黑木耳绿原酸合成相关基因及其应用

本发明属于真菌代谢产物，涉及绿原酸，具体涉及黑木耳绿原酸合成相关基因及其应用。

背景技术：

1、黑木耳属中温型菌类，广泛分布于温带及亚热带，是食药两用担子菌门大型真菌，富含蛋白质，脂肪，胡萝卜素，b族维生素，多糖以及铁，钙，磷等矿物质。黑木耳具有清肺益气，补血活血，镇静止痛，预防冠状动脉硬化，抗癌等功效。子实体是红褐色胶质物，片状(大小0.6～12厘米，厚1～2毫米)，有腹背两面。腹面光滑，色深，成熟时排列具有横隔的担子，每个担子上产生4个担孢子，背面长有绒毛。

2、绿原酸是一种在生物有氧呼吸过程中产生的苯丙素类物质，具有较强的抗氧化能力，此外还具有多种生物活性功能，例如增强机体免疫力，提高植物体的抗逆性，抑制部分微生物增长，抵御衰老，预防肿瘤，抗病毒，预防心血管疾病等。绿原酸在高等双子叶植物和蕨类植物中广泛存在，例如金银花，雪莲，柑橘等。与高等植物相比，真菌的生长周期短，种植占地面积小，更适合用于大规模生产，但由于目前真菌的绿原酸相关研究甚少，因此限制了真菌在绿原酸生产中的应用。

技术实现思路

1、针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于，提供黑木耳绿原酸合成相关基因及其应用，解决现有技术中由于现有技术中真菌在绿原酸生产中的应用受限的技术问题。

2、为了解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案予以实现：

3、黑木耳绿原酸合成相关基因，具体为aahqt基因、aahct基因和aac3h基因。

4、所述的aahqt基因的核苷酸序列为：5’-atgactgcctctagcatcttcgagcaagcggaggtcactatcactgcag tgcgcacagtccactgtgccaacaacagctcgcacgcgcacgccccgacgcacctaggcccgctcgactcgaccgtttgggccgtaattcctatcgccgtagtctttgtctatcggcgtctcgacgcggatgcagagctcatgcccattgaccgtgtacaacgcgccatggaacttgtgctcgaccactacccacacttgactggccggctgcacatcgactcaactaacggcgctcgtacttttgatcgtatcggctccggcgcagagcttgtaatggctgaatgtaacgctccgcttcccaaggaaaacttcacctttcacgacctgccagacgcagcgaacgccctgctgcctgccatcgtaacgtcgctcgatgaattctgcagaaacccgctgctgagcatcaagcacacgcgctttgcatgtgccagcgttgcgctcggcgtccgtctgccgcacacagtctgcgacgcggatgggttcttccagtttgtgcgcgatctggcggaagtctatcgcacatccaagctctcgaatccgccacacatacaaccctatctggctgatctgtatctgagcaattctccagaggaccgtgcggctgcactggcattccagccctcgatgtacaccgtagaaccactctcttctgcaccttccattccgtctgcatcaccgccgccgccagtgattggacgttctctgcgcttctcggcgcgccagctcgcgcagctcaaggagaaatataccccgaccagtggttggatatctacgttcgatgcgctgaccgcgcacctatacgatcgcgtcctcgccgcgcgagccgcagccggactatcgccgttcaccgacatcctgacttccgtgaacctgcgccccgctgggcgcctcgggctaccgtcccgctacttccccaatgccctccttgcgccgtacctcaccgtcacgcccgatacgcccacagcgctgacggtgcatgcgttagcggaatgcgctaaggaccgcgacgagatcgagaagatcgcacgctggattgccgcgcagcccgaccagcgtaagattcggttcacgttcggcggtgcaggcctcatgacgagcgcgtggtcgcggttcgacatttacgagggcgtggcgttcgataatgcgcccgcgctcgtcgtcccgcccttcacggccatctcgaacatcgacgggcttgcgtactacttgcccgttccgccgaacacgccgggcggcggcctggacgtgtatgttcccttcagcagtccggtctggggcattttggagcgcgatcctgagtggacaaggtttctcgacgtgtga-3’。

