一种用于工业生产现制液体胶原蛋白肽的生产工艺及应用的制作方法

本发明属于食品生物，具体涉及一种用于工业生产现制液体胶原蛋白肽的生产工艺及应用。

背景技术：

1、胶原蛋白肽是一类以富含胶原蛋白的新鲜动物组织(包括皮、骨、筋、腱、鳞等)为原料，经过提取、水解、精制生产的、相对分子质量低于10000da的产品。胶原蛋白肽具有美容护肤、抗高血压、胃粘膜保护，预防和抑制关节炎、骨质疏松等诸多功效。胶原蛋白肽作为原料制备得到的胶原蛋白饮品更是受到年轻女性的追捧。

2、胶原蛋白肽的制备方法主要有，酶水解法、化学法、微生物发酵法和基因法。而化学法主要停留在实验室的小试研究，且研究成本较高；微生物发酵法的发酵时间较长，对发酵条件要求较苛刻，受多种发酵因素的影响，所制备得到的发酵产物成分不均一、多且杂；基因工程法中，基因的表达效率较低，且容易出现表达错误造成安全性问题。胶原蛋白肽最主要的一个特征就是小分子的含量高，若分子量高则会导致难以消化吸收。而酶水解可以将胶原蛋白水解成众多小片段的低分子量的胶原蛋白肽，具有更高的几率穿过肠屏障，使得生物活性增加，抗原性降低。

3、中国发明专利cn102533913b公开了一种采用共固定化双酶水解鱼鳞胶原蛋白制备抗氧化活性肽的方法，先采用交联法固定化双酶，对鱼鳞进行浸泡预处理，除去鱼银、色素物质和可溶性杂蛋白，利用共固定化酶对鱼鳞蛋白进行定向水解，得到鱼鳞蛋白酶解液，脱色脱腥，经超滤分离、真空浓缩、冷冻干燥等后处理得到活性肽。该方法酶解效率高，酶可以多次利用，酶解产物易于纯化；为淡水鱼废弃物的有效利用提供了一条新途径；且活性肽产品可用于药品、食品和化妆品等领域。

4、中国发明专利cn114045323a公开了一种多级酶解工艺制备鱼皮鱼鳞胶原蛋白肽粉的方法，包括步骤：将鱼皮鱼鳞清洗、破碎制成原料浆料后加氢氧化钠，超声处理，得初级水解料液；加碱性蛋白酶，得一级生化降解料液；再加入碱性蛋白酶，得到二级生化降解料液；加胶原蛋白酶得到三级生化降解料液；加中性蛋白酶、风味酶反应，得四级生化降解料液；加木瓜蛋白酶、胱氨酸、氯化钙溶液、葡萄糖酸钙，得到五级生化降解料液；过滤，得胶原蛋白肽胶液；加活性炭粉脱色、离心、冷冻干燥，即得胶原蛋白肽粉。该发明采用多级酶解工艺，经过脱腥处理，使用超声波辅助，再提高酶活性，水解度，利用率高，水解彻底，制成的胶原蛋白肽粉气味良好，产量高。

5、为了减少细菌的污染并且延长保质期，胶原蛋白肽原料多是以胶原蛋白原液经喷雾干燥得到的粉末形式存在。胶原蛋白肽粉末生产过程是要经过喷雾干燥的处理，喷雾干燥是要经过180℃左右的热风处理，高温处理会使胶原蛋白肽产生一定剂量的杂环胺，对消费者的健康安全形成隐患。而原料到胶原蛋白肽粉再到液体胶原蛋白肽的制作，生产商为了节约成本，往往使用快到保质期限的胶原蛋白肽粉，消费者喝到的胶原蛋白肽饮中的活性成分已大量流失，且口感发生了改变，安全健康指数下降。而且，酶水解胶原蛋白对酶的作用要求较高，选择不合适的酶和酶解条件，往往不能充分将胶原蛋白水解成小分子的胶原蛋白肽，补水及抗氧化能力较低。

6、鉴于此，本发明提供了液体胶原蛋白肽的制备方法，该方法能够高效的将鱼鳞胶原蛋白酶解成250-500的肽段比例高的胶原蛋白肽，且补水及抗氧化效果佳，胶原蛋白肽的口感好，具有较高的稳定性，无杂环胺等物质，安全健康。

技术实现思路

1、本发明针对现有技术存在的问题，提供了一种用于工业生产现制液体胶原蛋白肽的生产工艺及应用，该方法将鱼鳞加热润涨后进行酶解，在碱性蛋白酶和中性木瓜酶的作用下得到酶解液，然后灭酶提取、吸附、灭菌后得到液体胶原蛋白肽。本发明能够高效的将鱼鳞胶原蛋白酶解成250-500da范围内肽段比例高的胶原蛋白肽，且补水及抗氧化效果佳，胶原蛋白肽的口感好，具有较高的稳定性，无杂环胺等物质，安全健康。将其应用于胶原蛋白肽饮品的制备中，深受消费者的喜爱。

