一种促进青稞种子发芽和生长的非洲哈茨木霉及应用

本发明涉及微生物肥料，更具体地，涉及一种促进青稞种子发芽和生长的非洲哈茨木霉及应用。

背景技术：

1、青稞是禾本科大麦属植物，为大麦的一种变种，主要分布在西藏、青海、四川省、甘肃省以及云南、贵州的部分地区，是高寒地带人民的主要粮食。现有的青稞种植方法比较简单，系统化种植较弱，导致青稞的产量较低。近年来，为了追求青稞的高产，这些地区的农业生产普遍存在化肥使用超量的情况。过量的施用化肥不但不会高效提高青稞产量，反而还会导致土壤养分比例失衡、农产品品质下降，同时破坏当地生态环境。

2、生物菌肥是一种新型的环境友好型肥料，主要是由对植物生长起促进作用的植物根际促生菌(plant growth promoting rhizobacteria，pgpr)组成，目前针对pgpr菌肥的应用主要集中在果蔬方面，如非洲哈茨木霉菌株tm2-4用于番茄促生、木霉mu153、木霉ta97用于防治香蕉黄瓜等果蔬的病害；在青稞上的研究比较少见。因此，研制出高效的生物菌肥应有于青稞，对当地地区的农业发展、土壤修复具有重大意义。

3、非洲哈茨木霉(trichoderma afroharzianum)是新型的植物促生防病微生物，关于非洲哈茨木霉的研究正逐步增加。关于非洲哈茨木霉的研究越来越多，但主要针对果蔬作物的促生和防病，且目前市场上暂未出现商品化的非洲哈茨木霉产品。而与非洲哈茨木霉亲缘关系较近的哈茨木霉，市场上已有较多商品化菌剂产品。

技术实现思路

1、本发明的目的在于丰富市场上非洲哈茨木霉商品化菌剂产品，特别是针对农作物生长具有促进作用的生防产品，提供了一种促进青稞种子发芽和生长的非洲哈茨木霉及应用。

2、本发明所采取的技术方案是：

3、本发明的第一个方面，提供一种非洲哈茨木霉菌，为非洲哈茨木霉trichodermaafroharzianum m957，于2022年07月21日保藏与广东省微生物菌种保藏中心(gdmcc)，保藏编号为：gdmcc no.62645。

4、本发明的第二个方面，提供一种培养物，由本发明第一个方面所述非洲哈茨木霉菌在培养基中培养得到。

5、进一步地，根据本发明第二个方面所述的培养物，所述培养基为pdb培养基或固体发酵培养基；

6、所述固体发酵培养基的配方为：

7、固体料：干燥玉米芯40～60％，干燥小麦麸皮30～50％，干燥稻壳8～12％；

8、无机盐溶液：磷酸二氢钾3.0～4.0％，硫酸镁0.03～0.05％，硫酸铵3～5％，剩余为水；

9、更优选地，所述固体发酵培养基的配方为：

10、固体料：干燥玉米芯50％，干燥小麦麸皮40％，干燥稻壳10％；

11、无机盐溶液：磷酸二氢钾3.5％，硫酸镁0.04％，硫酸铵4％，剩余为水；

12、其中，固体料与无机盐溶液的质量比为1：(1.6～2.0)。

13、更优选地，所述固体料与无机盐溶液的质量比为1：1.8。

14、优选地，根据本发明第二个方面所述的培养物，所述培养物为本技术第一个方面所述非洲哈茨木霉菌的孢子悬液、种子液或发酵菌粉。

15、本发明的第三个方面，提供本发明第二个方面所述培养物的制备方法。

16、其中，所述孢子悬液的制备方法为：在pda固体培养基上活化本发明第一个方面所述的非洲哈茨木霉菌，26～30℃培养5～7天，用无菌蒸馏水洗下培养基表面的孢子，得孢子悬液。

17、优选地，28℃培养5～7天至绿色孢子产满平板，用无菌蒸馏水洗下培养基表面的孢子，得孢子悬液。

18、所述种子液或发酵菌粉的制备方法，包括以下步骤：

19、s1.在pda固体培养基上活化本发明第一个方面所述的非洲哈茨木霉菌；

20、s2.待所述非洲哈茨木霉菌活化产孢后，取少量孢子，移入pdb液体培养基中，26～30℃培养3～5天，得种子液；

21、s3.将步骤s2中所述种子液接种至固体发酵培养基，26～30℃发酵培养8～9天，得发酵液。

22、优选地，步骤s1中28℃培养5～7天至绿色孢子产满平板。

23、进一步地，步骤s3中发酵液干燥后得到哈茨木霉发酵菌粉。

24、本发明的第四个方面，提供一种菌剂，包括以下(ⅰ)～(ⅲ)中的至少一种：

25、(ⅰ)本发明第一个方面所述的非洲哈茨木霉菌；

26、(ⅱ)本发明第一个方面所述非洲哈茨木霉菌的分泌物或代谢物；

27、(ⅲ)本发明第二个方面所述的培养物。

28、本发明的第五个方面，提供一种微生物肥料，包括本发明第四个方面所述的菌剂，还包括其他可促进植物生长的物质。

29、更具体地，所述可促进植物生长物质为生长激素、化学肥料或促进植物生长的微生物中的至少一种。

30、本发明的第六个方面，提供本发明第一个方面所述的非洲哈茨木霉菌、本发明第二个方面所述的培养物或本发明第四个方面所述的菌剂在制备微生物肥料中的应用。

31、进一步地，所述微生物肥料中还包括其他可促进植物生长的物质。

32、更具体地，所述可促进植物生长物质为生长激素、化学肥料或促进植物生长的微生物中的至少一种。

33、本发明的第七个方面，提供本发明第一个方面所述的非洲哈茨木霉菌、本发明第二个方面所述的培养物或本发明第四个方面所述的菌剂在制备促进植物生长的试剂中的应用。

34、具体地，所述非洲哈茨木霉菌具有铁载体分泌能力；

35、更具体地，所述非洲哈茨木霉菌可分泌铁载体，帮助作物吸收铁元素，从而促进作物生长。

36、优选地，根据本发明第七个方面所述的应用，所述植物为禾本科植物。

37、更优选地，所述植物为青稞。

38、本发明的第八个方面，提供一种种植青稞的方法，包括浸种、发芽纸种植、收苗、移苗，所述浸种的溶液中含有本发明第一个方面所述的非洲哈茨木霉菌、本发明第二个方面所述的培养物或本发明第四个方面所述的菌剂。

39、更具体地，所述方法包括以下步骤：

40、s01.浸种:将青稞种子用酒精消毒杀菌后，用无菌水冲洗3遍。将种子加入所述非洲哈茨木霉菌菌液中浸泡。

41、s02.发芽：将培养皿放置若干层吸湿无菌水的滤纸作为发芽床，将青稞种子铺于滤纸上，置于25℃培养箱中培养发芽，发芽期间，每天定时定量滴加无菌水。

42、s03.定植：待青稞苗高至在20～30cm时，移入田间定植。

43、本发明的有益效果是：

44、本发明的提供了一种新的非洲哈茨木霉trichoderma afroharzianumm957，可以产生铁载体为作物提供生长必须的铁元素。

45、本发明还提供了上述非洲哈茨木霉菌的应用，该菌可有效促进大田作物青稞生长，且易于培养，可制备成适于工业化生产的、可商品化的非洲哈茨木霉生防产品，以浸种的方式可以促进青稞出苗、提高发芽率、发芽势，包衣促进青稞苗期生长，具有广阔的应用前景。