本发明涉及岩藻多糖制备，具体涉及一种高效率提取高纯度的岩藻多糖制备方法。
背景技术：
1、岩藻多糖又名褐藻糖胶或褐藻多糖硫酸酯，是一类硫酸化多糖，一般存在于褐藻和棘皮动物中，是从海带等大型褐藻中提取出的一种天然活性多糖。岩藻多糖是一种高度不均一的水溶性杂多糖，其主要成分是岩藻糖，即a-l-盐藻糖-4-硫酸酯的多聚物，同时还含有不同比例的半乳糖、木糖、葡萄糖醛酸和少量蛋白质等。l-岩藻糖4硫酸酯的结构特征是1，2-联接的聚a-l-吡喃岩藻糖。主链由岩藻糖组成，他们共同的特点是在岩藻糖上含有大量的硫酸基。岩藻多糖的存在形式多为乳白色粉末溶于水.不落于乙醇、丙酮、氯仿等有机溶剂，精制的岩藻多糖很易溶于水、生理盐水(0.85％)或各种缓冲液中，可配成3％溶液，1％溶液有粘性，与其他粘质物相混有膨胀的性质等。
2、充分发掘和利用岩藻多糖这一天然多糖资源，对提高褐藻、海带的附加值，发展我国的藻类加业事业具有深远的意义。因此如能研究高效率提取高纯度的岩藻多糖制备方法，就能为有效的开发和利用藻类资源提供理论依据，岩藻多糖也必将在临床新药和保健品开发上具有广阔的前景。
技术实现思路
1、本发明提供了一种高效率提取高纯度的岩藻多糖制备方法，解决了以上所述的技术问题。
2、本发明解决上述技术问题的方案如下：
3、一种高效率提取高纯度的岩藻多糖制备方法，包括以下步骤：
4、s1、原料处理：采集新鲜而有代表性的海藻，并去除不需要的杂物、沙粒；
5、s2、破碎：将干燥之后的岩藻样品用研钵或者球磨机进行粉碎；
6、s3、溶解：将粉碎后的岩藻加入到反应釜中，加入水搅拌均匀，形成含有岩藻多糖的溶液；
7、s4、过滤：将浸泡在溶液中的岩藻用离心机离心分离，去除海藻颗粒、杂质和大分子蛋白质，分离出岩藻多糖；
8、s5、沉淀：利用中速或高速离心机将目标产物沉淀下来；
9、s6、洗涤：将岩藻多糖用水或冰醋酸进行冲洗和洗涤，去除其中的杂质和残留物；
10、s7、浓缩：将洗涤好的溶液通过济南反应釜或者其他的浓缩设备进行浓缩处理，便于后续的分离和纯化；
11、s8、分离纯化：用酸碱法、醇沉法、超滤法或离子交换层析法对岩藻多糖进行分离纯化；
12、s9、超滤提纯：通过纳滤或超滤的方法，去除大小不同的杂质和小分子物质，保留大分子岩藻多糖tc-1；
13、s10、胶体电泳分离：利用胶体电泳原理，将不同分子量大小的多糖tc进行分离；
14、s11、活性炭吸附：采用活性炭吸附技术，去除岩藻多糖中的颜色和异味杂质，提高岩藻多糖的纯度；
15、s12、干燥：利用逆渗透浓缩、淀粉干燥技术，将多糖液体转化为干燥状态，以便于保存和使用；
16、s13、进一步纯化：利用高效液相色谱(hplc)技术，将目标多糖分离出来并收集纯品。
17、本发明的有益效果是：
18、1.提高了岩藻多糖的提取效率，使得岩藻多糖能够更加高效地被提取出来。
19、2.且能够大幅度降低岩藻多糖样品的杂质含量，从而提高了岩藻多糖的纯度。
20、3.不仅能够对多糖进行浓缩和提纯，还能对多糖进行胶体电泳分离，大大提高了多糖的纯度和分离效果。
21、4.通过控制破碎温度和溶液ph值，以及利用超声波均质机辅助岩藻多糖溶解等技术，能够进一步提高结果的准确性和稳定性。
22、5.能够对岩藻多糖进行高效液相色谱分离，能够得到更加高纯度的岩藻多糖。
23、6.采用了活性炭吸附技术，能够有效去除岩藻多糖中的异味和颜色杂质，进一步提高了岩藻多糖的纯度和品质。