5、所述的aahct基因的核苷酸序列为：5’-atggtccgtccctgcgtcttacccatgtataccagctgtgctcaggcctt cgcagcagcaatctagcagtatcgtttcgcgagcccgcgtctttcccgcgcacaccaaggatggcgcggtgcacgacacaccactatccattatcgacgcgaccgttgcgcgattcagtccggcaagcgcgacatggatgtttaaccgtccgcacgattctgaccttatcgacaccgacaagttgcgacagtcgctcgtcgtcacgctcgacgcgtatccacagctcgcaggccagctgcgctgggcttgcttcgacgcgtccgggcgcggtggacacaagcgacgctatggccggctgatgctgcactacggcgcgcaggacgacccgggcgttgagcttgtcattgcgcacagcccgcacgcactcgccgacgtcgtgcctgacggcgaaacgcgccgagccgccggcgcgtgggatgctcgtatcgttccaacccttggtcttctgcccgatgacccgcctgttgcgctgcacgacctcaagacgttcgagggtttaccctgcaccatcgtccagcttacggcctttgcatgcggcgcgctcgcgctcgcgattaagatggcgcacccgatcgccgacgcccaggcggttatccagtttgcacgcgactgggcgtcagtgcaccgcgcgctcgctgctaatgctccgcttccttccttacagcccgtatttgacccgcagcggctggacgcgtgcgcggcgggcgatatcgacacggatgagccagacacagagctcgtgcgtcaggcacgcgcgctgcccatgcaccgctacgactggtgggcgggcgactcgagcgccgtacccgccgagctggcctcgcacgcgtcgctcgagccgcctgggcgcgcgctcccctgggccgagtgggatctcgcggcacccgtcgtgcacacgctcgtgtacttcgcgccgcaagagatcgcgcggatgtcgcacgccgccaaggcgcccggtgtgagcaggctcgatgcgctcctggcgcatgtatgggcggccatcgtgcgggcacgcggccttgctgaaaaaacggaagtgtatctggacgtaacgcttggactgcgacaccgcgtgtcgccgccgttgcccgagtcgttcatgggctcgcccatcgtccttacgcacgctgccgtccccgcacaaaccatcacaaccgacccttcgaaaactgcgctggccatccgcgaggcgatggcgctgtttaccccgtccgcgatcgctgcgctgctgcacgagcgcgcgttcgccagctgcccggcgcgatactgggacgctttcctcggcgcgcggcacaccatcgtgacgtcttggctccgcctcgacgtgtacgaactggacttcgggtttggcagcggcaaggcgcggtatgtggacgctctgatgcctgaggtagacggctgcatgcacatcatggaggccggcccgcgcgttgggaatggggacaagtggtacgacgaggccgtttgcgtcaacttgcacctcgctgcggatgttatggcgcgcgtgctggctgacccgctgttgcgcgtgtacagaaatgaggatgcctag-3’。

