一种微管蛋白和NRP1双靶点化合物及其制法与应用

本发明涉及一种微管蛋白和nrp1双靶点化合物，还涉及上述双靶点化合物的制法与应用。

背景技术：

1、微管是真核细胞骨架的关键组成成分，由α和β微管蛋白异二聚体装配成长管状纤维结构，在维持细胞形态、细胞器的组成与运输，信号转导以及细胞分裂增殖等关键细胞过程中发挥重要作用。微管蛋白靶向药物可以通过影响微管蛋白的聚合和解聚，阻碍微管束的正常动态再生，进而阻止细胞有丝分裂时期纺锤体的形成，导致细胞周期停滞，最终诱导细胞凋亡。靶向微管蛋白的抗肿瘤药物可分为秋水仙碱位点抑制剂、长春碱位点抑制剂和紫杉烷结合位点抑制剂。与其他微管抑制剂相比，秋水仙碱位点抑制剂具有较为简单的化学结构以及能够克服多药耐药的优点。秋水仙碱位点抑制剂能够通过抑制微管蛋白的聚合，阻止肿瘤细胞微管的形成，将细胞周期阻滞在g2/m期，从而抑制肿瘤细胞有丝分裂和肿瘤生长。迄今为止，国内外已发现并报道了许多秋水仙碱位点抑制剂如秋水仙碱、ca4p以及oxi4503，但由于它们在抗肿瘤临床试验中导致了多器官功能障碍以及全身毒性，目前仍没有被fda批准上市的秋水仙碱位点抑制剂类抗癌药物。

2、神经纤毛蛋白-1（nrp1）是一种多功能跨膜蛋白，在神经轴突的生长、血管生成、肿瘤的发育和转移中起重要作用。nrp1已被证明是血管内皮生长因子（vegf）的共受体。它可以在细胞膜上同时结合vegf和血管内皮生长因子受体2（vegf）形成三元复合物，从而增强vegf介导的信号传导，促进肿瘤血管生成，最终导致肿瘤迁移。此外，临床研究表明，过表达的nrp1与前列腺癌的转移能力、进展以及临床分期呈正相关。因此，利用nrp1抑制剂阻断nrp1-vegf-vegfr2信号通路，可能是抑制肿瘤血管生成，从而阻止前列腺癌转移的有效策略。然而，临床实验结果表明，由于抗血管药物主要是抑制肿瘤细胞生长而对肿瘤组织的毒性较低，抗血管生成药物单药治疗方案在癌症治疗方面效果十分有限。

3、联合给药已被广泛用于由多种信号通路异常引起的复杂性疾病的治疗，相对于单靶点给药联合治疗往往具有更好的抗肿瘤疗效。然而联合给药往往会存在下列问题：联合给药时更易发生急性毒性和迟发性毒性可能更高，特别是在联合使用选择性不强的药物时；由于联合给药涉及多种药物，需要考虑药物的比例和剂量问题，用药方式往往比较复杂，易导致患者依从性差；联合给药可能会导致药物在体内代谢中相互干扰，无法准确预测其药代动力学性质；联合给药可能会出现由药物—药物相互作用引起的不良反应，此外联合给药的药效学特征也难以准确预测。

技术实现思路

1、发明目的：本发明的目的是提供一种疗效好且减少耐药性和毒性的微管蛋白和nrp1双靶点化合物，第二目的是提供上述化合物的制法与应用。

2、技术方案：本发明所述的一种微管蛋白和nrp1双靶点化合物或其立体异构体、或其药学上可接受的盐，所述化合物为结构式如式（i）所示的化合物：

3、。

4、上述化合物的制备方法，包括如下步骤：

5、（1）将原料1溶于无水乙醇，室温下加入硼氢化钠（nabh4），室温反应，反应结束后冰浴下加水淬灭反应，分离纯化得到中间体2；

6、（2）将中间体2溶于无水乙醇，加入三溴化磷（pbr3）和吡啶，加热反应，反应结束后冰浴下加水淬灭反应，分离纯化得到中间体3；

7、（3）将中间体3与三苯基膦溶于三氯甲烷，加热反应，反应结束后分离纯化得到中间体4；

8、（4）氩气保护下将中间体4溶于四氢呋喃（thf），冷却后滴加正丁基锂的己烷溶液，加入3-硝基-4-甲氧基苯甲醛的无水thf溶液，随后室温反应，反应结束后冰浴下加水淬灭反应，分离纯化得到中间体5；

