一种检测人微卫星不稳定性的生物标志物及其应用的制作方法

本发明属于分子生物学，涉及一种检测人微卫星不稳定性的生物标志物及其应用。

背景技术：

1、微卫星(microsatellite)又称短串联重复序列(short tandem repeats,strs)、简单重复序列，由1～6个核苷酸组成，具有高度多态性，广泛存在于原核及真核生物基因组中。由于高度可变性，微卫星在人群中趋于变化，因此被广泛用作分子标记、连锁作图、谱系作图和基因型鉴定的目的。人类基因组中大约3％的区域含有微卫星序列，具有单核苷酸重复序列特征，其中poly(a/t)片段最为丰富。微卫星突变率位点间差别很大，每个位点的变异范围在10-6～10-2之间，同时微卫星变异的倾向随着重复数增加而变大。

2、微卫星不稳定性(microsatellite instability,msi)是指由于复制错误(replication errors,rer)引起的微卫星长度发生改变。其发生主要是参与配对错误修复(mismatch repair,mmr)的基因功能缺陷而产生一种缺陷蛋白质，因而不能正常的校正复制错误，从而引起微卫星的改变，使其不能正常地发挥调控作用，导致细胞增殖及分化异常，促发恶性肿瘤形成。msi现象于1993年被jacobs等人在结直肠癌中首次发现，与癌症发生有关，可用于癌症检测。

3、目前msi标志物检测主要有pcr-毛细管电泳法检测msi标志物，ihc检测错配修复蛋白表达情况和ngs检测msi标志物三种方法。其中，多重荧光pcr-毛细管电泳法检测msi状态是国际公认的金标准，nccn、asco等国际知名机构联合推荐。同时提取同一患者的正常组织和肿瘤组织样本dna，采用多重荧光pcr的方法对检测位点进行扩增，再通过毛细管电泳对扩增产物进行检测，并利用专业软件对两种组织来源检测结果进行对比分析，能准确的给患者msi状态进行分型。金标准检测具有以下明显的缺点导致msi检测普及存在困难：①需要使用对照样本，增加了检测成本和工作量。②pcr扩增完成后需要进行毛细管电泳检测，检测流程更长。③毛细管电泳仪器及配套试剂耗材费用较高，增加了检测成本。④检测过程中需要对pcr产物进行开盖处理，易导致污染。免疫组化(ihc)可用于mmr相关蛋白(mlh1、msh2、msh6、pms2)的检测，通过显微设备观察各个细胞中是否发生表达，进而分析是否发生mmr功能缺陷。当所有细胞中均可检出4种蛋白时，则为mmr表达正常(pmmr)；当细胞中存在一种或以上蛋白表达缺失时，则为mmr表达缺失(dmmr)。免疫组化可作为基础检测进行开展，但是由于不同检测试剂盒性能差异较大、检测灵敏度稍低、肉眼观察时对医师要求较高等原因，故免疫组化难以作为msi检测的标准方案。ngs可用于msi标志物的检测，检测时对样本中的多个msi标志物进行检测。ngs平台检测msi正在不断成熟，但是由于检测成本高、检测周期长、生信算法差异较大等缺点，导致应用前景被限制。

4、综上所述，目前检测msi状态的方法均存在较明显的缺陷，因此亟需提供一种检测准确度高、检测平台通用、检测成本低廉、检测周期短的检测方法用于msi状态的确认。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足和实际需求，本发明提供一种检测人微卫星不稳定性的生物标志物及其应用，能够精准检测人群的微卫星(ms)状态，无需对照样本，检测成本低，操作简便，检测平台通用性高，灵敏度高，最低检测限可低至1％，显著高于市面常规检测试剂盒。

2、为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：

3、第一方面，本发明提供了一种检测人微卫星不稳定性的生物标志物，所述生物标志物包括：第一标志物、第二标志物、第三标志物、第四标志物、第五标志物、第六标志物、第七标志物、第八标志物、第九标志物、第十标志物、第十一标志物、第十二标志物、第十三标志物、第十四标志物或第十五标志物中的任意一种；

4、所述第一标志物含有11个连续t的同聚物重复，定位在人sdhc基因，起始位置为chr1:161,309,336；所述第一标志物的核酸序列包括如seq id no.1所示的序列；

