二苯乙烯类And-1蛋白降解剂、其制备方法及应用

本发明涉及一种新的具有抗肿瘤作用的小分子化合物，所述化合物的制备方法，以及化合物在制备抗肿瘤或者肿瘤放化疗增敏药物中的应用。

背景技术：

1、下面关于与本发明相关的背景介绍用于帮助对本发明的理解，但不应被认为是本发明的已有技术。所有引用的出版物都被全文参考。

2、与正常细胞相比，肿瘤细胞具有多种异常的生物学特性，包括持续增殖信号、诱导血管生成、代谢重编程、免疫逃逸、炎症和基因组不稳定。研究表明，过度活跃的dna损伤修复系统会促进肿瘤细胞的侵袭和转移(cancer discov.2017；7(7)：675-693)。因此，抑制dna修复系统一直是抗肿瘤药物研究的热点之一。随着parp抑制剂类药物的临床潜力得到验证，靶向肿瘤dna损伤修复系统的新药开发有望在扩大抗肿瘤适应症、克服放疗抵抗、顺铂耐药等领域取得突破(nat rev genet.2017；18(10)：613-623)。

3、酸性核质dna结合蛋白1(acidic nucleoplasmic dna-binding protein 1，and-1)包含wd40重复序列(wd-repeat)和高迁移率组蛋白框结构域(hmg-box)，同时具备wd40和hmg两大蛋白家族特性，研究表明and-1的wd40重复结构域对防止dna单链和双链损伤的积累以及细胞周期阻滞是必不可少的(nat commnn.2018；9(1)：3091)。此外，chen y等人研究发现当dna损伤时，and-1与ctip相互作用，募集ctip到dna损伤位点，促进dna末端切除和dna损伤修复(nucleic acids res.2017；45(5)：2516-2530)。临床研究表明，and-1免疫染色阳性与非小细胞肺癌和食管癌患者预后差有关(clin cancer res.2010；16：226-39.)。多变量分析表明它是食管癌的独立预后因素。用小干扰rna抑制and-1表达可有效抑制肺癌和食管癌细胞的生长(clin cancer res.2010；16：226-39.)。依赖于microrna-494的and-1抑制减少了胆管癌细胞的上皮-间充质转化，肿瘤生长和转移(digestive and liverdisease.2019；51：397-411.)。因此，and-1可以做为潜在的抗肿瘤药物靶标。开发小分子的and-1蛋白降解剂具有重要意义。

4、在前期研究中，我们基于and-1荧光素酶报告基因高通量筛选平台，筛选得到了醋酸巴多昔芬和ch3两种高效、特异的and-1抑制剂。具体来说，通过与and-1 wd40结构域的相互作用，巴多昔芬和ch3阻断了and-1的聚合，促进了其与e3连接酶cullin4b(cul4b)的相互作用，最终导致其泛素化而降解。因此，该类抑制剂的特点在于其同时是and-1蛋白的降解剂。

技术实现思路

1、本发明旨在针对现有技术的缺陷，提供一种新的具有抗肿瘤作用的二苯乙烯类化合物的制备方法和应用，以解决现有技术中缺乏一种类似化合物的技术问题；

2、本发明要解决的另一技术问题是尚没有通过降解and-1蛋白而发挥抗肿瘤作用的临床候选药物；

3、本发明要解决的又一技术问题是提供所述化合物在抗肿瘤药物、肿瘤放化疗增敏药物中的应用。为实现以上技术目的，本发明采用以下技术方案：

4、一种由式i所示的化合物：

5、

6、其中：

7、n＝0或1

8、r选自哌嗪、苯基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡唑基、咪唑基、三唑基、嘧啶基、吲哚基、哒嗪、苯并吡嗪基、苯并咪唑基、苯并咪唑酮基、吡咯并吡啶基、吡咯并嘧啶基、吡唑并吡啶基、吡唑并嘧啶基、吲唑基、吲哚啉酮基、萘啶基、喹啉基、喹啉酮基、二氢喹啉酮基、氧代-二氢喹啉酮基、异喹啉基、异喹啉酮基，其中每个r为各自任选地经1至3个取代基取代，这些取代基独立地选自氢、三氟甲基、卤素、c1-c3烷基、c1-c3烷氧基、4-7元杂环基、羟基、氨基、乙酰胺基、羧基、杂芳基、酯基。

