一种FGFR2抑制剂Lirafugratinib(RLY-4008)的制备方法与流程

本发明属于药物化学合成领域，涉及一种fgfr2抑制剂lirafugratinib(rly-4008)的新的制备方法。

背景技术：

1、胆管癌(cca)作为一种罕见的恶性肿瘤，预后较差。恶性程度和公认的癌王胰腺癌不相上下。这类癌症及时接受手术治疗，3年复发率也达到85％，患者5年生存率仅有约5％；而无法手术切除的患者5年生存率一度低至0。fgfr2是一种受体酪氨酸激酶，fgfr家族的四个成员之一，是一组密切相关的蛋白质，具有高度相似的蛋白质序列和特性，在许多癌症中经常发生突变，包括肝内胆管癌(10％-16％)、子宫内膜癌(7.5％-11％)、胃或胃食管交界处腺癌(3.7％-7.9％)等。fgfr2的致癌激活可以通过基因扩增、激活突变或染色体重排,胆管癌的fgfr2融合/重排发生率为10-15％的。之前的非选择性fgfr抑制剂通过实现20-40％的客观缓解率(orr)和5-9个月的缓解持续时间(dor)验证了fgfr作为cca的治疗靶点。但是泛fgfr抑制剂(infigratinib，pemigatinib，futibatinib)的二线治疗患者常常出现高磷血症和腹泻等不良反应，同时还会发生fgfr2耐药突变，需要多方面调整剂量，难已达到药物最佳剂量，对于fgfr2的选择性抑制有望提供优越的目标覆盖率，从而大幅提高药物疗效。

2、尽管在基于结构的药物设计方面进行了大量研究，但fgfr2的选择性靶向仍然存在未知的类似于fgfr1、fgfr3和fgfr4的激酶结构域，rly-4008是第一个高选择性、强效的fgfr2抑制剂，基于独特的构象动力学选择性地针对驱动程序改变和fgfr抗性突变，具有更强的敏感性和体内活性。rly-4008的i/ii期临床试验结果显示治疗胆管癌的有效率达到了88％，且没有显示出高磷血症(fgfr1)和腹泻(fgfr4)的非目标毒性的限制。这些初步数据表明，rly-4008具有可控的安全性，并能推动多种fgfr2突变和肿瘤类型的肿瘤消退。

技术实现思路

1、鉴于上述情况，fgfr2抑制剂lirafugratinib(rly-4008)的制备非常重要。本发明人通过实验研究解决了该化合物的技术问题，其反应路线如下：

2、

3、具体实验方式

4、下面通过实施例对本发明作进一步描述说明，但并不因此而限制本发明的内容。

5、实例1:

6、

7、步骤a

8、将化合物3-脒基丙酸乙酯盐酸盐(8.3g,50.0mmol)和naoet(5.1g,75.0mmol)溶于无水乙醇中，并在氩气条件下搅拌20min,将混合物加热至60℃，并在5分钟内分批加入2-溴代对硝基苯乙酮(6.1g,25.0mmol),反应1.5h后，混合物冷却至20℃，减压蒸发溶剂。残留物用蒸馏水(20ml)稀释，并用乙酸乙酯(3×80ml)萃取。有机层用水(3×20ml)和盐水(3×20ml)洗涤。合并的水溶液再用etoac(2×20ml)萃取。有机相mgso4干燥，减压蒸干。残余物通过硅胶柱层析纯化得到2-氨基-5-(4-硝基苯基)-1h-吡咯-3-羧酸乙酯(4.14g，产率60％)。lc-ms(esi)：m/z＝275.3[m+h]+.

9、步骤b

10、在无水dmf(28ml)溶液中加入甲酸(11.3ml)、2-氨基-5-(4-硝基苯基)-1h-吡咯-3-羧酸乙酯(4.60g，16.57mmol)和过量甲酰胺(75ml)，升温至120℃反应20小时。然后加入2-丙醇(12ml)，混合物冷却至20℃。过滤，用2-丙醇(10ml)和正己烷(2×15ml)洗涤，减压干燥，得到化合物4-羟基-6-(4-硝基-苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(2.52g，产率60％)。lc-ms(esi)：m/z＝256.2[m+h]+

11、步骤c

12、将4-羟基-6-(4-硝基-苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(1.9g，7.43mmol)和pocl3(13.3ml)混合，在90℃下反应3小时。用冰盐浴冷却,然后加入水(60ml)。用naoh(8m，80ml)将ph值调至12。过滤，用水和正戊烷洗涤，干燥后得到化合物4-氯-6-(4-硝基苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(1.93g，产率92％)。lc-ms(esi)：m/z＝274.7[m+h]+

13、步骤d

14、将4-氯-6-(4-硝基苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(179mg，0.653mmol)和碳酸铯(319mg，0.980mmol)溶于无水dmf(2ml)中，在30min内加入碘甲烷(0.65ml，1.31mmol，2m在叔丁基甲基醚中)，溶液在室温下搅拌反应90min。用h2o(50ml)淬灭反应，并用etoac(2×30ml)萃取。合并的有机相用饱和nahco3(15ml)和饱和nacl(20ml)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶柱层析纯化,得到化合物4-氯-7-甲基-6-(4-硝基苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(169mg，产率90％)。lc-ms(esi)：m/z＝288.7[m+h]+步骤e

