一种芳氧氨基苯甲酸类衍生物及其制备方法和应用

本发明属于衍生物及其合成领域，具体是一种芳氧氨基苯甲酸类衍生物及其制备方法和应用。

背景技术：

1、法尼醇x受体(farnesoid x receptor，fxr)也称为胆汁酸受体，属于核受体超家族的一员，主要分布于肝脏、肠道等器官。fxr在多种代谢途径中起到调节作用，在胆汁酸、胆固醇、脂质以及葡萄糖代谢中发挥着重要的作用，此外，fxr与胆汁淤积、非酒精性脂肪肝病、非酒精性脂肪性肝炎、胆结石、糖尿病、动脉粥样硬化和癌症等多种疾病有紧密的联系。

2、非酒精性脂肪性肝病(nafld)发病机制复杂，是目前全球最常见的慢性肝脏疾病。非酒精性脂肪性肝炎(nash)是nafld的一个进展阶段，是一种代谢综合征的肝脏表现。fxr作为关键的代谢调节因子，已成为治疗nafld、nash等慢性肝脏疾病的一个非常有前景的药物靶点(zhou s，et al.biomed pharmaco,2022,154:113577；panzitt k,et al.mol cellendocrinol,2022:111678)。

3、fxr调节剂包括fxr激动剂和拮抗剂(抑制剂)。目前众多医药公司和研究院所对fxr激动剂的研发投入了大量的人力物力，发现并报道了许多不同结构类型的fxr激动剂。fxr激动剂总体上可分为两类：一类为甾体类，以intercept公司的奥贝胆酸(obeticholicacid，oca)为代表；另一类是非甾体类，以glaxosmithkline公司的gw4064为代表。胆酸衍生的fxr激动剂oca作为原发性胆汁性胆管炎治疗药物，已经于2016年5月被美国fda批准上市。oca针对nash适应症的临床三期研究已经结束，结果显示，oca在治疗nash合并肝纤维化是有效的，但是在结果中也提示，对血脂有负面影响，包括升高低密度脂蛋白(ldl)和降低高密度脂蛋白(hdl)水平，在心血管疾病风险较高的患者群体中，这些负面影响可能会带来大的副作用，并且部分患者出现皮肤瘙痒，且发生率不低于5％等安全性问题。这些不良反应将使oca在nash临床使用上受到限制。gw4064是葛兰素史克公司通过高通量筛选得到的第一个非甾体类fxr激动剂，具有高选择性且体外活性强。但是该化合物生物利用度很低，在大鼠体内不足10％，因此并没有进入临床开发阶段。而其他研究开发的一些非甾体活性化合物拥有良好的fxr靶点选择性，但大都存在溶解性和药代动力学性质差的问题。

4、文献报道氨基苯甲酸类化合物是一类的fxr激动剂，例如bioorganic&medicinalchemistry,2015,23:499–514；bioorganic&medicinal chemistry,2014,22(8):2447-2460；journal of medicinal chemistry,2014,57(19):8035–8055；chemmedchem,2018,13(23):2530-2545。

5、尽管氨基苯甲酸类化合物的结构改造获得人们的广泛关注，数目众多的氨基苯甲酸类衍生物已被合成出来，但在生物活性、水溶性及口服生物利用度等成药性方面依然存在不足，到目前为止还未有一款氨基苯甲酸类衍生物进入临床试验研究。

技术实现思路

1、为了开拓临床药物的资源，本发明的目的是提供芳氧氨基苯甲酸类衍生物的制备方法及其应用。制备时选择不同的取代酚类或萘酚类衍生物为原料，经多步化学合成反应制备得到芳氧氨基苯甲酸类衍生物。

2、本发明的第一个方面，提供了如下式(i)所示的芳氧氨基苯甲酸类衍生物，

3、

4、其中：ar为取代苯基或萘基，优先选自4-乙基苯基、4-叔丁基苯基、2，4-二叔丁基苯基、4-乙酰基苯基、4-苄氧基苯基、4-丙酰基苯基、联苯基、萘基；

5、n独立选自2、3；

6、r1、r2各自独立选自氢、甲基、乙基；

7、r1、r2及—cooh基团位于苯环的任意位置。

8、在本发明的第一方面中，式(i)所示衍生物，选自以下化合物：

9、

10、

11、本发明中，如式(i)所示衍生物的药学上可接受的盐较佳的为本发明的羧基和碱性化合物反应产生的盐。所述的碱性化合物较佳的选自氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠或碳酸氢钾等。上述药学上可接受的盐容易分离，式(i)所示的化合物可经柱层析纯化，式(i)所示衍生物与碱性化合物成盐可经重结晶纯化。

