技术特征：1.基于crispr/cas12a的可视化猪伪狂犬野毒株和ge-/tk-基因缺失疫苗株鉴别的crrna，其特征在于为：
2.基于crispr/cas12a的可视化猪伪狂犬野毒株和ge-/tk-基因缺失疫苗株鉴别的引物和探针，其特征在于：
3.建立prv gb、ge以及tk基因标准重组质粒所需的引物，其特征在于：
4.一种基于crispr/cas12a的可视化猪伪狂犬野毒株和ge-/tk-基因缺失疫苗株鉴别诊断方法，其特征在于包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的鉴别诊断方法，其特征在于：
6.根据权利要求4或5的鉴别诊断方法，其特征在于：
7.根据权利要求6的鉴别诊断方法，其特征在于：
8.根据权利要求4～7任一所述的鉴别诊断方法，其特征在于：
技术总结本发明属于生物与化学领域，涉及一种利用CRISPR/Cas12a体系可视化检测猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus，PRV)的方法。本发明公开了基于CRISPR/Cas12a的可视化猪伪狂犬野毒株和gE<supgt;‑</supgt;/TK<supgt;‑</supgt;基因缺失疫苗株鉴别的crRNA以及相应的引物和探针。本发明的鉴别诊断方法，包括以下步骤：步骤一、病毒基因组的提取；步骤二、利用恒温扩增引物，将被提取的病毒基因组通过恒温扩增技术进行扩增；步骤三、将扩增完成的产物用于Cas12a检测。本发明的方法操作简单，具有优越的灵敏度和特异性。
技术研发人员：李艳,李红招,王浩,乐敏
受保护的技术使用者：浙江大学
技术研发日：技术公布日：2024/1/15