一种RORγ共价抑制化合物及其制备方法与应用

本发明属于生物医药。更具体地，涉及一种rorγ共价抑制化合物及其制备方法与应用。

背景技术：

1、核受体rors(retinoic acid receptor-related orphan nuclear receptors，维甲酸受体相关孤儿受体)家族包括三种亚型：rorα、rorβ、rorγ。其中，rorγ促进效应细胞th17分化并分泌炎症因子il-17，因此，抑制rorγ能够有效抑制th17细胞分化，减少炎症反应的发生。而慢性炎症是肿瘤的主要诱发因素：例如胃癌患者肿瘤微环境存在rorγ高表达，并伴随th17细胞数量增加，il-17等基因表达水平升高，并且还与肿瘤恶性程度密切相关，可见rorγ参与了胃癌的免疫病理进程(oncol lett.2016；12:897-903)。reya团队研究发现rorγ在胰腺癌进展过程中被上调，而抑制rorγ能有效抑制胰腺癌生长(cell.2019；177(3),572-586e22.)。可见，rorγ不但是治疗炎症、自身免疫性疾病的重要靶点，还是抗肿瘤药物开发的新靶点。靶向rorγ有多个候选化合物处于临床i/ii期研究阶段，但是目前开发的rorγ抑制剂均为非共价可逆抑制剂，抗癌活性不突出，且存在与靶标作用时间短、药效差、易耐药等缺点。

技术实现思路

1、本发明要解决的技术问题是克服现有靶向rorγ化合物抗癌活性不突出，且存在与靶标作用时间短、药效差、易耐药等缺陷和不足，提供一种与靶标作用时间长、药效强、不易耐药，且对癌症具有显著抑制作用的rorγ共价抑制化合物。

2、本发明的目的是提供所述rorγ共价抑制化合物的制备方法。

3、本发明另一目的是提供所述rorγ共价抑制化合物的应用。

4、本发明还有一个目的是提供一种rorγ共价抑制剂。

5、本发明上述目的通过以下技术方案实现：

6、一种rorγ共价抑制化合物，具有式(i)结构：

7、

8、其中，n为0～1的整数；x、y、z、w独立地选自c或n，当w为n时，没有取代基r4；l为r1为

9、ra、rb、rc各自独立地选自氢、卤素、氰基、取代或非取代的c1-c6烷基、取代或非取代的c1-c6烷氧基、取代或非取代的c2-c6烯基、取代或非取代的c3-c6环烷基，或ra和rb与相连的碳原子形成c3-c6环烷基；rd、re、rf各自独立地选自氢、卤素、取代或非取代的c1-c6烷基、取代或非取代的c1-c6烷氧基、取代或非取代的c2-c6烯基、取代或非取代的c3-c6环烷基；所述取代是指至少一个位点被以下取代基取代：卤素、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c3-c8的环烷基、c1-c6烷基氨基；r2、r3、r4各自独立地选自氢、卤素、c1-c6烷基、卤代c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6烷基氨基、c3-c6环烷基、c3-c6杂环烷基；r5选自氢、氰基、羟基、硝基、取代或非取代的砜基、取代或非取代的c1-c6烷基、取代或非取代的c1-c6烷氧基；所述取代是指至少1个位点被以下取代基取代：卤素、氰基、氨基、硝基、羟基、三氟甲基、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c1-6烷基氨基。

10、优选地，n为0～1的整数；x为c，w、y、z独立地选自c或n，当w为n时，没有取代基r4；l为r1为ra、rb、rc各自独立地选自氢、c1-c6烷基、氰基、卤素，或ra和rb与相连的碳原子形成c3-c6环烷基；rd、re、rf各自独立地选自氢、卤素、取代或非取代的c1-c6烷基，所述取代是指至少一个位点被c1-c6烷氧基取代；r2为氢，r3、r4各自独立地选自氢、卤素、c1-c6烷基、卤代c1-c6烷基；r5选自氢、氰基、硝基、砜基、c1-c6烷基取代砜基、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基。

11、更优选地，n为0～1的整数；x为c，w、y、z独立地选自c或n，当w为n时，没有取代基r4；l为r1为ra、rb、rc各自独立地选自氢、c1-c3烷基、氰基、卤素，或ra和rb与相连的碳原子形成环丙基；rd、re、rf各自独立地选自氢、卤素、取代或非取代的c1-c3烷基，所述取代是指至少一个位点被c1-c3烷氧基取代；r2为氢，r3、r4各自独立地选自氢、卤素、c1-c3烷基、卤代c1-c3烷基；r5选自氢、氰基、硝基、砜基、c1-c3烷基取代砜基、c1-c3烷基、c1-c3烷氧基。

