一种提高mRNA表达水平和表达周期的修饰方法及其应用与流程

文档序号:37016079发布日期:2024-02-09 13:07阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种提高mrna表达水平和表达周期的修饰方法,其特征在于,所述修饰方法包括:

2.根据权利要求1所述的提高mrna表达水平和表达周期的修饰方法,其特征在于,步骤(1)中,所述含有poly a尾的mrna的末端有连续5个硫代修饰;

3.根据权利要求1所述的提高mrna表达水平和表达周期的修饰方法,其特征在于,步骤(1)中,所述dna夹板由互补序列1和互补序列2组成;

4.根据权利要求1-3中任一项所述的提高mrna表达水平和表达周期的修饰方法,其特征在于,步骤(1)中,所述连接反应的具体步骤包括:

5.根据权利要求4所述的提高mrna表达水平和表达周期的修饰方法,其特征在于,所述dna夹板与含有poly a尾mrna的摩尔比为1:(0.8-1.2);

6.根据权利要求1-5中任一项所述的提高mrna表达水平和表达周期的修饰方法,其特征在于,步骤(2)中,所述dna酶为dna酶i;

7.根据权利要求1-6中任一项所述的提高mrna表达水平和表达周期的修饰方法,其特征在于,步骤(2)中,所述纯化的步骤包括:采用氯化锂溶液对消化后的mrna进行沉淀,孵育后离心收集沉淀;采用oligo d(t)磁珠纯化连接成功的mrna。

8.根据权利要求7所述的提高mrna表达水平和表达周期的修饰方法,其特征在于,所述氯化锂溶液的终浓度为1-1.25m。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的提高mrna表达水平和表达周期的修饰方法,其特征在于,所述修饰方法包括:

10.权利要求1-9中任一项所述的提高mrna表达水平和表达周期的修饰方法在制备mrna药物中的应用。


技术总结
本发明提供了一种提高mRNA表达水平和表达周期的修饰方法及其应用,所述修饰方法包括:(1)将一段无任何修饰的mRNA、一段含有poly A尾的mRNA与DNA夹板混合,并用RNA连接酶进行连接反应;所述含有poly A尾的mRNA的末端有连续4‑6个硫代修饰;(2)用DNA酶消化掉DNA夹板,纯化去除杂质,得到具有高表达水平和表达周期的mRNA。

技术研发人员:王威,薛萌萌
受保护的技术使用者:尧唐(上海)生物科技有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/2/8
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