9、（5）将中间体5溶于乙醇（etoh）和水的混合液，依次加入铁粉和氯化铵（nh4cl），避光加热回流，分离纯化得到中间体6；

10、（6）将中间体6溶于冰醋酸，滴加丁二酸酐的冰醋酸溶液，反应分离纯化得到中间体7；

11、（7）将中间体7溶于n,n-二甲基甲酰胺（dmf），加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸盐（hatu），冰浴反应，随后加入 (l)-精氨酸甲酯二盐酸盐，加入dipea使 (l)-精氨酸甲酯完全溶解，反应分离纯化得到中间体8；

12、（8）将中间体8溶于thf，加入氢氧化锂（lioh）的水溶液，反应分离纯化得到微管蛋白和nrp1双靶点化合物；

13、。

14、上述制备方法具体包括如下步骤：

15、（1）将原料1溶于无水乙醇，室温下分批加入nabh4，室温反应，反应结束后冰浴下加水淬灭反应，分离纯化得到中间体2；

16、（2）将中间体2溶于无水乙醇，按顺序加入pbr3和吡啶，加热反应，反应结束后冰浴下加水淬灭反应，分离纯化得到中间体3；

17、（3）将中间体3与三苯基膦溶于三氯甲烷，加热反应，反应结束后分离纯化得到中间体4；

18、（4）氩气保护下，将中间体4溶于thf，冷却后滴加n-buli的1.6 m己烷溶液，反应一段时间后一次性加入3-硝基-4-甲氧基苯甲醛的无水thf溶液，随后室温反应，反应结束后冰浴下加水淬灭反应，分离纯化得到中间体5；

19、（5）将中间体5溶于etoh:h2o=10:1混合液，依次加入铁粉和nh4cl，避光加热回流，分离纯化得到中间体6；

20、（6）将中间体6溶于冰醋酸，滴加丁二酸酐的冰醋酸溶液，室温反应，分离纯化得到中间体7；

21、（7）将中间体7溶于dmf，加入hatu，冰浴反应，随后加入 (l)-精氨酸甲酯二盐酸盐，加入dipea使 (l)-精氨酸甲酯完全溶解，室温反应，分离纯化得到中间体8；

22、（8）将中间体8溶于thf，加入1 m lioh的水溶液，室温反应，反应结束后，分离纯化得到微管蛋白和nrp1双靶点化合物。

23、本发明还提供一种药物组合物，由式（i）所示的双靶点化合物或其立体异构体、或其药学上可接受的盐和一种或多种药学上可接受的载体和/或辅料制备而成的制剂。

24、优选的，所述药学上可接受的载体和/或辅料包括稀释剂、粘合剂、表面活性剂、致湿剂、润滑剂、填充剂、崩解剂、着色剂、助流剂、稳定剂、助悬剂、缓冲剂、乳化剂、成粒剂、抗粘着剂、胶凝剂、吸收延迟剂、溶解抑制剂、增强剂、吸附剂、螯合剂、防腐剂、着色剂、矫味剂和甜味剂。

25、优选的，所述制剂为片剂、胶囊剂、口服液、注射剂、冻干粉针剂、透皮剂、气雾剂、固体制剂、脂质体、缓控释制剂、丸剂、栓剂、颗粒剂、散剂、纳米制剂、糖浆剂、酒剂、酊剂、露剂。

26、上述化合物或其立体异构体、或其药学上可接受的盐，以及上述药物组合物在制备微管蛋白/nrp1双靶点抑制剂药物中的应用。

27、上述化合物或其立体异构体、或其药学上可接受的盐，以及上述药物组合物在制备用于抑制vegf/vegf2信号通路的药物中的应用。

28、上述化合物或其立体异构体、或其药学上可接受的盐，以及上述药物组合物在制备抗血管生成药物中的应用。

29、上述化合物或其立体异构体、或其药学上可接受的盐，以及上述药物组合物在制备用于治疗和/或预防肿瘤的药物中的应用。

30、进一步的，所述肿瘤包括前列腺癌、结肠癌、肺癌、乳腺癌、胃癌、食管癌、宫颈癌、神经胶质瘤、鼻咽瘤、肝癌、卵巢癌或淋巴癌。

31、有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下显著优点：（1）本发明的微管蛋白和nrp1双靶点化合物，避免了联合给药局限性并产生更好的抗肿瘤疗效，可以增强肿瘤细胞的化疗敏感性，化合物对细胞内nrp1介导的vegf/vegfr2信号通路的抑制率超过50%，具有显著的抑制作用；（2）微管蛋白和nrp1双靶点单分子药物能够有效抑制细胞增殖、促进细胞凋亡，此外还具有良好的体内抗肿瘤活性且无明显的毒副作用。