤其是可以在低浓度下显著降低了非小细胞肺癌的克隆形成能力，可能通过减弱非小细胞细胞的群体依赖性、增殖能力引起细胞生长的抑制，其还可以引起非小细胞肺癌细胞发生凋亡，抑制细胞的存活，通过以上途径发挥抗癌作用，对开发新型抗肿瘤药物具有重大的意义。