基于生物信息学和血清学的T淋巴母细胞白血病/淋巴瘤检测试剂盒

本技术涉及医学检测，具体地，本发明涉及一种基于生物信息学和血清学的t淋巴母细胞白血病/淋巴瘤检测试剂盒。

背景技术：

1、t淋巴母细胞白血病/淋巴瘤是一种恶性淋巴细胞克隆增生性疾病，是相对少见、恶性程度很高的，属于t细胞系的淋巴母细胞肿瘤。大多数病例原发于淋巴结或结外组织部位时，称为t淋巴母细胞淋巴瘤(t-cell lymphoblastic lymphoma，t-lbl)；少数侵犯外周血和骨髓，称为t淋巴母细胞白血病(t-cell lymphoblastic leukemia，t-all)。t-lbl和t-all具有相似的临床和实验室特征，包括细胞形态学、免疫表型、基因型、细胞遗传学、临床表现和预后。当临床以肿瘤性病灶起病而无骨髓及外周血浸润，或骨髓中肿瘤性淋巴母细胞小于25％时诊断为t-lbl；当有骨髓和外周血受累，骨髓中淋巴母细胞大于25％时诊断为t-all。

2、t-lbl占淋巴母细胞性淋巴瘤的85％，大多数患者是青少年。t-lbl常表现纵隔肿块，其次伴有周围淋巴结、皮肤、肝脏、脾脏、咽淋巴环、cns或性腺侵犯。t-all是一种高度侵袭性的血液恶性肿瘤，主要发生于青少年，好发于男性，占所有成人all的25％。t-all通常表现白细胞病变和伴有纵隔或其它部位的大的肿块。骨髓造血相对减少。t-all/t-lbl具有高度的侵袭性，复发率高，长期生存率低，预后较差等特点，相关生物信息学和血清学研究亟待开展，选择可靠、简便的生物标志物具有重要的研究意义。

技术实现思路

1、为了弥补现有技术的不足，本发明提供了基于生物信息学和/或血清学建立的t-all/t-lbl的基因标志物和/或外周血生化标志物，并提供了其在预测或检测t-all/t-lbl的产品中的应用。

2、本发明采用如下技术方案：

3、本发明提供了一种检测生物标志物的试剂在制备用于预测或检测t-all/t-lbl的产品中的应用，所述生物标志物包括基因标志物和/或外周血生化标志物；

4、所述基因标志物包括cdk1、ccna2、mki67、top2a、foxm1、exo1、kif11、chek1、bub1b和bub1；

5、所述外周血生化标志物包括：血红蛋白(hgb)、促红细胞生成素(tpo)、凝血酶时间(tt)、d-二聚体定量(dd)和c反应蛋白(crp)。

6、进一步地，所述cdk1、ccna2、mki67、top2a、foxm1、exo1、kif11、chek1、bub1b和bub1在t-all/t-lbl患者中显著高表达。

7、进一步地，t-all/t-lbl患者的外周血血红蛋白(hgb)水平低于健康对照组；t-all/t-lbl患者的外周血凝血酶时间(tt)水平低于健康对照组，t-all/t-lbl患者的促红细胞生成素(tpo)水平高于健康对照组，t-all/t-lbl患者的外周血d-二聚体定量(dd)水平高于健康对照组，t-all/t-lbl患者的外周血c反应蛋白(crp)水平高于健康对照组。

8、进一步地，所述基因标志物还包括gzma、il7r、gzmk、ccl5、ccr7、prf1、tigit、ctla4、klrb1和klrd1。

9、进一步地，所述gzma、il7r、gzmk、ccl5、ccr7、prf1、tigit、ctla4、klrb1、klrd1在t-all/t-lbl患者中显著低表达。

10、进一步地，所述外周血生化标志物还包括中性粒细胞百分比(neut％)和淋巴细胞百分比(lymph％)。

11、进一步地，t-all/t-lbl患者的外周血中性粒细胞百分比(neut％)水平低于健康对照组；t-all/t-lbl患者的淋巴细胞百分比(lymph％)水平高于健康对照组。

12、进一步地，所述外周血生化标志物还包括中性粒细胞绝对值(neut)、总蛋白(tp)、球蛋白(glb)、总胆红素(tbil)、钠(na)中的一种或多种。

13、进一步地，t-all/t-lbl患者的外周血中性粒细胞绝对值(neut)水平低于健康对照组；t-all/t-lbl患者的外周血总蛋白(tp)水平低于健康对照组；t-all/t-lbl患者的外周血球蛋白(glb)水平低于健康对照组；t-all/t-lbl患者的外周血总胆红素(tbil)水平低于健康对照组；t-all/t-lbl患者的外周血钠(na)水平低于健康对照组。

14、进一步地，在上述应用中，还包括采用组间标志物区分t-lbl和t-all组，所述组间标志物包括促红细胞生成素(tpo)、低密度脂蛋白(ldl)、叶酸(fa)、球蛋白(glb)、淋巴细胞绝对值(lymph)、肌酐(cr)、总胆固醇(tc)、总蛋白(tp)、凝血酶时间(tt)中一种或多种。

15、进一步地，t-lbl组外周血促红细胞生成素(tpo)水平低于t-all组；t-lbl组外周血低密度脂蛋白(ldl)水平高于t-all组；t-lbl组外周血叶酸(fa)水平高于t-all组；t-lbl组外周血球蛋白(glb)水平高于t-all组；t-lbl组外周血淋巴细胞绝对值(lymph)水平高于t-all组；t-lbl组外周血肌酐(cr)水平高于t-all组；t-lbl组外周血总胆固醇(tc)水平高于t-all组；t-lbl组外周血总蛋白(tp)水平高于t-all组；t-lbl组外周血凝血酶时间(tt)水平高于t-all组。

16、在上述应用中，所述产品为试剂盒、试纸或仪器平台。

17、本发明还提供了一种预测或检测t-all/t-lbl的产品，包括上述的检测生物标志物的试剂。

18、本发明还提供了t-all/t-lbl生物标志物的筛选方法，所述生物标志物包括基因标志物和外周血生化标志物；其中，

19、所述基因标志物的筛选方法，包括如下步骤：a)应用geo数据库的在线分析工具geo2r进行分析，筛选正常t细胞和t-all患者细胞的差异表达基因；b)使用david在线分析工具对差异表达基因开展go功能注释和kegg信号通路富集分析，go功能包括生物学过程、细胞定位和分子功能；c)使用string在线数据库和cytoscape构建差异表达基因的ppi网络，筛选出10个在t-all/t-lbl患者中显著高表达的关键差异表达基因cdk1、ccna2、mki67、top2a、foxm1、exo1、kif11、chek1、bub1b和bub1作为主要基因标志物；

20、所述外周血生化标志物的筛选方法，包括如下步骤：对临床t-all组、t-lbl组、健康对照组的外周血血常规数据和生化数据进行统计学分析，并结合多参数分析，筛选得到血红蛋白(hgb)、促红细胞生成素(tpo)、凝血酶时间(tt)、d-二聚体定量(dd)和c反应蛋白(crp)作为主要外周血生化标志物。

21、本发明具有如下优点和有益效果：

22、(1)本发明筛选了特异性和显著性的基因标志物和/或外周血生化标志物作为生物标志物用于预测或检测t-all/t-lbl，为更好地将临床血清学检测数据用于t-all/t-lbl的鉴别奠定基础。

23、(2)本发明筛选的外周血生化标志物是基于患者的外周血样本，方法简单易行，且检测时间短，为t-all/t-lbl患者的快速诊断和治疗奠定基础。