AZGP1在作为评估多发性骨髓瘤患者预后风险标记物中的应用

本发明属于医学检测，具体涉及azgp1在作为评估多发性骨髓瘤患者预后风险标记物中的应用。

背景技术：

1、多发性骨髓瘤(multiple myeloma，mm)是血液系统常见的恶性肿瘤，以克隆性浆细胞异常增殖并分泌大量非功能性免疫球蛋白或其片段为特征，常见的症状包括高钙血症、肾功能损害、贫血、骨病以及继发淀粉样变性等。随着新药不断问世及检测手段的提高，mm的诊断和治疗得以不断改进和完善，但几乎所有患者复发和死亡的结局仍不可避免，目前仍无法治愈。重现性细胞遗传学及分子异常是mm发生发展的重要因素，此外，微小残留病灶的存在是其复发的主要原因。目前仍缺乏可简便、灵敏检测且特异性的诊断、复发预警和预后评估的分子靶标。

2、azgp1(alpha-2-glycoprotein 1)定位于人染色体7q22.1上，其编码的锌-α2-糖蛋白分泌在各种体液中，主要在乳腺、前列腺、肝脏和各种胃肠器官的上皮细胞中表达，积极参与许多人体的重要功能，包括受精、免疫调节和脂质动员等。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供与多发性骨髓瘤诊断与预后相关的azgp1生物标记物及其应用。

2、为了实现上述目的，本发明首先提供了检测azgp1表达量的物质的新用途。

3、本发明提供了检测azgp1表达量的物质在如下(a1)-(a6)中任一种中的应用：

4、(a1)制备用于诊断或辅助诊断多发性骨髓瘤的产品；

5、(a2)制备用于筛查或辅助筛查多发性骨髓瘤患者的产品；

6、(a3)制备用于评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者预后风险的产品；

7、(a4)制备用于评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者无进展生存率的产品；

8、(a5)制备用于评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者无进展生存时间的产品；

9、(a6)制备用于评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者病程进展的产品。

10、本发明又提供了检测azgp1表达量的物质在如下(b1)-(b6)中任一种中的应用：

11、(b1)诊断或辅助诊断多发性骨髓瘤；

12、(b2)筛查或辅助筛查多发性骨髓瘤患者；

13、(b3)评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者预后风险；

14、(b4)评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者无进展生存率；

15、(b5)评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者无进展生存时间；

16、(b6)评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者病程进展。

17、为了实现上述目的，本发明还提供了一种试剂盒，所述试剂盒的功能为如下(c1)-(c6)中任一种：

18、(c1)诊断或辅助诊断多发性骨髓瘤；

19、(c2)筛查或辅助筛查多发性骨髓瘤患者；

20、(c3)评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者预后风险；

21、(c4)评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者无进展生存率；

22、(c5)评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者无进展生存时间；

23、(c6)评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者病程进展。

24、本发明提供的试剂盒包括检测azgp1表达量的物质。

25、上述任一所述应用或试剂盒中，所述检测azgp1表达量的物质可为检测azgp1基因表达量的物质或检测azgp1基因编码的mrna表达量的物质或检测azgp1基因编码的蛋白含量的物质。

26、进一步的，所述检测azgp1基因表达量的物质可为利用现有技术中的方法检测所述azgp1基因表达量所需的试剂和/或仪器，如利用高通量测序检测所述基因表达量所需的试剂和/或仪器，或利用定量pcr检测所述基因表达量所需的试剂和/或仪器，或利用northern杂交技术检测所述基因表达量所需的试剂和/或仪器。

27、所述检测azgp1基因编码的蛋白含量的物质可为利用现有技术中的方法检测所述蛋白含量所需的试剂和/或仪器，如利用质谱或其相关技术检测所述蛋白含量所需的试剂和/或仪器，或利用免疫杂交技术检测所述蛋白含量所需的试剂和/或仪器，或利用elisa技术检测所述蛋白含量所需的试剂和/或仪器，或利用蛋白芯片或试纸检测所述蛋白含量所需的试剂和/或仪器。

28、所述检测azgp1基因编码的mrna表达量的物质可包括用于检测azgp1基因mrna的特异性扩增引物和/或探针。在本发明的一个具体实施例中，用于检测azgp1基因mrna的特异性扩增引物由seq id no.1所示的单链dna分子和seq id no.2所示的单链dna分子组成。用于检测azgp1基因mrna的探针为seq id no.3所示的单链dna分子，所述探针的5’端可标记有荧光报告基团(如fam)，所述单链探针的3’端可标记有荧光猝灭基团(如bhq)。

29、再进一步的，所述表达量为azgp1基因参比内参基因的相对表达量，具体可为azgp1基因的表达量与内参基因的表达量之比。所述azgp1基因的表达量和所述内参基因的表达量均可为根据标准曲线和ct值得到的拷贝数。