15、将化合物4-氯-7-甲基-6-(4-硝基苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(531g，1.84mol)悬浮于在氨水(30％h2o中，3.63l)中，在压力容器中搅拌下120℃反应18h，冷却到20℃，过滤，用h2o(1.80l)和甲醇(900ml)洗涤，干燥，得到化合物4-氨基-7-甲基-6-(4-硝基苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(371g，产率75％)。lc-ms(esi)：m/z＝269.3[m+h]+

16、步骤f

17、将化合物4-氨基-7-甲基-6-(4-硝基苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(18.9g,70mmol)，n-碘代丁二酰亚胺溶于400mldmf中，在室温黑暗环境中反应过夜，蒸干溶剂。将残留物悬浮于10％na2so3热溶液中，过滤，用热水洗涤两次，然后从乙醇中结晶得到化合物4-氨基-5-碘-7-甲基-6-(4-硝基苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(27.7g，产率100％)。lc-ms(esi)：m/z＝395.2[m+h]+

18、步骤g

19、在一个可密封的反应瓶中装入4-氨基-5-碘-7-甲基-6-(4-硝基苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(122mg，0.31mmol)、2-(2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧代硼烷-2-基)苯氧基)-5-甲基嘧啶(122mg,0.373mmol)，加入pd(dtbpf)cl2(20.1mg，0.031mmol)、csf(240mg，0.930mmol)、dmf(4ml)、h2o(0.5ml)和搅拌棒，抽换n2三次，混合物在90℃下搅拌反应2h。反应混合物在真空中浓缩。所得粗物质通过tlc纯化，真空浓缩后，得到化合物5-(2-氟-4-((4-甲基嘧啶-2-基)氧基)苯基)-7-甲基-6-(4-硝基苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(8.8mg，产率6％)。lc-ms(esi)：m/z＝471.5[m+h]+

20、步骤h

21、在氩气条件下将5-(2-氟-4-((4-甲基嘧啶-2-基)氧基)苯基)-7-甲基-6-(4-硝基苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(0.2g，0.45mmol)和三乙基硅烷(0.45mmol)溶于乙醇(5ml)中，加入催化量的氯化钯(ii)(10mol％)，将所得的混合物搅拌反应2h,蒸发溶剂，然后加水倾析,水相用二乙醚萃取,有机相经无水硫酸钠干燥，减压蒸干。残余物通过硅胶柱层析纯化得到5-(2-氟-4-((4-甲基嘧啶-2-基)氧基)苯基)-7-甲基-6-(4-胺基苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(0.14g，产率70％)。lc-ms(esi)：m/z＝441.5[m+h]+

22、步骤i

23、将5-(2-氟-4-((4-甲基嘧啶-2-基)氧基)苯基)-7-甲基-6-(4-胺基苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(4.4g，10mmol)和甲基丙烯酰氯(1.06ml，11mmol)溶于thf(100ml)中在0℃氩气环境下搅拌,并用碳酸钾(1.38g 10mmol)处理。反应混合物搅拌2h，然后加入2m hcl并用乙酸乙酯萃取。水层进一步用乙酸乙酯(2×50ml)萃取，合并的有机相在无水硫酸钠干燥,通过旋转蒸发去除溶剂,粗产物经柱层析纯化得到化合物rly-4008(4.1g，产率80％)；lc-ms(esi)：m/z＝509.5[m+h]+.1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ1.95(s,3h),2.42(s,3h),3.59(s,3h),5.54(s,1h),5.80(s,1h),5.99(s,2h),7.09(d,1h),7.18(d,2h),7.26-7.50(m,3h),7.75(d,2h),8.21(s,1h),8.47(d,1h),9.94(s,1h).

24、实施例2

25、

26、用与实施例1步骤a、b类似的方法得到化合物4-羟基-6-(4-硝基-苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶

27、步骤c

28、将化合物4-羟基-6-(4-硝基-苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(17.9g,70mmol)，n-碘代丁二酰亚胺溶于400ml dmf中，在室温黑暗环境中反应过夜，蒸干溶剂。将残留物悬浮于10％na2so3热溶液中，过滤，用热水洗涤两次，然后从乙醇中结晶得到化合物4-羟基-5-碘-6-(4-硝基-苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(28g，产率100％)。lc-ms(esi)：m/z＝400.6[m+h]+

29、步骤d

30、将化合物4-羟基-5-碘-6-(4-硝基-苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(0.78g，2.03mmol)和三氯氧磷(10ml)的混合物回流反应3h,浓缩悬浮液，除去氧氯化磷,残留物用乙酸乙酯稀释，有机层用饱和nahco3水溶液洗涤无水硫酸钠干燥，减压蒸干,得到化合物4-氯-5-碘-6-(4-硝基-苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(0.16g，产率20％)。lc-ms(esi)：m/z＝400.6[m+h]+

