一种野生型鸭坦布苏病毒S132全长cDNA感染性克隆质粒及其构建方法和应用

文档序号:35674975发布日期:2023-10-08 03:04阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种野生型鸭坦布苏病毒s132全长cdna感染性克隆质粒,其特征在于,所述野生型鸭坦布苏病毒s132全长cdna感染性克隆质粒的核苷酸序列如seq id no:1所示。

2.一种野生型鸭坦布苏病毒s132全长cdna感染性克隆质粒的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

3.一种基于权利要求1所述野生型鸭坦布苏病毒s132全长cdna感染性克隆质粒制备的重组病毒,其特征在于,所述重组病毒的核苷酸序列如seq id no:2所示。

4.权利要求1所述的野生型鸭坦布苏病毒s132全长cdna感染性克隆质粒在制备稳定表达嵌合报告基因的重组鸭坦布苏病毒中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述稳定表达嵌合报告基因的重组鸭坦布苏病毒的核苷酸序列如seq id no:4所示。

6.一种嵌合报告基因的重组鸭坦布苏病毒全长cdna感染性克隆质粒的制备方法,其特征在于,具体为:将核苷酸序列如seq id no:6所示的报告基因插入野生型鸭坦布苏病毒s132全长cdna的5’非编码区和编码c蛋白的基因之间;所述野生型鸭坦布苏病毒s132全长cdna的核苷酸序列如seq id no:5所示。

7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,具体为:

8.权利要求6~7任一所述制备方法制备得到的嵌合报告基因的重组鸭坦布苏病毒全长cdna感染性克隆质粒。

9.权利要求1所述的野生型鸭坦布苏病毒s132全长cdna感染性克隆质粒、权利要求3所述重组病毒和/或权利要求8所述嵌合报告基因的重组鸭坦布苏病毒全长cdna感染性克隆质粒在制备鸭坦布苏病毒疫苗中的应用。

10.权利要求1所述的野生型鸭坦布苏病毒s132全长cdna感染性克隆质粒、权利要求3所述重组病毒和/或权利要求8所述嵌合报告基因的重组鸭坦布苏病毒全长cdna感染性克隆质粒在筛选抗鸭坦布苏病毒药物中的应用。


技术总结
本发明公开了一种野生型鸭坦布苏病毒S132全长cDNA感染性克隆质粒,所述野生型鸭坦布苏病毒S132全长cDNA感染性克隆质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。所述野生型鸭坦布苏病毒S132全长cDNA感染性克隆质粒能够在原核细胞中稳定表达,无基因插入、缺失和突变,且能够直接用于转染以拯救活病毒,无需昂贵的试剂进行体外转录来获取病毒RNA,节约了成本和时间;并且本发明在S132全长cDNA的5’UTR和C蛋白基因之间插入报告基因,获得嵌合报告基因的重组鸭坦布苏病毒全长cDNA感染性克隆质粒,利用其制备的嵌合报告基因的重组鸭坦布苏病毒经过空斑纯化后能够至少稳定表达10代绿色荧光蛋白。

技术研发人员:焦培荣,丁仰保,黄展鸿,袁世超
受保护的技术使用者:华南农业大学
技术研发日:
技术公布日:2024/1/15
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