30、更进一步的，所述检测azgp1基因编码的mrna表达量的物质还可包括用于检测内参基因mrna的特异性扩增引物和/或探针。所述内参基因具体可为abl1基因。在本发明的一个具体实施例中，用于检测abl1基因mrna的特异性扩增引物由seq id no.4所示的单链dna分子和seq id no.5所示的单链dna分子组成；用于检测abl1基因mrna的探针为seq idno.6所示的单链dna分子，所述探针的5’端可标记有荧光报告基团(如fam)，所述单链探针的3’端可标记有荧光猝灭基团(如bhq)。

31、上述试剂盒还可包含数据处理装置a；所述数据处理装置a内设模块；所述模块具有如下功能：根据待测者骨髓单个核细胞中azgp1的相对表达量诊断待测者是否为多发性骨髓瘤患者：如果待测者骨髓单个核细胞中azgp1的相对表达量大于健康对照者，则该待测者为或疑似为多发性骨髓瘤患者；否则该待测者不为或疑似不为多发性骨髓瘤患者。

32、上述试剂盒还可包含数据处理装置b；所述数据处理装置b内设模块；所述模块具有如下功能：根据多发性骨髓瘤患者骨髓单个核细胞中azgp1的相对表达量评估多发性骨髓瘤患者的预后风险：azgp1低表达组的多发性骨髓瘤患者的预后风险低于或候选低于azgp1高表达组的多发性骨髓瘤患者。

33、上述试剂盒还可包含数据处理装置c；所述数据处理装置c内设模块；所述模块具有如下功能：根据多发性骨髓瘤患者骨髓单个核细胞中azgp1的相对表达量评估多发性骨髓瘤患者的无进展生存率：azgp1低表达组的多发性骨髓瘤患者的无进展生存率高于或候选高于azgp1高表达组的多发性骨髓瘤患者。

34、上述试剂盒还可包含数据处理装置d；所述数据处理装置d内设模块；所述模块具有如下功能：根据多发性骨髓瘤患者骨髓单个核细胞中azgp1的相对表达量评估多发性骨髓瘤患者的无进展生存时间：azgp1低表达组的多发性骨髓瘤患者的无进展生存时间长于或候选长于azgp1高表达组的多发性骨髓瘤患者。

35、上述试剂盒还可包含数据处理装置d；所述数据处理装置d内设模块；所述模块具有如下功能：根据多发性骨髓瘤患者骨髓单个核细胞中azgp1的相对表达量评估多发性骨髓瘤患者的病程进展：azgp1低表达组的多发性骨髓瘤患者的复发风险低于或候选低于azgp1高表达组的多发性骨髓瘤患者。

36、上述azgp1高表达组和azgp1低表达组可按照如下方法判定：以由若干名未采取任何治疗措施的多发性骨髓瘤患者组成的待测群体的离体骨髓为标本，测定每份标本中azgp1的相对表达量，然后按照所述相对表达量由低到高的顺序将所述待测群体进行排列并进行三等分，将表达量低的1/3所述待测群体作为azgp1低表达组，将其余2/3所述待测群体作为azgp1高表达组。

37、azgp1作为生物标志物在如下(a1)-(a6)中任一种中的应用也属于本发明的保护范围：

38、(a1)制备用于诊断或辅助诊断多发性骨髓瘤的产品；

39、(a2)制备用于筛查或辅助筛查多发性骨髓瘤患者的产品；

40、(a3)制备用于评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者预后风险的产品；

41、(a4)制备用于评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者无进展生存率的产品；

42、(a5)制备用于评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者无进展生存时间的产品；

43、(a6)制备用于评估或辅助评估多发性骨髓瘤患者病程进展的产品。

44、上述任一所述应用或产品中，所述azgp1基因的核苷酸序列如seq id no.9所示(ncbi reference sequence：nm_001185.4)。

45、在本发明中，所述预后风险为初诊为多发性骨髓瘤患者预后风险。所述预后风险的高低具体可体现为如下指标中的全部或部分：无进展生存时间、无进展生存率。无进展生存时间越长，则预后风险越低；无进展生存率越高，则预后风险越低。

46、所述病程进展(复发风险)是指多发性骨髓瘤患者缓解后的复发风险。

47、上述任一所述应用或产品中，所述筛查或辅助筛查多发性骨髓瘤患者包括筛查或辅助筛查初诊多发性骨髓瘤患者和筛查或辅助筛查复发多发性骨髓瘤患者。

48、上述任一所述应用或产品中，所述多发性骨髓瘤为成人多发性骨髓瘤。

49、本发明通过rt-qpcr方法对初诊和缓解mm患者骨髓单个核细胞中的azgp1表达水平进行了分析，结合临床病程及生存资料，首次发现azgp1高表达是mm患者低无进展生存(pfs)的危险因素。azgp1在多发性骨髓瘤的诊断与预后中具有重要价值。