12、进一步地，所述rorγ共价抑制化合物还可以是其药学上可接受的盐或溶剂化物。

13、另外的，本发明还提供了所述rorγ共价抑制化合物的制备方法，具体包括以下步骤：

14、

15、si1、化合物1-1与在催化剂、无机碱存在条件下发生suzuki反应，得到化合物1-2；

16、si2、化合物1-2与r1-cooh经过缩合反应，或与r1-cocl经过亲核取代反应，得到化合物1-3；

17、si3：化合物1-3经过还原反应，得到化合物1-4；

18、si4：化合物1-4与经过缩合反应，或者与经过亲核取代反应，得到目标产物(i)；

19、其中，n、x、y、z、w、l、r1、r2、r3、r4、r5的定义与上述一致。

20、进一步地，步骤si1中，所述催化剂选自1,1-双(二苯基膦)二荗铁二氯化钯或其二氯甲烷络合物、双二亚苄基丙酮钯中的一种或多种；所述无机碱选自碳酸铯、碳酸钾、磷酸钾中的一种或多种；所述催化剂比例为0.05～0.1当量；所述suzuki反应的温度为100～110℃，反应时间优选为1～16h，反应溶剂为二氧六环/水或乙腈/水(体积比2:1～5:1)。步骤si2、si4中，所述缩合反应的缩合剂选自hatu、edci、cdi、pybop中的一种或多种，有机碱选自三乙胺或dipea；所述亲核取代反应的温度为-10～10℃。步骤si3中，所述还原反应的还原剂选自铁粉、钯炭或雷尼镍/氢气中的一种或多种。

21、另外的，本发明还提供了所述rorγ共价抑制化合物的制备方法，具体包括以下步骤：

22、

23、sii1、化合物2-1与经过缩合反应，得到化合物2-2；

24、sii2：化合物2-2与在催化剂、无机碱存在条件下发生suzuki反应，得到化合物2-3；

25、sii3：化合物2-3经过还原反应，得到化合物2-4；

26、sii4：化合物2-4与r1-cooh经过缩合反应，或与r1-cocl经过亲核取代反应得到目标产物(i)；

27、其中，n、x、y、z、w、l、r1、r2、r3、r4、r5的定义与上述一致。

28、进一步地，步骤sii1中，所述缩合反应的缩合剂选自hatu、edci、cdi中的一种或多种，有机碱选自三乙胺或dipea。步骤sii2中，所述催化剂选自1,1-双(二苯基膦)二荗铁二氯化钯或其二氯甲烷络合物、双二亚苄基丙酮钯中的一种或多种；所述无机碱选自碳酸铯、碳酸钾、磷酸钾中的一种或多种；所述催化剂比例为0.05～0.1当量；所述suzuki反应的温度为100～110℃，反应时间优选为1～16h，反应溶剂为二氧六环/水或乙腈/水(体积比2:1～5:1)。步骤sii3中，所述还原反应的还原剂选自铁粉、钯炭或雷尼镍/氢气中的一种或多种。步骤sii4中，所述缩合反应的缩合剂选自hatu、edci、cdi中的一种或多种，有机碱选自三乙胺或dipea；所述亲核取代反应的温度为-10～10℃。

29、在rorγ配体结合域内部的结合口袋中存在一个半胱氨酸cys320，是可进行共价结合抑制剂的靶点。

30、另外的，本发明还要求保护所述rorγ共价抑制化合物在制备rorγ抑制剂中的应用。

31、进一步保护所述rorγ共价抑制化合物在制备防治与rorγ相关疾病药物中的应用。

32、优选地，所述与rorγ相关疾病有炎症、自身免疫性疾病、病毒感染、肿瘤或癌症和免疫缺陷障碍等。

33、另外的，基于本发明所述rorγ共价抑制化合物具有显著的抗肿瘤效果，可以抑制肿瘤生长与转移，因此，还要求保护所述rorγ共价抑制化合物在制备防治肿瘤药物中的应用。

34、优选地，所述肿瘤为癌症或良性肿瘤中的一种或几种。癌症可为胰腺癌、乳腺癌、肺癌、骨癌、胃癌、皮肤癌、头颈癌、子宫癌、卵巢癌、睾丸癌、输卵管癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、阴道癌、脑癌、垂体腺瘤、表皮样癌、t细胞淋巴瘤、慢性和急性白血病、大肠癌、肾癌、食道癌、乳房癌、宫颈癌、膀胱癌、纤维肉瘤、食道癌、膀胱癌、造血系统癌、淋巴瘤、髓母细胞瘤、成神经管细胞瘤、直肠腺癌、结肠癌、肝癌、腺样囊性癌、前列腺癌、头颈部鳞状细胞癌、脑癌、肝细胞癌、黑色素瘤、少突神经胶质瘤、胶质母细胞癌、卵巢透明细胞癌、卵巢浆液性囊腺癌、甲状腺癌、多发性骨髓瘤(aml)、套细胞淋巴瘤、三阴性乳腺癌、非小细胞肺癌。

35、本发明所述rorγ共价抑制化合物经试验证明，在去势抵抗性前列腺癌细胞(lncap、22rv1及c4-2b)中显著降低雄激素受体ar和雄激素受体可变剪切体ar-v的表达，抑制细胞增殖，降低细胞耐药性。

36、另外的，本发明还要求保护一种rorγ共价抑制剂，含有所述rorγ共价抑制化合物。

37、本发明具有以下有益效果：

38、本发明提供了一种rorγ共价抑制化合物，经过实验证明该化合物可以与与rorγ蛋白共价结合，对rorγ具有较好的选择特异性，可以显著抑制rorγ，防治与rorγ相关疾病；另外的，抑制rorγ可以降低细胞内ar基因表达和ar蛋白水平，诱导癌细胞的凋亡，抑制癌细胞的生长与转移，最终达到防治癌症的效果。