一种多靶点溶瘤腺病毒的构建方法及应用与流程

文档序号:36830711发布日期:2024-01-26 16:45阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种多靶点溶瘤腺病毒的构建方法,其特征在于,包括:

2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述的步骤(1)中,所述的htert启动子为seq id no.2;所述的cr2区片段为seq id no.3;所述的p53基因区序列为seq idno.5。

3.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,所述的步骤(1)中e1a基因区为seq idno.6。

4.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于,所述所述的步骤(1)中穿梭载体为pdc316。

5.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述的步骤(2)中ad35型腺病毒上的knob和shaft序列为seq id no.7。

6.根据权利要求5所述的构建方法,其特征在于,所述的步骤(2)中hgm-csf基因为seqid no.8。

7.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,步骤(2)中对e1和e3区缺失的腺病毒的骨架载体进行改造的步骤包括:

8.根据权利要求7所述的构建方法,其特征在于,所述的步骤1)中:抗性筛选标记包括抗性基因和启动子;所述的cre酶识别位点为loxp位点。

9.根据权利要求7所述的构建方法,其特征在于,所述的步骤3)中:hgm-csf基因与ad5骨架序列共同插入,插入酶切位点为paci。

10.根据权利要求8所述的构建方法,其特征在于,所述的步骤1)中:loxp序列为seq idno.9所示。

11.权利要求1-10任一项所述的构建方法构建的多靶点溶瘤腺病毒。

12.权利要求11所述的多靶点溶瘤腺病毒在制备抗肿瘤药物中的应用。

13.根据权利要求12所述的应用,其特征在于,所述的肿瘤为实体瘤,包括乳腺癌、肝癌、胆囊癌、胃癌、结肠癌、肺癌、前列腺癌、淋巴瘤、大肠癌、卵巢癌、宫颈癌、胆管癌、食管癌、肾癌、神经胶质瘤、黑色素瘤、胰腺癌、膀胱癌或头颈癌。

14.含权利要求11所述的多靶点溶瘤腺病毒的抗肿瘤药物。


技术总结
本发明提供一种多靶点溶瘤腺病毒的构建方法及应用,属于基因工程药物领域。本发明通过在穿梭载体插入hTERT启动子、E1A基因区、55kD E1B相关片段和p53基因构建得到改造穿梭载体,对E1和E3区缺失的腺病毒的骨架载体进行改造得到改造腺病毒载体,并将改造穿梭载体和改造腺病毒载体共转染细胞后表达获得多靶点溶瘤腺病毒。本发明的多靶点溶瘤病毒对肿瘤细胞杀伤力强,且对正常细胞安全性高,能够在肿瘤模型小鼠体内有效的抑制肿瘤的生长,有很好的临床应用前景。

技术研发人员:王健,刘奇,程彤,陈剑花,田烁,黄文林
受保护的技术使用者:广州达博生物制品有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/1/25
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