靶向ANAPC1提高METTL3转录活性的多肽及其生发多肽剂制备工艺的制作方法

本发明涉及生发多肽领域，尤其涉及靶向anapc1提高mettl3转录活性的多肽及其生发多肽剂制备工艺。

背景技术：

1、遗传因素、年龄增长、免疫异常、精神压力过大或应激、内分泌失调、服用某些药物、自身免疫等因素都可能导致脱发的发生，针对不同原因改善脱发的方法不同，对于生理性的脱发，毛囊的健康至关重要，如何有效的刺激毛囊的增殖分化，促进毛囊由休止期向生长期转化成为现阶段改善脱发情况的重要课题，目前研究表明，mettl3可以调控组织细胞内的m6a甲基化，在癌症领域，大量研究结果已经证明通过抑制mettl3甲基化的过程，可以对疾病起到一定程度上的缓解作用，而在毛囊修复领域，mettl3调控m6a的作用尚不明确。

2、中国专利cn104903345b公开了一种pedf衍生的多肽在治疗脱发和/或毛发脱色中的重要用途，提供了提供了一种衍生自pedf的合成肽，其具有20–44个氨基酸残基。还提供含有所述合成肽的药物组合物及其用途，所述肽可用于治疗对象的脱发和/或毛发脱色，其通过色素上皮衍生因子制毛囊萎缩，用于防止毛囊中的黑素细胞干细胞提早分化成为成黑素细胞，以及减少黑色素聚集以解决脱发问题，而未提出从维持mrna的甲基化水平，以促进毛囊发育的角度用以解决脱发问题的技术方案，同时也未提出如何保障具有生发能力的多肽质量稳定性的方法。

技术实现思路

1、为此，本发明提供靶向anapc1提高mettl3转录活性的多肽及其生发多肽剂制备工艺，可以解决通过靶向anapc1的多肽抑制mettl3的水解能力进而促进毛囊生长的技术问题。

2、为实现上述目的，一方面，本发明提供一种靶向anapc1提高mettl3转录活性的多肽，包括：所述多肽包括seq id no:1至seq id no:7所示的氨基酸序列中的至少一条。

3、进一步地，所述seq id no:1包括seq id no:9所示的氨基酸序列，所述seq idno:2包括seq id no:10所示的氨基酸序列；所述seq id no:3包括seq id no:11所示的氨基酸序列，所述seq id no:4包括seq id no:12所示的氨基酸序列；所述seq id no:5包括seq id no:13所示的氨基酸序列；所述seq id no:6包括seq id no:14所示的氨基酸序列；所述seq id no:7包括seq id no:15所示的氨基酸序列；所述seq id no:8包括seq id no:16所示的氨基酸序列。

4、进一步地，所述多肽对其修饰形成氢键或盐键，所述修饰为经修饰、取代、添加或删除一个或多个氨基酸。

5、另一方面，本发明提供一种靶向anapc1提高mettl3转录活性的生发多肽剂制备工艺，包括，步骤s1，所述生发多肽、溶剂与载体混合形成生发多肽液；

6、步骤s2，将生发多肽液经灌液枪分次注入冻干管内，中控单元获取一次灌注生发多肽液时冻干管内的气泡量对所述灌注枪的注入高度以减少下一灌注生发多肽液时冻干管内气泡量，同时调节用于盛放冻干管的置物架的振动幅度以使冻干管内气泡量降低；

7、步骤s3，冻干管内生发多肽液符合标准时，对冻干管内生发多肽液进行真空干燥形成生发多肽冻干；

8、步骤s4，通过对生成的生发多肽冻干进行活性和稳定性进行检测，判定多肽冻干的质量，若多肽冻干质量不符合标准，所述中控单元根据多肽冻干活性和稳定性对步骤s2中的生发多肽液的单次灌注量、灌注速率，步骤s3中的冷冻降温速率和升华升温速率进行调节，以使生发多肽冻干保存时间符合标准。

9、进一步地，在所述步骤s2中，所述中控单元根据生发多肽液注入量m选取所述灌注枪的注入高度，其中，

10、当m≤m1，所述中控单元选取第一预设注入高度h1为所述灌注枪的注入高度；

11、当m1＜m＜m2，所述中控单元选取第二预设注入高度h2为所述灌注枪的注入高度；

12、当m2≤m≤m3，所述中控单元选取第三预设注入高度h3为所述灌注枪的注入高度；

13、当m＞m3，所述中控单元选取第四预设注入高度h4为所述灌注枪的注入高度；

14、其中，所述中控单元预设生发多肽液注入量m，设定第一预设生发多肽液注入量m1、第二预设生发多肽液注入量m2、第三预设生发多肽液注入量m3，中控单元预设注入高度h，设定第一预设注入高度h1、第二预设注入高度h2、第三预设注入高度h3、第四预设注入高度h4。