5、所述第二标志物含有12个连续a的同聚物重复，定位在人cop1基因，起始位置为chr1:176,105,711；所述第二标志物的核酸序列包括如seq id no.2所示的序列；

6、所述第三标志物含有11个连续a的同聚物重复，定位在人mre11基因，起始位置为chr11:94,212,931；所述第三标志物的核酸序列包括如seq id no.3所示的序列；

7、所述第四标志物含有8个连续a的同聚物重复，定位在人acvr2a基因，起始位置为chr2:148,683,686；所述第四标志物的核酸序列包括如seq id no.4所示的序列；

8、所述第五标志物含有12个连续t的同聚物重复，定位在人blm基因，起始位置为chr15:91,303,326；所述第五标志物的核酸序列包括如seq id no.5所示的序列；

9、所述第六标志物含有14个连续a的同聚物重复，定位在人tgfbr2基因，起始位置为chr3:30,691,872；所述第六标志物的核酸序列包括如seq id no.6所示的序列；

10、所述第七标志物含有12个连续a的同聚物重复，定位在人pbrm1基因，起始位置为chr3:52,676,066；所述第七标志物的核酸序列包括如seq id no.7所示的序列；

11、所述第八标志物含有12个连续t的同聚物重复，定位在人braf基因，起始位置为chr7:140,421,096；所述第八标志物的核酸序列包括如seq id no.8所示的序列；

12、所述第九标志物含有12个连续a的同聚物重复，定位在人ptprd基因，起始位置为chr9:8,341,281；所述第九标志物的核酸序列包括如seq id no.9所示的序列；

13、所述第十标志物含有10个连续t的同聚物重复，定位在人pold1基因，起始位置为chr19:50,911,948；所述第十标志物的核酸序列包括如seq id no.10所示的序列；

14、所述第十一标志物含有13个连续t的同聚物重复，定位在人suz12基因，起始位置为chr17:30,293,150；所述第十一标志物的核酸序列包括如seq id no.11所示的序列；

15、所述第十二标志物含有13个连续a的同聚物重复，定位在人sf3b1基因，起始位置为chr2:198,267,244；所述第十二标志物的核酸序列包括如seq id no.12所示的序列；

16、所述第十三标志物含有11个连续a的同聚物重复，定位在人pbrm1基因，起始位置为chr3:52,696,311；所述第十三标志物的核酸序列包括如seq id no.13所示的序列；

17、所述第十四标志物含有11个连续a的同聚物重复，定位在人sesn1基因，起始位置为chr6:109,319,968；所述第十四标志物的核酸序列包括如seq id no.14所示的序列；

18、所述第十五标志物含有12个连续t的同聚物重复，定位在人wrn基因，起始位置为chr8:30,933,817；所述第十五标志物的核酸序列包括如seq id no.15所示的序列。

19、本发明的生物标志物能够精准检测人群的微卫星(ms)状态，无需对照样本，检测成本低，操作简便，检测平台通用性高，灵敏度高，最低检测限可低至1％，显著高于市面常规检测试剂盒。

20、seq id no.1：

21、ctaattttttttttttttttcgtaaagatggggtctcattacgttgcctaggttgaccttgaactcctgaactcaacggcccccgccttggcctcccaaagtactaggattacaggtgtgagccaccatgccagctccaactttaatgagtgtctttgacccatgtttctccttgcgaaaggagttttgagttataatcatttttttttttctcagccctatcagtgatgcagtctggtaaaggtagggatccttctccataaatcagttttctttattctttaatttatttttgtaacctaatcctgatacaggtgttttttttttttttttttttttttttttggagacagagtttcactcttgttgcccagactggagctggagtgcaatggtgcgatcttggctcac。

22、seq id no.2：

23、tactttcttcctaagaccaatcccataaacttaacacagcaacttaatggaaaggtgacaatttcatgaaattgaaaaattgctaaggatgtgagaaattcttgattccttacttccactctcttaatatcctcttccaaaacacttagctccttctggatctgttccagttgctgcagattaaatagagagagaaagacaaaaaaaaaaaagcctaagccaaaccaaaatggcatcaccatgatcataaaataaatttacattaggaaaataatttctatcaaacttggcactaatggcaaattaacaggagggataaccatcaacaaaatatagctagaagttcccattttttaatgcaaaggtagagaattatgtgaaaacacaatgttgtacttctttaatacaacag。