9、作为优选，所述的化合物或其在药学上可用的盐，选自：

10、

11、

12、本发明提供了一种药物组合物，包含上述化合物或其药学上可用的盐，以及药学上可接受的载体，包括稀释剂。

13、同时，本发明提供了上述化合物或其药学上可用的盐、上述药物组合物在制备and-1降解剂相关药物的应用。

14、作为优选，上述化合物或其药学上可用的盐、上述药物组合物是针对抗肿瘤或者肿瘤放化疗增敏的药物。

15、同时，本发明提供了上述化合物的制备方法，包括以下步骤：

16、1)化合物a与浓盐酸以及多聚甲醛反应得到化合物b；

17、2)由化合物b在非质子性溶剂中与三苯基磷反应得到化合物c；

18、3)由化合物c与3，4-二氯苯甲醛在强碱的条件下得到化合物d；

19、4)由化合物d与rnh2反应制备亚胺中间体，经还原得到化合物i-1-1-27；

20、其中，化合物结构如下：

21、

22、其中，rnh2中的r，其定义如前所述。

23、作为优选，步骤2)所述反应的非质子性溶剂包括丙酮、乙腈、n，n-二甲基甲酰胺、n，n-二甲基乙酰胺、四氢呋喃、1，4-二氧六环、乙酸乙酯、甲基叔丁基醚、二甲基亚砜的任一种或几种的组合。

24、作为优选，步骤3)所述反应是在强碱条件下进行，包括甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、异丙醇钠、丁基锂、氢氧化钠、氢氧化锂、氢氧化钾的任一种或几种的组合。

25、作为优选，步骤4)所述反应的还原剂包括硼氢化钠、氰基硼氢化钠、三乙酰氧基硼氧化钠、四氢铝锂的任一种或几种的组合。

26、以上技术方案的相关技术术语，除非特殊解释，否则将遵循下面的定义。

27、术语“烷基”指具有指定碳原子数的直链或支链烃基，因此例如，在此使用的术语“c1-c4烷基”和“c1-c10烷基”是指分别具有至少1个且至多4个或10个碳原子的烷基。本发明中所使用的此类支链或直链烷基的实例包括，但不限于，甲基、乙基、正丙基、异丙基、异丁基、正丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基，和正癸基。和后面五个正烷烃的的支链类似物。