31、步骤e

32、将化合物4-氯-5-碘-6-(4-硝基-苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(260mg，0.65mmol)和碳酸铯(319mg，0.980mmol)溶于无水dmf(2ml)中，在30min内加入碘甲烷(0.65ml，1.31mmol，2m在叔丁基甲基醚中)，溶液在室温下搅拌反应90min。用h2o(50ml)淬灭反应，并用etoac(2×30ml)萃取。合并的有机相用饱和nahco3(15ml)和饱和nacl(20ml)洗涤，用无水na2so4干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶柱层析纯化,得到化合物4-氯-5-碘-7-甲基-6-(4-硝基-苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(215mg，产率80％)。lc-ms(esi)：m/z＝414.6[m+h]+

33、步骤f

34、将化合物4-氯-5-碘-7-甲基-6-(4-硝基-苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(762g，1.84mol)悬浮于在氨水(30％h20中，3.63l)中，在压力容器中120℃搅拌下反应18h，冷却到20℃，过滤，用h20(1.80l)和甲醇(900ml)洗涤，干燥，得到化合物4-氨基-5-碘-7-甲基-6-(4-硝基-苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(545g，产率75％)。lc-ms(esi)：m/z＝395.2[m+h]+

35、接下来的三步用与实施例1中同样的方法制备得到目标化合物rly-4008。

36、实施例3

37、

38、用与实施例1步骤a、b类似的方法得到化合物4-氯-6-(4-硝基苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶

39、步骤c

40、将化合物4-羟基-6-(4-硝基-苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(0.52g，2.03毫摩尔)和三氯氧磷(10ml)的混合物回流反应3小时,浓缩悬浮液，除去氧氯化磷,残留物用乙酸乙酯稀释，有机层用饱和nahco3水溶液洗涤无水硫酸钠干燥，减压蒸干,得到化合物4-氯-6-(4-硝基-苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(0.11g，产率20％)。lc-ms(esi)：m/z＝274.7[m+h]+

41、步骤d

42、将化合物4-氯-6-(4-硝基-苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(19.2g,70mmol)，n-碘代丁二酰亚胺溶于400ml dmf中，在室温黑暗环境中反应过夜，蒸干溶剂。将残留物悬浮于10％na2so3热溶液中，过滤，用热水洗涤两次，然后从乙醇中结晶得到化合物4-氯-5-碘-6-(4-硝基-苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(27.5g，产率98％)。lc-ms(esi)：m/z＝400.6[m+h]+

43、步骤e

44、将化合物4-氯-5-碘-6-(4-硝基-苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(260mg，0.65mmol)和碳酸铯(319mg，0.980mmol)溶于无水dmf(2ml)中，在30分钟内加入碘甲烷(0.65ml，1.31mmol，2m在叔丁基甲基醚中)，溶液在室温下搅拌反应90分钟。用h2o(50ml)淬灭反应，并用etoac(2×30ml)萃取。合并的有机相用饱和nahco3(15ml)和饱和nacl(20ml)洗涤，用无水na2so4干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶柱层析纯化,得到化合物4-氯-5-碘-7-甲基-6-(4-硝基-苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(238mg，产率88％)。lc-ms(esi)：m/z＝414.6[m+h]+

45、步骤f

46、将化合物4-氯-5-碘-7-甲基-6-(4-硝基-苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(762g，1.84mol)悬浮于在氨水(30％，h2o中，3.63l)中，在压力容器中搅拌下120℃反应18h，冷却到20℃，过滤，用h20(1.80l)和甲醇(900ml)洗涤，干燥，得到化合物4-氨基-5-碘-7-甲基-6-(4-硝基-苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(545g，产率75％)。lc-ms(esi)：m/z＝395.2[m+h]+

47、接下来的三步用与实施例1中同样的方法制备得到目标化合物rly-4008。

48、实施例4

49、

50、用与实施例1步骤a、b、c、d类似的方法得到化合物4-氯-7-甲基-6-(4-硝基苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶

51、步骤e

52、将化合物4-氯-7-甲基-6-(4-硝基苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(20.21g，70mmol)，n-碘代丁二酰亚胺溶于400mldmf中，在室温黑暗环境中反应过夜，蒸干溶剂。将残留物悬浮于10％na2so3热溶液中，过滤，用热水洗涤两次，然后从乙醇中结晶得到化合物4-氯-5-碘-7-甲基-6-(4-硝基苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(27.65g，产率75％)。lc-ms(esi)：m/z＝414.6[m+h]+

53、步骤f

54、将化合物4-氯-5-碘-7-甲基-6-(4-硝基苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(763g，1.84mol)悬浮于在氨水(30％，h20，3.63l)中，在压力容器中搅拌下120℃反应18h，冷却到20℃，过滤，用h20(1.80l)和甲醇(900ml)洗涤，干燥，得到化合物4-氨基-5-碘-7-甲基-6-(4-硝基-苯基)-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶(545g，产率75％)。lc-ms(esi)：m/z＝395.2[m+h]+。

55、接下来的三步用与实施例1中同样的方法制备得到目标化合物rly-4008。

56、上述实例仅用于说明本发明的实施方式，但本发明不仅仅局限于上述实例。在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内，本发明要求保护范围由权利要求书及其等效物界定。