一种改善胃肠道健康的植物乳植杆菌及其应用的制作方法

本发明属于微生物，具体涉及一种改善胃肠道健康的植物乳植杆菌（ lactiplantibacillus plantarum）lplan-1及其应用。

背景技术：

1、肠道和人类的健康息息相关。它是人体重要的消化吸收场所，营养物质在这里被吸收运往全身，并排出身体代谢产生的毒素和垃圾。肠道也是人体最大的免疫器官，肠道的淋巴组织中分布着人体大部分的免疫细胞，抵抗着外来入侵的细菌和病毒。据世界卫生组织统计，肠胃疾病对人类的威胁触目惊心：全球每年死于肠胃疾病的人数在1000万以上，中国有1/5的人口患有肠胃疾病，居世界首位。

2、人类的胃肠内有数万亿个微生物，包括细菌、真菌和病毒。它们大多分布在大肠中，数量大致与全身的细胞数相当。在人体肠道细菌中，有10%到20%的细菌是与他人相同的。微生物群影响着人的健康和食欲、体重和心情。近年来，大量益生菌被发现对肠道健康具有好处，它们被用来预防或治疗炎性肠道疾病，如克罗恩病和溃疡性结肠炎，以及肠道易激综合症等。

3、多种肠道疾病都表现出炎性症状、粘膜层受损、腹泻或便秘，并以腹泻更为多见。放化疗引起的肠损伤是肠道损伤中较为严重的类型，其中化疗药物引起的腹泻（也称化疗相关性腹泻，cid）对患者影响较大，轻则影响患者生活质量，重则导致肿瘤治疗方案中断，更严重的还会导致患者脱水、感染、休克甚至死亡。化疗药物5-氟尿嘧啶(5-fu)和伊立替康（irinotecan , cpt-11）引起的腹泻发生率最高，可达80%。

4、益生菌维护胃肠道健康已经有较长的使用历史，其优点在于安全性较高。但是效果显著的菌株并不多，能达到化药或生物药等效的更是少之又少。joanne m bowen等人（ cancer biology & therapy, 2007, 6(9): 1445-1450）在伊立替康介导的大鼠腹泻模型中证实了含有8株菌的vsl#3可以有效预防伊立替康化疗后的严重腹泻；bruna savassi等人（ frontiers in pharmacology, 2021, 12: 755871）的研究发现干酪乳杆菌bl23、植物乳杆菌b7 和鼠李糖乳杆菌b1共生制剂可减轻化疗引起的粘膜炎，但未证明能改善相关腹泻；应用广泛的明星菌株lgg可降低与5-fu化疗相关的严重腹泻和腹部不适（ british  journal of cancer, 2007, 97(8): 1028-1034）。

5、针对植物乳植杆菌单菌株的相关报导则较少。nina dias coelho-rocha等人（ probiotics and antimicrobial proteins, 2023, 15(1): 160-174）研究了多株植物乳植杆菌，发现对改善5-fu诱导的小鼠肠道粘膜炎有较好作用，但未显示能改善腹泻症状。wei liang等人（ probiotics and antimicrobial proteins, 2023）报道了植物乳植杆菌通过抑制小鼠肠道炎症、调节肠道菌群从而缓解抗生素相关性腹泻（aad）； minah jung等人（ nutrients, 14(2):389，2022）报道了植物乳植杆菌的摄入能够改善患者功能性腹泻症状；kyoungmi jung等人（ nutrients, 14(10):2015，2022）研究显示经摄入4周植物乳植杆菌能够显著改善肠易激综合征腹泻患者肠道不适症状。但尚未有研究报道过植物乳植杆菌单菌株对损伤程度较高的化疗相关性腹泻是否具有治疗和/或预防效果。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种能够改善受试者肠道不适症状，特别是腹泻症状的益生菌解决方案。

2、本发明首先提供了一种植物乳植杆菌（ lactiplantibacillus plantarum）菌株，所述菌株选自保藏号为cctcc no: m 2023354的植物乳植杆菌lplan-1或毒性、免疫原性与生物活性相对于保藏号为cctcc no: m 2023354的植物乳植杆菌lplan-1菌株没有实质变化的传代菌株。

3、在一些具体实施方式中，所述菌株的16s rdna序列如seq id no.1所示，并且所述植物乳植物杆菌含有编码序列如seq id no.2所示的产cat相关酶的基因。

4、其次，本发明还提供了前述植物乳植杆菌（ lactiplantibacillus plantarum）菌株的培养方法，所述方法包括将所述植物乳植杆菌菌株接种至培养基，进行增殖培养，得到增殖的植物乳植杆菌菌株。

5、在一些具体实施方式中，所述培养基每1 l蒸馏水含有bhi肉汤粉末15-20 g，mrs肉汤粉末10-15 g，改良 gam肉汤粉末12-17 g。

6、再次，本发明还提供了一种组合物，其活性成分含前述的植物乳植杆菌（ lactiplantibacillus plantarum）菌株，或含有前述的培养方法得到的植物乳植杆菌（ lactiplantibacillus plantarum）菌株。

7、在一些具体实施方式中，所述植物乳植杆菌（ lactiplantibacillus plantarum）菌株作为唯一活性成分。

8、最后，本发明还提供了前述植物乳植杆菌（ lactiplantibacillus plantarum）或前述组合物在制备微生物制剂中的应用，所述微生物制剂用于改善受试者的肠道健康状况，或治疗和/或预防腹泻和/或抑制肠道病原菌的繁殖。

9、在一些具体实施方式中，所述腹泻是化疗相关性腹泻。

10、在一些具体实施方式中，所述化疗相关性腹泻是活性成分选自如下一种或多种的药物引起的腹泻：5-氟尿嘧啶、替加氟、5'-2'-脱氧尿苷、卡培他滨、替吉奥、紫杉醇、多西他赛、长春瑞滨、顺铂、卡铂、奈达铂、奥沙利铂、洛铂、环磷酰胺、异环磷酰胺、美法仑、卡莫司汀、伊立替康。

11、在一些具体实施方式中，所述肠道病原菌选自以下任意一种或其组合：铜绿假单胞菌、志贺氏菌、大肠杆菌、乙型副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌和艰难梭菌。

12、本发明的植物乳植杆菌具有如下特点：

13、1、无毒力因子、不溶血，具有良好的安全性；

14、2、具有与鼠李糖乳杆菌lgg相当的抗氧化能力，耐受人工胃肠液，对多种致病菌具有抑制作用，能改善肠道屏障，抑制促炎因子的表达，增加水通道蛋白的表达以促进肠道水分重吸收；

15、3、治疗cid的效果与化药相当甚至更优。

16、本发明的菌株保藏信息如下：

17、菌株名称：植物乳植杆菌（ lactiplantibacillus plantarum）lplan-1

18、保藏日期：2023年3月17日

19、保藏单位：中国典型培养物保藏中心（china center for type culturecollection，cctcc），地址：湖北省武汉市武汉大学，邮编：430072，电话：027-68754052

20、保藏编号：cctcc no: m 2023354。