6、所述的aac3h基因的核苷酸序列为：5’-atgttcaatgtttccaacgaactcctcatctactttgctttcggcctcgcttt cgtcgctgtcttggtgaaattgcagtctggcaccaggcggcttcctccaggttagccgcacatcctactttcagtggcgacgaactgactagcgcttatgttgtagggcctgcgggacacttcatatcaggaaacgcacatcagttccccactggcccagggggtcgccagtactttgcctggtcgaagacattaggtacgcattgacgttccgaattcgcagtctacaccgctttctcatgatcaaccccgccttgtttgccacctcaggggacctgattcacctgcgcaattactcccgacacgtcatcgtactgaatagcgaacgcgccatacgcgatttaatcgtccggcgcgcggacatttacagcgaccgggcgcagacgaccatgtactgcgatctcgtcgggcgcggcaaaactgtcttctcgagcaattatggggaccgcttcaggcaatactcgaaacttctccaccaggcgctgagcaagactgcgattcaagattaccaatcggctcaggacgatgcgacgaataggatgctcagaagtatgctcaccaacccggacgcgttcgtccaacacattcgcacgtgagtctcccatcttccacgcggtttcttgctcacggttgcgggcaattcaagcttcgcgggtcgtatcataatgagagtcgcgtacggttacgagttgcagggcgaggacgattacttcatcggcctcgtccagcagtccatagcgctcggaaacgaggcgttcaagcctggacgctggctggtcgattctttccctcttcgtaagcatcgcccgattaacctgacaaaagcgcattctcacgcaccgacatgcgcagtacgctacgtccccagctggatgcccgcagcaggattcaagaaatgggctgcggcagccaagtctaagctggacgagatgacacgagctccccatgacatggtcaaggctcagatggtacgcatttgtgatcagcgcgcagcaaattatttatcaattatatgcaggcagcggggactgctgtaccttcatttacatcccgcaatctcgtcgataacgacggcgccccagtttcaacggaaagagaagaaatcgtgctgtgggtttcggcggctctctacgtcggcgccgcggacaccaccgtcgctgcattatcgaccttcatcctcctcatggtccgacatcctgaagtgcaacgcaaggcgcagaaagagattgacgctctcctcgggacgtcgagacttcccaatctcgaagatcgcgaacgattaccgtacgtcgaggctgtaatgaaggaatgcatgagtaagtacttgccttacaaagcaggtcgacctctgctcacgcgcttggcagggtataatactattggcccactggccctcggccactcactgaggcgcgaggacaattataatggattcacgctgcccaagggctcgacggtctacatgaacctatgggccgtcactcgcgacgaaggcatctactcgcgcccagagaccttccggccggagcgcttcatgccagacgagaacggtgccgtcgagcgcgatccctgggacatcgtgtttggctacgggttaaggtgtgttacgactcggacagcgattcgcattcgccgcggactgaactgatgcaaaacatcgcaggcggtgtccagggcggcatctggccgatgcaacgttgtttatggcgatcgcaaagatgcttgccgccttcagcttccgtcctgaatgcgatgaaaaaggggaggaacgtgtgccgcccgaggagtggacaccaggaccgaactggtgcgtttgagcggcagagcactggcagatcaccggtgaagctgacactctgcagcggcccaatgccattccgatgcaggatcttgccacgctcggaggatatgaagtcgttggtagaggaatcctcgcgatga-3’。

7、本发明还具有如下技术特征：

8、本发明还保护黑木耳绿原酸合成相关基因用于绿原酸生产中的应用，该应用通过采用栽培料调控黑木耳绿原酸合成相关基因的表达量，以提高真菌的绿原酸产量。

9、所述的栽培料，由以下原料组成：木屑，麸皮，豆粉，碳酸钙，蔗糖，过磷酸钙，氯化钾和水。

10、具体的，所述的栽培料，以质量份数计，由以下原料组成：木屑为800～900份，麸皮为50～200份，豆粉为10～30份，碳酸钙10～30份，蔗糖为0.5～5份，过磷酸钙为10～50份，氯化钾为0.5～5份，水为400～800份。

11、优选的，所述的栽培料，以质量份数计，由以下原料组成：木屑为860份，麸皮为100份，豆粉为20份，碳酸钙20份，蔗糖为2.5份，过磷酸钙为37.5份，氯化钾为2.5份，水为600份。

12、具体的，所述的真菌为黑木耳。

13、本发明与现有技术相比，具有如下技术效果：

14、(ⅰ)本发明首次揭示了黑木耳中参与绿原酸合成的相关基因，为真菌在绿原酸生产中的应用提供了理论基础。

15、(ⅱ)本发明首次提出了黑木耳绿原酸合成相关基因用于绿原酸生产中的应用，该应用采用栽培料调控黑木耳绿原酸合成相关基因的表达量，操作简单，易于实施，栽培料所添加的物质安全无害，价格低廉，经济实惠，便于大规模生产。