24、seq id no.3：

25、ttgactcaatttgactacacaatgagaaaaagggaaggcatgctttccacagacaaactaaactgatcatttccaaaattccaacaaactctaagaaaacaataattacccctgtgggatcgtcatgattgccatgaatactaaacactggaattgaaatgttgaggttgccatcttgatagttcacccatggaaaccttaaaaaaaaaaagttacttaaaatttccatacgggacaaaagctgttttccctaagattctcctccaaaatattaatgcaatcataggcaaactgcataatctacattggcatatgaccactagtttagagctttaaaaaataaaatcataggcgacaattcatttcaattagtttgaaaatatctcaaagcactacattttaaagaaaccc。

26、seq id no.4：

27、agcatgtaaacagttgggaataggtgacagagtatattttagaaagtttgtaccagtttgaaagtcaggaggattttaatgaaaatgatttattttacttttcttacttttcaggacctgtagatgaatacatgttgccatttgaggaggaaattggccagcatccatctcttgaagacatgcaggaagttgttgtgcataaaaaaaagaggcctgttttaagagattattggcagaaacatgctgtaagttatccagttagcttttcatttgaaattccaataaaacacttttcagaggaattatttatctctgcacatttctctttcttctgcaagtattttctggaaggtgatcttcacacaggatattctagagttctagaggcagaattagggctatgtctgt。

28、seq id no.5：

29、cgtgcccagccccactttaaaaaaaaaaaaaaaaaagaaaaagaaatcaagatcttaagacttttttttttttttttagtgacagggtctcactgtgttgcccaggctggtcttgaactcctggacttaagcaatcctcctgccttggcctccccaaagggctgggattacagtcatgagccaccatgcctagccaagacttttttttttttccctcaaagaaaaatattaacaacataattattttatagctagacagataagtttacagcagcagcttattcatgtgatggagcacatctgtaaattaattgatactattcctgatgataaactgaaacttttggattgtgggaacgaactgcttcagcagcggaacataaggtatcttaattttcccccttctggaata。

30、seq id no.6：

31、attgcctttctgtctggaggccatattattcatttattctctttctctctctccctctcccctcgcttccaatgaatctcttcactctaggagaaagaatgacgagaacataacactagagacagtttgccatgaccccaagctcccctaccatgactttattctggaagatgctgcttctccaaagtgcattatgaaggaaaaaaaaaagcctggtgagactttcttcatgtgttcctgtagctctgatgagtgcaatgacaacatcatcttctcagaaggtgagttttcttctcttaagggtgtgggacctgagatctgtgccaattttttgtatccttggtctgcagtgtcatagagcacattcctcctgtggtggattgcatacagtggattaggagctcattcag。

32、seq id no.7：

33、cttcccaaaccagcaaaccctaggccagaaaaaatcactgcaatttcatttagctagaaggatccactaagaaggcatttcgctagtcaaaacctaatgcctaccagctaaagcagcatcttcttcactttctgagccatattgaagtgccattgtaattgctgataaacgacctccttgtactgctcttttattactacaaaaaaaaaaaaagcaattagacagggaaggatgttataataattaggttactttacagggaacaggaactattaacaaagtgttaagatgaaagaaaaataatttctattcaattgcctccttagtttatctctgtacttaatggttctcataatcaatcttagccgaggaaactatttttttcctcttagaaaagagggagtggaaaataa。

34、seq id no.8：

35、aaaatggatacactggcttacattggctgtgtcctcatacacactcgtcaagtcactataattattcaaaatagctaaataaatgtcaacattttaataaagctgatttagtaattaataaaacttaacagttgaagttgtggatgttaaataaaagtactttagtcactcattgagttgccgactaattgccccatgcattttttttttttaaagcactgttaccttaatttaagattttaggagttgggtttctgtccttttccacattaaaaatacctgataggaactgttaattaccctttccacaattaacaaaaattagaattgaatttcaatttaaatgtctttgcccaaacaaaagtgaaaataggttatttgaaaacaacaaaacagagcttactgtctagtg。