15、进一步地，所述中控单元获取冻干管内气泡量d，中控单元将冻干管内气泡量与预设气泡量相比较，对所述灌注枪的注入高度进行调节，其中，

16、当d≤d1，所述中控单元不对灌注枪的注入高度进行调节；

17、当d1＜d＜d2，所述中控单元判定降低选取的灌注枪注入高度，并降低灌注速率；

18、当d≥d2，所述中控单元判定降低选取的灌注枪注入高度，同时启动与所述置物架相连接的振荡器，对置物架上的冻干管内生发多肽液进行振荡，并根据冻干管内气泡量对置物架的振动幅度；

19、其中，所述中控单元预设气泡量d，设定第一预设气泡量d1，第二预设气泡量d2。

20、进一步地，所述中控单元获取调节后的灌注枪注入高度hij与选取的灌注枪注入高度hi相比较，对灌注枪的注入高度、注入速率以及单次注入量进行调节，其中，

21、当hi-hij≤△h1，所述中控单元不对注入高度进行再次调节；

22、当△h1＜hi-hij＜△h2，所述中控单元将灌注枪的注入高度设为hi-△h1，并降低灌注速率；

23、当hi-hij≥△h2，所述中控单元将灌注枪的注入高度设为hi-△h1，并降低灌注枪单次注入量；

24、其中，所述中控单元预设高度差△h，设定第一预设高度差△h1，第二预设高度差△h2。

25、进一步地，所述中控单元根据生成的生发多肽冻干的活性a和稳定性w确定多肽冻干的质量，其中，

26、当(1+a/a0)×w/w0≤y0，所述中控单元判定当前生发多肽冻干不符合标准，中控单元根据生发多肽冻干的活性和稳定性对步骤s2中的单次灌注量、灌注速率以及步骤s3中的冷冻降温速率和升华升温速率进行调节；

27、当(1+a/a0)×w/w0＞y0，所述中控单元判定当前多肽冻干符合标准；

28、其中，a0为多肽冻干活性标准值，w0为多肽冻干稳定性标准值，所述中控单元预设评价参数y0。

29、进一步地，所述中控单元将当前生成的生发多肽冻干与营养液融合获取营养液中的生发多肽活性a1与将保存预设时间后的生发多肽冻干与营养液融合获取的营养液中的生发多肽活性a2确定当前生发多肽稳定性w，设定w＝(1+(a2-a0)/a0)/(1+(a1-a0)/a0)。

30、进一步地，所述中控单元判定当前生发多肽冻干不符合标准，中控单元根据当前生发多肽活性和稳定性对步骤s2中的单次灌注量、灌注速率以及步骤s3中的冷冻降温速率和升华升温速率进行调节，其中，

31、当a≤a1，所述中控单元提高所述步骤s3中冷冻降温速率，降低预设注入高度，同时降低生发多肽液的单次灌注量；

32、当a1＜a＜a2，所述中控单元降低预设注入高度，同时降低生发多肽液的单次灌注量；

33、当w＜w0，所述中控单元降低步骤s3中升华干燥的升温速率，同时将升华干燥的目标温度降低；

34、其中，所述中控单元预设生发多肽冻干活性a，设定第一预设生发多肽冻干活性a1，第二预设生发多肽冻干活性a2。

35、与现有技术相比，本发明的有益效果在于，本发明的靶向anapc1提高mettl3转录活性促进毛囊修复的多肽，通过阻断anapc1与其他泛素化蛋白形成复合体，降低mettl3的泛素化水平，抑制其在细胞内降解，使靶细胞能持续维持高甲基化水平，使得毛囊能够快速修复。同时，本发明的靶向anapc1效率高，通过微量多肽，即可达到良好的生发效果，靶向anapc1细胞透过率高，通过简单涂抹，小分子多肽即可渗透入毛囊深层发挥作用。

