一种银耳菌株、InDel标记及引物和鉴定方法

本发明涉及食用菌，具体涉及一种银耳菌株、indel标记及引物和鉴定方法。

背景技术：

1、银耳，又称作白木耳、雪耳、银耳子等，属于真菌类银耳科银耳属，是担子菌门真菌银耳的子实体，有“菌中之冠”的美称。银耳子实体纯白色至乳白色，柔软洁白，半透明，富有弹性，其具有“强精、补肾、润肺、生津、止咳、清热、养胃、补气、和血、强心、壮身、补脑、提神”的功效。目前已经开放了银耳糖浆、口服液等产品。

2、但随着人们生活品质的提高，对于现有的银耳品种要求也越来越高，开发新的银耳品种也是极有意义的。

技术实现思路

1、为了解决现有技术存在的上述不足，本发明的目的是提供一种银耳菌株、indel标记及引物和鉴定方法，该银耳菌株是一种新的银耳品种，其命名为福银雪耳twh-sd2。

2、本发明解决上述技术问题的技术方案如下：提供一种银耳(tremellafuciformis)菌株，命名为银耳(tremella fuciformis)twh-sd2(下称福银雪耳twh-sd2)，于2023年04月07日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no：m 2023495，保藏地址为中国.武汉.武汉大学。

3、本发明提供的福银雪耳twh-sd2是通过亲本“tr01”和“绣银1号”tww01-ax杂交选育而成，福银雪耳twh-sd2耳片边缘区别于对照品种tr01，为非光滑规律性凹凸呈锯齿状，耳心硬度部分较对照小，蒂头小，有效耳片部分多，耳片连接方式更加分散，耳片更加均匀、柔软，在口感上表现为更加q弹且在产品运输过程中可以更好地抵御机械力压迫导致的形变，子实体颜色雪白，生产周期缩短3-5天，朵型更加圆整蓬松，生物学效率高，具有很好的开发应用前景。

4、本发明还提供了用于鉴定上述福银雪耳twh-sd2品种的indel标记，该indel标记位于436bp-443bp，核苷酸序列为tttgacat；或

5、位于533bp-633bp，核苷酸序列为tttcccgaataacaacggacagagccaaacgggcatgtgtatgccctggtcccacttgcgcacagactgaggtcccgtaggtgcagaggacatggtctat；或

6、位于802bp-899bp，核苷酸序列为

7、acggtacgcgacgctcccgaaattcccaagaagagagggacgcttggatagagcatcgagtctcctctagcaggccggagggggtggatcccatcttc；或

8、位于838bp-876bp，核苷酸序列为

9、gggacgcttggatagagcatcgagtctcctctagcaggc；或

10、位于183bp-217bp，核苷酸序列为

11、aaggatcacagacgacatctcaacatagagtgaca；或

12、位于251bp-257bp，核苷酸序列为tgtgcgg；或

13、位于275bp-294bp，核苷酸序列为ccgacgctgatccggacaac；或

14、位于172bp-256bp，核苷酸序列为

15、gacttgatgtgctgggcagacagcacgcgcatcccacacggcatcgaagtcggacactagcgtcgcgcctcgggatccatgaaa；或

16、位于150bp-172bp，核苷酸序列为tatgacagctccgatacactgag；或

17、位于255bp-282bp，核苷酸序列为

18、aaactgaatgtccgacgcagatgtcggt。

19、本发明还提供了用于扩增上述福银雪耳twh-sd2品种indel标记的引物对，具体引物如下：

20、引物对1：

21、61-f：5’-atatggccaaggcgatccagtcg-3’；

22、61-r：5’-ccgtggtataggagcttctgatgc-3’；

23、引物对2：

24、74-f：5’-cgttgtgcagctgtctcttcttgtc-3’；

25、74-r：5’-taccgtggcctgcctggagatg-3’；

26、引物对3：

27、80-f：5’-atgcggagcgcacagagcatca-3’；

28、80-r：5’-tacgagctcggacgagccctcac-3’。

29、采用上述引物对鉴定福银雪耳twh-sd2品种的方法，包括以下步骤：

30、(1)提取待测样品的基因组dna；

31、(2)以基因组dna为模板，利用上述引物对对基因组dna进行pcr扩增，得到pcr扩增产物；

32、(3)将pcr扩增产物回收、测序、比对，若位于436bp-443bp，核苷酸序列为tttgacat；或

33、位于533bp-633bp，核苷酸序列为tttcccgaataacaacggacagagccaaacgggcatgtgtatgccctggtcccacttgcgcacagactgaggtcccgtaggtgcagaggacatggtctat；或

34、位于802bp-899bp，核苷酸序列为

35、acggtacgcgacgctcccgaaattcccaagaagagagggacgcttggatagagcatcgagtctcctctagcaggccggagggggtggatcccatcttc；或

36、位于838bp-876bp，核苷酸序列为

37、gggacgcttggatagagcatcgagtctcctctagcaggc；或

38、位于183bp-217bp，核苷酸序列为

39、aaggatcacagacgacatctcaacatagagtgaca；或

40、位于251bp-257bp，核苷酸序列为tgtgcgg；或

41、位于275bp-294bp，核苷酸序列为ccgacgctgatccggacaac；或

42、位于172bp-256bp，核苷酸序列为

43、gacttgatgtgctgggcagacagcacgcgcatcccacacggcatcgaagtcggacactagcgtcgcgcctcgggatccatgaaa；或

44、位于150bp-172bp，核苷酸序列为tatgacagctccgatacactgag；或

45、位于255bp-282bp，核苷酸序列为aaactgaatgtccgacgcagatgtcggt，则说明样品为福银雪耳twh-sd2。

46、在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进：

47、进一步，pcr扩增体系为：上下游引物各1μl，dna模板1μl，2×easytaq pcrsupermix 12.5μl，ddh2o 9.5μl。

48、进一步，pcr扩增程序为：94℃预变性5min，94℃变性30s，58℃退火30s，72℃延伸1min，33个循环，72℃延伸5min，4℃保存。

49、本发明具有以下有益效果：

50、本发明获得了一种新的银耳品种，将其命名为福银雪耳twh-sd2，其子实体颜色雪白，柔软有弹性，朵型圆整，形态呈绣球型，多个丛生瓣片组成；耳片细密较厚、边缘为非光滑规律性凹凸呈锯齿状。该品种主要优点为：耳心硬度部分小，蒂头小，从而有效耳片部分多，成品率高；耳片连接方式更加分散，耳片更加均匀、柔软，在口感上表现为更加q弹，在产品运输过程中可以更好地抵御机械力压迫导致的形变；朵型更加圆整蓬松，透气性好，不易染杂菌；生物学效率高，生产周期缩短3-5天，具有很好的开发应用前景。

51、本发明还提供了鉴定上述新品种福银雪耳twh-sd2的indel标记、引物和鉴定方法，能够很好的将福银雪耳twh-sd2与其他银耳品种尤其是与亲本区分开来。