28、当使用术语“杂环烷基”时，其是指含有指定数目环原子的非芳香杂环，其为饱和的或具有一个或多个不饱和度，且含有一个或多个选自o、s或n的杂原子。此类环可任选稠合至一个或多个其它“杂环”或环烷基上。“杂环”基团的实例包括，单环非芳族杂环基，诸如氮杂环丁烷基(例如，1-氮杂环丁烷基、2-氮杂环丁烷基、3-氮杂环丁烷基)、吡咯烷基(例如，1-吡咯烷基、2-吡咯烷基)、哌啶基(例如，哌啶子基、2-哌啶基、3-哌啶基，4-哌啶基)、吗啉基(例如，吗啉代)、硫吗啉基(例如，硫吗啉代)、哌嗪基(例如，1-哌嗪基、2-哌嗪基、3-哌嗪基)、六亚甲基亚氨基(hexamethyleniminyl)(例如，六亚甲基亚氨-1-基)、噁唑烷基(例如，噁唑烷-2-基)、噻唑烷基(例如，噻唑烷-2-基)、咪唑烷基(例如，咪唑烷-2-基、咪唑烷-3-基)、噁唑啉基(例如，噁唑啉-2-基)、噻唑啉基(例如，噻唑啉-2-基)、咪唑啉基(例如，咪唑啉-2-基、咪唑啉-3-基)、二氧杂环戊烯基(例如，1，3-二氢杂环戊烯-4-基)、二氧杂环戊烷基(例如，1，3-二氧杂环戊烷-4-基)、二氢噁二唑基(例如，4，5-二氢-1，2，4-噁二唑-3-基)、吡喃基(例如，4-吡喃基)、四氢吡喃基(例如，2-四氢吡喃基、3-四氢吡喃基、4-四氢吡喃基)、硫吡喃基(例如，4-硫吡喃基)、四氢硫吡喃基(例如，2-四氢硫吡喃基、3-四氢硫吡喃基、4-四氢硫吡喃基)、四氢呋喃基(例如，四氢呋喃-3-基、四氢呋喃-2-基)、吡唑烷基(例如，吡唑烷-1-基、吡唑烷-3-基)、吡唑啉基(例如，吡唑啉-1-基)、四氢嘧啶基(例如，四氢嘧啶-1-基)、二氢三唑基(例如，2，3-二氢-1h-1，2，3-三唑-1-基)、四氢三唑基(例如，2，3，4，5-四氢-1h-1，2，3-三唑-1-基)等；稠合非芳族杂环基，诸如二氢吲哚基(例如，2，3-二氢-1h-吲哚-1-基)、二氢异吲哚基(例如，1，3-二氢-2h-异吲哚-2-基)、二氢苯并呋喃基(例如，2，3-二氢-1-苯并呋喃-5-基)、二氢苯并二氧杂环己二烯基(例如，2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂环己二烯基)、二氢苯并二氧杂环庚三烯基(例如，3，4-二氢-2h-1，5-二氧杂环庚三烯基)、四氢苯并呋喃基(例如，4，5，6，7-四氢-1-苯并呋喃-3-基)、色烯基(例如，4h-色烯-2-基、2h-色烯-3-基)、二氢色烯基(例如，3，4-二氢-2h-色烯-2-基)、二氢喹啉基(例如，1，2-二氢喹啉-4-基)、四氢喹啉基(例如，1，2，3，4-四氢喹啉-4-基)、二氢异喹啉基(例如，1，2-二氢异喹啉-4-基)、四氢异喹啉基(例如，1，2，3，4-四氢异喹啉-4-基)、二氢酞嗪基(例如，1，4-二氢酞嗪-4-基)等。

29、术语“芳基”指含有5-14个环原子，至少一个环拥有共轭π电子体系的芳香基团，包括有全碳原子的芳环、芳杂环和并芳环或联芳环，并可带有取代基。芳基可以带有1-6个取代基。杂芳环或芳杂环是指含有5-14个环上原子的基团，其中1-4个杂原子为芳香环上原子，其余环上原子为碳原子。合适的杂原子有氧、硫、氮、和硒原子。合适的芳杂环有呋喃、噻吩、吡啶、吡咯啶、氮上带有低碳数烷基取代基的吡咯烷、吡啶氮氧化物、嘧啶、吡嗪、咪唑及其他类似杂环，并均可带有取代基。

30、术语“随意取代”或“取代”指基团带有1-4个不同的取代基，可以分别是低碳数烷基、低碳数芳基、低碳数芳烷基、低碳数环状烷基、低碳数杂环烷基、羟基、低碳数烷氧基、低碳数芳氧基、多卤代烷氧基、芳烷氧基、低碳数杂芳基、低碳数杂芳环氧基、低碳数杂芳烷基、低碳数杂芳烷氧基、叠氮基、氨基、卤素、低碳数烷巯基、氧基、低碳数酰烷基、低碳数羧酸酯基、羧酸、酰胺基、硝基、低碳数酰氧基、低碳数胺烷基、低碳数烷胺芳基、低碳数烷芳基、低碳数烷胺烷基、低碳数烷氧芳基、低碳数芳胺基、低碳数芳烷胺基、磺酰基、低碳数酰胺烷芳基、低碳数酰胺芳基、低碳数羟烷基、低碳数卤代烷基、低碳数烷胺烷酸基、低碳数脲烷基、氰基、低碳数烷氧烷基、低碳数多卤代烷基、低碳数芳烷氧烷基。

31、“取代芳基”和“取代杂芳基”指芳环或者杂芳环基团上带有1-6个取代基。这些取代基可以是低碳数烷基、低碳数烷氧基、低碳数多卤代烷基、卤素、羟基和氨基。