1.一种多靶点溶瘤腺病毒的构建方法,其特征在于,包括:
2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述的步骤(1)中,所述的htert启动子为seq id no.2;所述的cr2区片段为seq id no.3;所述的p53基因区序列为seq idno.5。
3.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,所述的步骤(1)中e1a基因区为seq idno.6。
4.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于,所述所述的步骤(1)中穿梭载体为pdc316。
5.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述的步骤(2)中ad35型腺病毒上的knob和shaft序列为seq id no.7。
6.根据权利要求5所述的构建方法,其特征在于,所述的步骤(2)中hgm-csf基因为seqid no.8。
7.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,步骤(2)中对e1和e3区缺失的腺病毒的骨架载体进行改造的步骤包括:
8.根据权利要求7所述的构建方法,其特征在于,所述的步骤1)中:抗性筛选标记包括抗性基因和启动子;所述的cre酶识别位点为loxp位点。
9.根据权利要求7所述的构建方法,其特征在于,所述的步骤3)中:hgm-csf基因与ad5骨架序列共同插入,插入酶切位点为paci。
10.根据权利要求8所述的构建方法,其特征在于,所述的步骤1)中:loxp序列为seq idno.9所示。
11.权利要求1-10任一项所述的构建方法构建的多靶点溶瘤腺病毒。
12.权利要求11所述的多靶点溶瘤腺病毒在制备抗肿瘤药物中的应用。
13.根据权利要求12所述的应用,其特征在于,所述的肿瘤为实体瘤,包括乳腺癌、肝癌、胆囊癌、胃癌、结肠癌、肺癌、前列腺癌、淋巴瘤、大肠癌、卵巢癌、宫颈癌、胆管癌、食管癌、肾癌、神经胶质瘤、黑色素瘤、胰腺癌、膀胱癌或头颈癌。
14.含权利要求11所述的多靶点溶瘤腺病毒的抗肿瘤药物。