36、尤其，本发明将靶向anapc1提高mettl3转录活性的生发多肽与溶剂和载体混合后形成生发多肽液，并将其应用于特定的冻干制备装置中，通过向冻干管分次灌注生发多肽液以便于冻干管内生发多肽液中气泡的自然消解，同时根据实时灌注过程及时调控灌注量、灌注速率以及灌注高度保障各冻干管内气泡量符合标准，从中间过程保障生发多肽冻干的质量，冻干制备完成后，对生发多肽冻干的质量进行检测，根据检测结果对制备过程的各参数进行负反馈调控，保障下一制备出的生发多肽符合标准。

37、尤其，本发明实施例根据注入冻干管内的生发多肽液的注入量确定灌注枪的注入高度，以避免灌注枪的注入高度过高，导致灌液的时候引起冻干管内气泡的产生，进而影响生发多肽液在冻干制备过程中质量不稳定，更具体的，冻干内生发多肽液注入量越小，灌注枪的注入高度越第，冻干内生发多肽液注入量越大，灌注枪的注入高度越高。

38、尤其，本发明通过获取向冻干管内注入生发多肽液后产生的气泡量用以评价灌注枪的注入高度是否合适，若气泡量超过标准，则说明灌注枪的注入高度过高，产生大量的气泡，因此，中控单元判定降低当前注入阶段选取的注入高度，而当气泡量过多，为避免过多的气泡量影响冻干生产质量，中控单元判定启动振荡器，对置物架上的冻干管进行振荡，同时根据冻干管内气泡量对置物架的振动幅度进行调节，以将过多的气泡破碎，保证冻干生产质量。

39、尤其，本发明为避免调节后的灌注枪注入高度过低，与冻干管内的生发多肽液接触，造成各冻干管内生发多肽液质量不统一的问题，中控单元将选取的灌注枪注入高度与调节后的灌注枪注入高度的差值与预设高度差相比较，判定对灌注枪的注入高度、灌注速率以及生发多肽液的单次注入量进行调节，以确保冻干管内的生发多肽液符合标准，其中，当选取的灌注枪注入高度与调节后的灌注枪注入高度的差值小于等于第一预设高度差，中控单元判定以当前调节后的灌注枪注入高度、灌注速率以及单次注入量向冻干管内注入生发多肽液，当选取的灌注枪注入高度与调节后的灌注枪注入高度的差值在第一预设高度差和第二预设高度差之间，说明调节后的灌注枪注入高度略低，中控单元将灌注枪的注入高度设为当前限值，并降低灌注速率，减少气泡量的产生，当选取的灌注枪注入高度与调节后的灌注枪注入高度的差值大于等于第二预设高度差，说明调节后的灌注枪注入高度过低，中控单元将灌注枪的注入高度设为当前限值，并将生发多肽液单次注入量降低，以大幅度的降低气泡的产生。

40、尤其，本发明将预设保存时间后生发多肽与营养液融合后与新鲜生产出的生发多肽冻干与营养液融合后的多肽活性变化情况设为生发多肽冻干稳定性，并与生发多肽冻干的活性对生发多肽冻干的质量进行综合评价，以明确生发多肽冻干的质量情况，更具体的说，多肽的质量不仅需要多肽活性保持在一定强度，同时需要在将多肽的活性保持在一定程度上，不受保存时间的影响，因此，若中控单元根据生发多肽冻干活性和稳定性计算的评价参数低于预设评价参数，说明当前生发多肽冻干不符合标准，中控单元需根据多肽冻干活性或稳定性的情况对相应的参数进行调整，以满足多肽冻干的评价标准。

41、尤其，本发明中控单元在判定当前生发多肽冻干质量不符合预设标准时，通过分别将生发多肽冻干的活性和稳定性与其预设标准值相比较，确定对各步骤参数进行调节，以使下一生发多肽冻干质量符合标准，其中，当生发多肽冻干的活性小于等于第一预设生发多肽冻干活性时，说明当前生发多肽冻干质量不佳的原因在于生发多肽冻干活性过低，中控单元判定提高冻干制备过程冷冻过程中降温速率，以提高冻干制备的质量，避免生发多肽在慢速冷冻过程中产生机械作用，影响后续冻干制备，同时降低预设的注入高度和减少单次灌注量，以降低产生气泡的可能性，而当生发多肽冻干的活性在第一预设生发多肽冻干活性和第二预设生发多肽冻干活性之间，中控单元通过降低预设的注入高度和减少单次灌注量，以降低产生气泡的可能性，而在中控单元获取生发多肽冻干稳定性小于预设稳定性标准值时，中控单元通过降低步骤s3中升华干燥的升温速率和升华干燥的目标温度避免冻干升华过程中产生局部融化浓缩影响冻干稳定性。