一种用于假小链双歧杆菌的定量检测方法及其核酸检测试剂盒与流程

文档序号:36458757发布日期:2023-12-21 18:03阅读:来源:国知局

技术特征:

1.检测假小链双歧杆菌的特异性引物对,其特征在于,所述特异性引物对包括正向引物pse-08.4f和反向引物pse-08.4r,所述正向引物pse-08.4f的序列如seq id no.1所示,所述反向引物pse-08.4r的序列如seq id no.2所示。

2.权利要求1所述的引物对扩增得到的基因片段,其特征在于,其核苷酸序列如seq idno.3所示。

3.一种阳性标准质控品,其特征在于,其核苷酸序列如seq id no.4所示。

4.一种检测假小链双歧杆菌的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的引物对。

5.根据权利要求4所述的检测假小链双歧杆菌的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括权利要求2所述的基因片段或权利要求3所述的阳性标准质控品。

6.根据权利要求4所述的检测假小链双歧杆菌的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括荧光定量pcr所需其他试剂。

7.权利要求1所述的特异性引物对、权利要求2所述的基因片段、权利要求3所述的阳性标准质控品、权利要求4~6任一项所述的试剂盒在检测假小链双歧杆菌的应用。

8.一种检测假小链双歧杆菌的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:

9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述样本包括粪便、母乳、其他食品或污水环境来源的样品。

10.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,步骤1)中所述的qpcr实验的条件如下:


技术总结
本发明公开了检测假小链双歧杆菌的特异性引物对,本发明还公开了一种基因片段和一种阳性标准质控品以及含有所述的引物对的检测假小链双歧杆菌的试剂盒及其相关应用。本发明还公开了一种检测假小链双歧杆菌的方法。本发明通过泛基因组和核心基因组分析,建立了特定菌种的基因组特异性序列筛选方法,并应用于假小链双歧杆菌特异性引物对的设计,且该引物具备良好的特异性及灵敏度,可用于复杂微生态群落样本的检测,灵敏度达到100拷贝/检测孔。实现了假小链双歧杆菌在种水平的绝对定量检测,将该检测方法应用于微生态样品的检测,并具备良好的特异性和灵敏度。

技术研发人员:李仁祥,胡万金,薛正晟,庾庆华,陈东波,沈阳
受保护的技术使用者:迪辅乐生物(上海)有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/1/15
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