2、为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

3、一方面，本发明提供一种液体胶原蛋白肽的制备方法，包括步骤：

4、(1)润涨：鱼鳞与水混合，加热搅拌，得到预处理液；

5、(2)酶解：将预处理液冷却至45-60℃，加入氢氧化钠调节ph至6.8-7.4，加入碱性蛋白酶、中性木瓜蛋白酶进行酶解2-6h，得到酶解液；所述碱性蛋白酶与鱼鳞的重量比为0.2-0.7％:1；所述中性木瓜蛋白酶与鱼鳞的重量比为0.25-0.7％:1；

6、(3)灭酶提取：将酶解液升温至70-95℃保温20-50min，得到酶解蛋白肽溶液；

7、(4)吸附：酶解蛋白肽溶液降温至45-55℃后，添加活性炭并搅拌15-25min后，通过过滤设备后，经灭菌处理得到液体胶原蛋白肽。

8、优选地，步骤(1)中，所述鱼鳞与水的固液比为1:4-8，g/ml。

9、进一步优选地，所述鱼鳞与水的固液比为1:5-7，g/ml。

10、优选地，步骤(1)中，所述加热搅拌，具体为：加热至80-90℃，在转速为65-80rpm的条件下搅拌1-3h。

11、进一步优选地，所述加热搅拌，具体为：加热至85-88℃，在转速为70rpm的条件下搅拌2h。

12、优选地，步骤(2)中，所述冷却的温度为50℃。

13、优选地，步骤(2)中，所述氢氧化钠的浓度为2-8％。

14、优选地，步骤(2)中，所述碱性蛋白酶与中性木瓜蛋白酶的重量比为1-2.6:1。

15、进一步优选地，所述碱性蛋白酶与中性木瓜蛋白酶的重量比为2.5:1。

16、优选地，步骤(2)中，所述碱性蛋白酶与鱼鳞的重量比为0.6-0.65％:1。

17、进一步优选地，所述碱性蛋白酶与鱼鳞的重量比为0.64％:1。

18、优选地，步骤(2)中，所述中性木瓜蛋白酶与鱼鳞的重量比为0.2-0.3％:1。

19、进一步优选地，所述中性木瓜蛋白酶与鱼鳞的重量比为0.26％:1。

20、优选地，步骤(2)中，所述碱性蛋白酶、中性木瓜蛋白酶的酶活力为15-25万u/g。

21、进一步优选地，所述碱性蛋白酶、中性木瓜蛋白酶的酶活力为20万u/g。

22、优选地，步骤(3)中，所述灭酶提取，具体为：将所述酶解液升温至80-90℃保温40-50min，得到酶解蛋白肽溶液。

23、进一步优选地，所述灭酶提取，具体为：将所述酶解液升温至90℃保温45min，得到酶解蛋白肽溶液。

24、优选地，步骤(4)中，所述酶解蛋白肽溶液降温至50℃。

25、优选地，步骤(4)中，所述活性炭的添加量为鱼鳞质量的2-10％。

26、进一步优选地，所述活性炭的添加量为鱼鳞质量的6-8％。

27、优选地，步骤(4)中，所述过滤设备为陶瓷膜过滤设备和纳滤膜设备。

28、进一步优选地，所述陶瓷膜过滤设备的孔径为200nm，压力为0.4mpa；所述纳滤膜设备的纳滤膜孔径为200d。

29、优选地，步骤(4)中，所述灭菌处理具体为，灭菌温度为80-98℃，灭菌20-50min。

30、进一步优选地，所述灭菌处理具体为，灭菌温度为95℃，灭菌30min。

31、另一方面，本发明提供一种液体胶原蛋白肽，由上述制备方法所制备得到。

32、最后，本发明提供上述制备方法所制备得到的液体胶原蛋白肽在制备胶原蛋白肽饮品中的应用。

33、相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：

34、1、本发明提供了一种液体胶原蛋白肽的制备方法，鱼鳞经过润涨、酶解、灭酶提取、吸附等工艺制备得到液体胶原蛋白肽，其中酶解步骤中，在碱性条件下一次性加入碱性蛋白酶、中性木瓜蛋白酶，不仅简化了酶解工艺，而且经酶解得到的液体胶原蛋白肽中分子量在250-500da的肽段比例高，补水及抗氧化效果好。

35、2、本发明的液体胶原蛋白肽的制备方法中，无浓缩喷雾步骤，通过对特定条件的酶解、吸附，使液体胶原蛋白肽具有较好的口感，无异味风味。

36、3、本发明的液体胶原蛋白肽经过高温灭菌后具有很好的稳定性，不易染菌，且无杂环胺等物质，安全健康。