12、本发明的第二方面，提供结构如通式(i)所示的衍生物的制备方法，制备路线如下：

13、

14、制备方法包括如下步骤：

15、步骤a.硝基苯甲酸及其不同的衍生物ii和氨基苯甲酸乙酯及其不同的衍生物iii，在适当溶剂和缩合试剂下进行酰胺化反应，制备得到中间体化合物iv；

16、步骤b.式iv所示化合物在有机溶剂和还原试剂下，经过还原反应制备得到化合物5a-f；

17、步骤c.化合物5a-f分别与芳氧羧酸类衍生物6a-p进行酰胺化反应，生成式vi所示的芳氧氨基苯甲酸酯类衍生物；

18、步骤d.式vi所示化合物在有机溶剂以及碱性条件下水解，然后酸化反应制备得到式(i)所示的衍生物。

19、其中式(ii)、式(iii)、式(iv)、化合物5a-f和式(vi)所示化合物及式(i)所示化合物中r1、r2定义一致。化合物6a-p所示化合物、式(vi)所示化合物及式(i)所示化合物中ar、n定义一致。

20、进一步地，制备方法，步骤a所述的硝基苯甲酸及其不同的衍生物ii与氨基苯甲酸乙酯及其不同的衍生物iii的摩尔比为1:1.1，反应温度为30～45℃；

21、步骤a所述适当溶剂，选自n,n-二甲基甲酰胺(dmf)、四氢呋喃(thf)、二氯甲烷、三氯甲烷、二甲基亚砜(dmso)中一种；

22、步骤a所述的缩合试剂，缩合条件可适当有所差别，优先选自2-(7-氮杂苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯(简称：hatu)、n,n-二异丙基乙胺(简称：dipea)、dmf、反应温度为30～45℃；1-乙基-3(3-二甲基丙胺)碳二亚胺盐酸盐(简称：edci·hcl)、1-羟基苯并三唑(简称：hobt)，dmf、反应温度为30～45℃；二环己基碳二亚胺作为缩合剂，四氢呋喃，反应温度为30～45℃。

23、进一步地，制备方法，步骤b所述的式(iv)所示化合物与还原试剂的摩尔比为1:5，反应温度为室温～45℃；

24、步骤b所述的有机溶剂，选自乙醇、甲醇、四氢呋喃、二氯甲烷中的一种；

25、步骤b所述的还原试剂，选自锌粉或铁粉；

26、步骤b中，本领域技术人员可以对反应条件做适当选择，例如，一种优选的操作实施方式可以是：式iv所示化合物在乙醇中，加锌粉还原得到衍生物5a-f；或者将式iv所示化合物在氢气氛围下，以5％ pd/c为催化剂进行氢化还原制备得到化合物5a-f。

27、进一步地，制备方法，步骤c所述的化合物5a-f与化合物6a-p的摩尔比为1:1.3；

28、化合物6a-p可通过购买或者制备得到；

29、步骤c与步骤a方法相同，本领域技术人员可以对反应条件做适当选择。

30、进一步地，制备方法，步骤d所述的式(vi)所示化合物与碱的摩尔比为1:1.1；

31、步骤d所述的有机溶剂，选自乙醇、甲醇、四氢呋喃中的一种；

32、步骤d所述的碱，选自氢氧化钠或氢氧化钾；

33、步骤d所述的酸化反应条件，本领域技术人员可以对反应条件做适当选择，优先选用1mol/l盐酸溶液，调节ph＝1～2，在0～5℃下反应。

34、本发明的第三方面，将制备得到的衍生物或其药学上可接受的盐、或其药物组合物作为fxr调节剂，用于fxr相关的疾病，如非酒精性脂肪性肝病、非酒精性脂肪性肝炎、胆汁淤积性肝病、高脂血症、代谢性疾病如糖尿病及并发症等。本发明首先通过双荧光素酶报告基因检测法对所合成的芳氧氨基苯甲酸类衍生物进行fxr激动活性筛选，以及细胞毒活性测试，筛选出的优选化合物，并在体外进行了对游离脂肪酸诱导hepg-2细胞脂肪变性的改善作用研究，在体内进行了抗高脂饮食诱导的nash小鼠的药效学研究，以及体内药代动力学和急性毒性研究。研究证明本发明芳氧氨基苯甲酸类衍生物可作为非甾体fxr调节剂，这类化合物可以有效地激动fxr受体，有效改善高脂饮食诱导的nash小鼠血脂异常，与本领域已报道的化合物相比具有改进的药理活性、物理化学性质和药代动力学性质。