利用qPCR检测入侵物种鳄雀鳝的引物探针组合、试剂盒及方法

文档序号:37367388发布日期:2024-03-22 10:20阅读:来源:国知局

技术特征:

1.利用qpcr检测入侵物种鳄雀鳝的引物探针组合,其特征在于:为以下四种引物探针组合之一:

2.利用qpcr检测入侵物种鳄雀鳝的试剂盒,其特征在于:包括权利要求1所述的利用qpcr检测入侵物种鳄雀鳝的引物探针组合。

3.根据权利要求2所述的利用qpcr检测入侵物种鳄雀鳝的试剂盒,其特征在于:还包括hifi-taq酶、缓冲液、ddh2o。

4.根据权利要求2或3所述的利用qpcr检测入侵物种鳄雀鳝的试剂盒,其特征在于:还包括内参dna模板、内参引物和内参探针,所述内参dna模板的碱基序列如seq id no.13所示,所述内参引物的碱基序列如seq id no.14-15所示,所述内参探针的碱基序列如seq idno.16所示。

5.利用qpcr检测入侵物种鳄雀鳝的方法,其特征在于:包括以下步骤:

6.根据权利要求5所述的利用qpcr检测入侵物种鳄雀鳝的方法,其特征在于:步骤s3中,qpcr扩增的反应体系为:hifi-taq master mix 10μl、引物每条1μl、探针1μl、edna模板2μl、内参引物每条0.5μl、内参探针1μl、内参dna模板1μl、ddh2o补足至20μl。

7.根据权利要求5所述的利用qpcr检测入侵物种鳄雀鳝的方法,其特征在于:


技术总结
本发明属于分子生物学和分子生态学技术领域,具体公开了利用qPCR检测入侵物种鳄雀鳝的引物探针组合、试剂盒及方法。本发明创新了引物设计方法,筛选出四种优势鳄雀鳝qPCR引物探针组合,结合优化的PCR反应体系和条件,能够在多种鱼类DNA背景下检测出鳄雀鳝DNA,进而实现qPCR技术与环境eDNA检测的结合。本发明检测方法操作简便、灵敏性高、特异性强、短时间内实现结果可视,适合野外实时监测研究,真正实现无创野外实时监测鳄雀鳝群体动向。

技术研发人员:李晨虹,王辉,戚亿利,凌海宁
受保护的技术使用者:上海海洋大学
技术研发日:
技术公布日:2024/3/21
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