36、seq id no.9：

37、agtagatacctgtatccatcaataaaactggcattgatgtaatcagatccttctactccacggataggctgcaggcatacccttgtggattcatatggcataatattaacaaggcgatttttgaatttattacatggaagattggcactgataaaccttgaggtgtgagcttttgagctggctagacgctgttgaataggaaaaaaaaaaaaggaaaaacccaacaaagatcattttcacctacagtttgaatgcagtgtaccccagatttcccttttagatataaatcttttgtttacttaaagtaaatgactattcaaattgtactgcttttcacatctacctaatcactctctatagcctattggatttctatatattttctgaaagtatagtctctcaagttaggaga。

38、seq id no.10：

39、ctgcctcaggcccctgagtagctgggaccacaggcgtgcaccaccacacctggctaatttttaaaatttttttgtagagatagggttttgccatgttgcccaggctgatctgaaactcctgagttcaagcgatcctcctgcctcagcctcccaatgtgctgggattgcaggagcgagcactgctcccagccaatgaatgattttttttttttaaagggtgaggccacaagacagggcgggggcggcatgggaactcctagccctgactcccggccgcggctgctcccctcccaggtactacgacgtccccatcgccaccctggacttctcctcgctgtacccgtccatcatgatggcccacaacctgtgttacaccacgctccttcggcccgggactgcacagaaactgggg。

40、seq id no.11：

41、gttttttgttgtttattttttgttaggtgtatagacacacttttggatgtcatatttaacagggaaagcatagagtcatgggcctgaataacagttgagtacaaatatttataaattggttgaagtaactttgatttcaatgttatattttaaagtctaggttattttactacagagcattacaatgataaaatatttccttttttttttttttagcttgtcagctcatttgcagcttacgtttactggtttcttccacaaaaatggtatgtatttaaaagtaaataaagtggcattttaatagcaagatacctttgtgaatgtaaaaaaagtggggcttctgagtgtaaatttataaaattaagtttaatggaaaatatgttggttctgatgtttttgaactttaaggtatga。

42、seq id no.12：

43、ctatagtttgtagagctatgcctttccatttatctccccaaatcagtagcccaaattttaggacagctgtcctattaaacatggacaggctgtgtgtgtacctctagtcccaactactaaggaggctgagcaggaggatcacttgagcccaaaggtttgagtccagtctgggcaacatagtaagaccctgtctcctaaagaaaaaaaaaaaaagacaaagttacattacaacttaccatgttcaatgatttcaactaaacttctaagatgtggcaagatggcacagcccataagaatagctatctgttgtacaatcttaataccagtgtgtctcgcttgccaggacttcttgcttttgcacacagcttttaagaagggcaataaagaaggaatgcccagggcagaggctacaa。

44、seq id no.13：

45、aagagcccatccatcacaagttccagctacacacttactccttcagtcactgtgccctgattgtcttgcccatcttcatcatcatcttcgtcatctgcttctcctttctgaacaaactcatttcttgttcgaaggtacaaatcccagagtttgcaagcggctttatattcaggagaatctggctgtatgttagcaaagagaaaaaaaaaaacactttagtaatgtattggaaattagttgctacttttaaagcacctgtttcagcaaagaccaaaaattgttacaaattttaacatcctcatgattaaaacatatatgggtccaaatcccgcttccaaaaaattaagtgtatgttttaaagacattctgaaatcaaattatttaggtcttatctcattaaagaaagacttg。

46、seq id no.14：

47、tttgtaatgtcacagatgcagtagttgctaacagaaggaggtctgaatgtgtggccaccatcacaatgaatttctggactgattccacagccgaatgtgaatgaggcaagagaatgatagtgtgtgagtaaaactactgcatgtaccaattccgcaagggaccagctgtgctcttcagcttttaaaagtcccttagggggaaaaaaaaaaagaatatatttttgtactggggtgtggtaaaagtatacagttcattttagtatttaatttattgaaaacatgagtcatcatacaaagcctagcataaaattatcatttgaaacatgtagaacccagaatttgctaatttttatgaatatgcattcacaaatagaacttaacataatctgttaagacattcactattatttt。

48、seq id no.15：

49、tttaatgaagtggctaaatgaatatctctgctttgtggtttgaaaattaatattgattttttttccccctagaggaagaaatcctacttagcgacatgaacaaacagttgacttcaatctctgaggaagtgatggatctggctaagcatcttcctcatgctttcagtaaattggaaaacccacggaggttaaatattaccttttttttttttaacttaaatcaattctgtttatttttttatcacattttcctatatgtgaagaatactattcattaaggctgactcatagaaatttgcttgaatacacacacacagactgatgcataaatttgagaaatatctttccagttgttgaatagtgaatccaaaggtttaagccttttctgtctgctttgtaggatgttttatga。