24、在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。
25、进一步，s2中破碎时保持温度在40℃以下。
26、进一步，s3中控制溶液的ph值在6-8之间。
27、进一步，s3中在搅拌时通过超声波均质机辅助岩藻多糖溶解。
28、进一步，s4中在3000-5000rpm条件下，分离10-20分钟。
29、进一步，s5中离心机转速为4000-10000rpm。
30、进一步，s6中岩藻多糖的洗涤为：
31、s61、将岩藻多糖样品溶解在水中，并加入适量的冰醋酸；
32、s62、在低温下静置一段时间(推荐在4℃下静置1-2小时)，使杂质分离出来；
33、s63、将液体分离离心，去除上清液，并重复洗涤静置和分离操作，直到液体完全清澈为止；
34、s64、最后，用纯水进行一次冲洗。
35、进一步，s10中多糖tc的分离方法为：
36、s101、制备电泳凝胶：选用适当分子量的聚丙烯酰胺凝胶或琼脂糖凝胶作为电泳凝胶，加入适量缓冲液，按照不同的分辨率需求进行聚合反应，待凝胶固化后，浸泡于缓冲液中存储备用。
37、s102、样品处理：将多糖样品用去离子水或其他适当溶液稀释，并加入一定量的样品缓冲液，以保证多糖在电泳过程中具有相同的电荷、形态和稳定性。
38、s103、加载样品：取少量多糖样品，并加入一定量电泳加载缓冲液，该缓冲液含有一定浓度的甘油，聚丙烯酰胺凝胶的孔道会吸收甘油，增加孔道大小，方便多糖进入凝胶内部进行电泳。
39、s104、进行电泳：将样品在预制的聚丙烯酰胺凝胶或琼脂糖凝胶中进行胶体电泳。通过提供适当的电压施加于凝胶两端，多糖溶液开始在凝胶内电泳移动。
40、s105、显色染色：在电泳结束后，可以通过一些显色、染色的方法，将不同分子量的多糖进行区分。
41、进一步，s11中高效液相色谱技术对岩藻多糖tc-1进行分离的方法为：
42、s111、样品前处理：首先需要将样品进行前处理，去除其中的杂质和离子，以保证分离的准确性和稳定性。可采用去离子水进行预处理，也可以使用甲醇、乙醇有机溶剂萃取，然后经过滤膜滤掉固体颗粒和杂质；
43、s112、色谱柱选择：对于不同大小、结构、功能的岩藻多糖，应根据其化学性质及分子量大小选择合适的色谱柱，可以选择反相色谱柱、离子交换柱、凝胶过滤柱或手性柱；
44、s113、色谱条件设置：根据样品的特点，设置不同的色谱条件，包括移动相组成、流速、温度和检测波长。在选择移动相组成时，可以选择水、有机溶剂和缓冲液，流速一般选择0.5～2ml/min，温度可以控制在20～35℃之间；
45、s114、校准曲线绘制：通过选取相应的平台多糖样品，制备出不同浓度的标准溶液，进行色谱柱分离和检测，然后根据吸光度值绘制标准曲线，建立分子量大小和相对含量的关系模型；
46、s115、样品分离：将经过前处理的多糖样品注入到色谱柱内，运用不同的色谱条件进行分离，得到不同相对含量的多糖组分。可以采用葡萄糖标准曲线法，根据不同的吸光度值判断发现的峰类别和含量。
47、上述说明仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的技术手段，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本发明的较佳实施例详细说明如后。本发明的具体实施方式由以下实施例详细给出。