基于超声场辅助苏云金芽孢杆菌发酵生产伴孢晶体蛋白的方法与应用

文档序号:36402595发布日期:2023-12-16 07:39阅读:来源:国知局

技术特征:

1.基于超声场辅助苏云金芽孢杆菌发酵生产伴孢结晶蛋白的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的基于超声场辅助苏云金芽孢杆菌发酵生产伴孢结晶蛋白的方法,其特征在于,步骤(1)中,固体培养基为lb固体培养基;培养条件为:在30-37℃下培养24-30h。

3.根据权利要求1所述的基于超声场辅助苏云金芽孢杆菌发酵生产伴孢结晶蛋白的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述增殖阶段为对数生长阶段或稳定阶段。

4.根据权利要求1所述的基于超声场辅助苏云金芽孢杆菌发酵生产伴孢结晶蛋白的方法,其特征在于,步骤(2)中,培养条件为:温度为30-37℃,转速120-180rpm;步骤(2)至步骤(4)的培养时间合计为24-36h。

5.根据权利要求1所述的基于超声场辅助苏云金芽孢杆菌发酵生产伴孢结晶蛋白的方法,其特征在于,步骤(5)中,所述提取苏云金芽孢杆菌发酵液中的伴孢结晶蛋白,包括苏云金芽孢杆菌发酵液进行酶解一段时间,然后反复冻融若干次,得到孢晶混合液;孢晶混合液中沉淀即为伴孢结晶蛋白。

6.根据权利要求5所述的基于超声场辅助苏云金芽孢杆菌发酵生产伴孢结晶蛋白的方法,其特征在于,步骤(5)中,苏云金芽孢杆菌发酵液中加入溶菌酶溶液进行酶解,溶菌酶溶液的浓度为50-500μg/l,酶解时间为10-30min。

7.根据权利要求5所述的基于超声场辅助苏云金芽孢杆菌发酵生产伴孢结晶蛋白的方法,其特征在于,步骤(5)中,冻融过程为:冷冻20-40min,取出后立即放入30-50℃水浴中加热10-30min。

8.根据权利要求5所述的基于超声场辅助苏云金芽孢杆菌发酵生产伴孢结晶蛋白的方法,其特征在于,步骤(5)中,干燥条件为:在40-60℃条件下真空干燥4-10h或冷冻干燥6-12h。

9.一种由根据权利要求1-8任一所述的基于超声场辅助苏云金芽孢杆菌发酵生产伴孢结晶蛋白的方法制备所得的苏云金芽孢杆菌伴孢晶体蛋白。

10.一种根据权利要求9所述的苏云金芽孢杆菌伴孢晶体蛋白在在农业防虫害或食品抗菌上的应用。


技术总结
本发明公开了一种基于超声场辅助苏云金芽孢杆菌发酵生产伴孢晶体蛋白的方法与应用。其制备方法步骤如下:(1)培养苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt);(2)利用超声处理Bt生产伴孢晶体蛋白;(3):对步骤(2)得到的伴孢晶体蛋白进行结构及杀虫特性分析。最终,获得伴孢晶体蛋白。本发明制备方法具有操作过程简单、绿色无污染、反应条件温和、易操作等特点,并且伴孢晶体蛋白具备产量高、抗虫性好等优点。

技术研发人员:崔素芬,沈凯慧,刘文卓,葛葭葭,鲁玉杰,崔哲雨
受保护的技术使用者:江苏科技大学
技术研发日:
技术公布日:2024/1/15
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