50、优选地，所述生物标志物包括第一标志物、第二标志物、第三标志物、第四标志物、第五标志物、第六标志物、第七标志物、第八标志物、第八标志物、第九标志物、第十标志物、第十一标志物、第十二标志物、第十三标志物、第十四标志物或第十五标志物中的任意6-9个的组合。

51、优选地，所述生物标志物包括第一生物标志物、第二生物标志物、第三生物标志物、第四生物标志物、第五生物标志物和第六生物标志物。

52、优选地，所述生物标志物包括第一生物标志物、第二生物标志物、第三生物标志物、第四生物标志物、第五生物标志物、第六生物标志物和第七生物标志物。

53、优选地，所述生物标志物包括第一生物标志物、第二生物标志物、第三生物标志物、第四生物标志物、第五生物标志物、第六生物标志物和第八生物标志物。

54、优选地，所述生物标志物包括第一生物标志物、第二生物标志物、第三生物标志物、第四生物标志物、第五生物标志物、第六生物标志物第七生物标志物和第八生物标志物。

55、优选地，所述生物标志物包括第一生物标志物、第二生物标志物、第三生物标志物、第四生物标志物、第五生物标志物、第六生物标志物、第七生物标志物和第九生物标志物。

56、优选地，所述生物标志物包括第一生物标志物、第二生物标志物、第三生物标志物、第四生物标志物、第五生物标志物、第六生物标志物、第七生物标志物、第八生物标志物和第九生物标志物。

57、第二方面，本发明提供了第一方面所述的生物标志物及其检测试剂在制备检测人微卫星不稳定性的产品中的应用。

58、第三方面，本发明提供了一种检测人微卫星不稳定性的方法，所述方法包括：

59、使用分子信标探针和引物扩增第一方面所述的生物标志物的同聚物重复区域或同聚物重复的突变区域。

60、优选地，所述引物包括限制性引物和过量引物。

61、优选地，所述限制性引物与所述分子信标探针具有相同的扩增方向。

62、优选地，所述过量引物的单链模板与所述分子信标探针互补。

63、优选地，所述过量引物的浓度大于所述限制性引物的浓度。

64、优选地，所述扩增包括多重扩增。

65、优选地，所述扩增的体系包括高保真dna聚合酶。

66、优选地，所述扩增的循环数为35-45个循环。

67、上述35-45中的具体点值可以选择35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45等。

68、优选地，所述扩增包括第一方面中至少两个生物标志标志物和一个内参基因在同一反应管中进行。

69、第四方面，本发明提供了一种检测人微卫星不稳定性的试剂盒，所述试剂盒包括检测第一方面所述的生物标志物的试剂。

70、优选地，所述试剂包括用于扩增第一方面所述的生物标志物的引物和分子信标；所述引物包括限制性引物和过量引物。

71、优选地，所述限制性引物和过量引物的长度各自独立地为18-29bp，tm值各自独立地为58-65℃。

72、上述18-29bp中的具体点值可以选择18bp、20bp、22bp、24bp、26bp、27bp、28bp、29bp等。

73、上述58-65℃中的具体点值可以选择58℃、59℃、60℃、61℃、62℃、63℃、64℃、65℃等。

74、优选地，所述限制性引物的核酸序列包括如seq id no.16-seq id no.30所示的序列。

75、seq id no.16：ctttgacccatgtttctccttgc。

76、seq id no.17：ctgttccagttgctgcagat。

77、seq id no.18：acactggaattgaaatgttgag。

78、seq id no.19：agcatccatctcttgaagacatgcaggaagt。

79、seq id no.20：atgagccaccatgcctagc。

80、seq id no.21：acagtttgccatgaccccaa。

81、seq id no.22：ttctgagccatattgaagtgcca。

82、seq id no.23：ttgccgactaattgccccat。

83、seq id no.24：gcttttgagctggctagacg。

84、seq id no.25：tcccaatgtgctgggattg。

85、seq id no.26：agtctaggttattttactacagagca。

86、seq id no.27：ggcaacatagtaagaccctgtc。

87、seq id no.28：tttgcaagcggctttatattcagg。

88、seq id no.29：actgcatgtaccaattccgc。

89、seq id no.30：cctcatgctttcagtaaattgg。

90、优选地，所述过量引物的核酸序列包括如seq id no.31-seq id no.45所示的序列。

91、seq id no.31：ggatccctacctttaccagactg。

92、seq id no.32：tgccattagtgccaagtttg。

93、seq id no.33：ttttggaggagaatcttaggg。

94、seq id no.34：ctaactggataacttacagcatgtttc。

95、seq id no.35：ctgctgctgtaaacttatctgtc。

96、seq id no.36：tgaagaaagtctcaccaggc。

97、seq id no.37：ataacatccttccctgtctaattg。

98、seq id no.38：aggacagaaacccaactcctaaa。

99、seq id no.39：ggaaatctggggtacactgca。

100、seq id no.40：tcagggctaggagttccca。

101、seq id no.41：agaaaccagtaaacgtaagctgca。

102、seq id no.42：catcttgccacatcttagaagttt。

103、seq id no.43：tttaaaagtagcaactaatttcc。

104、seq id no.44：acttttaccacaccccagtaca。

105、seq id no.45：cctatatgtgaagaatactattcatt。

106、优选地，所述分子信标的核酸序列包括如seq id no.46-seq id no.60所示的序列。

107、seq id no.46：cgccaaatcattttttttttctcagtggcg。

108、seq id no.47：cgcgtagacaaaaaaaaaaagcctacgcg。

109、seq id no.48：gcgagaccttaaaaaaaaaagttacctcgc。

110、seq id no.49：cgtcgctctttttttatgcacacgacg。

111、seq id no.50：ccagggactttttttttttccccctgg。

112、seq id no.51：cgacgaaggaaaaaaaaacgtcg。

113、seq id no.52：ccgactactacaaaaaaaaaaaaggtcgg。

114、seq id no.53：ccgaggcatttttttttttaaagcctcgg。

115、seq id no.54：cagcgtaggaaaaaaaaaaaggaaacgctg。

116、seq id no.55：ccaggaatgatttttttttttaaaggcctgg。

117、seq id no.56：cgcagtttcctttttttttttttagctctgcg。

118、seq id no.57：ccgagtaaagaaaaaaaaaaaagacaactcgg。

119、seq id no.58：ccgagagagaaaaaaaaaacactctcgg。

120、seq id no.59：ccaccgggaaaaaaaaaagaaggtgg。

121、seq id no.60：cgacgtacctttttttttttaactcgtcg。

122、优选地，所述分子信标结合在过量引物的延伸链上。

123、优选地，所述分子信标的长度为13-25bp。

124、上述13-25bp中的具体点值可以选择13bp、14bp、16bp、18bp、20bp、22bp、24bp、25bp等。

125、优选地，所述分子信标包括茎区和环区。

126、优选地，所述茎区的长度为4-8bp；所述茎区的tm比所述环区的tm高5-10℃。

127、上述4-8bp中的具体点值可以选择4bp、5bp、6bp、7bp、8bp等。

128、上述5-10℃中的具体点值可以选择5℃、6℃、7℃、8℃、9℃、10℃等。

129、优选地，所述分子信标的茎区和/或环区包括硫代修饰、磷酸化修饰、巯基修饰或间臂修饰中的任意一种或至少两种的组合。

130、优选地，所述分子信标的5’端标记有荧光发生基团，3’端标记有荧光淬灭基团。

131、优选地，所述荧光基团包括fam、vic、hex、rox、cy3或cy5中任意一种或至少两种的组合。

132、优选地，所述淬灭基团包括bhq1、bhq2、dabcyl或bhq3中任意一种或至少两种的组合。

133、优选地，所述试剂盒还包括用于检测内参基因的内参引物和内参探针；所述内参探针的5’端荧光发生基团和3’端荧光淬灭基团不同于所述分子信标的5’端荧光发生基团和3’端荧光淬灭基团。

134、优选地，所述内参基因包括b2m基因。

135、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

136、本发明的生物标志物能够精准检测人群的微卫星(ms)状态，无需对照样本，检测成本低，操作简便，检测平台通用性高，灵敏度高，最低检测限可低至1％，显著高于市面常规检测试剂盒。