1.一种种公牛冻精总rna的提取方法，其特征在于：包括以下步骤，
2.根据权利要求1所述的一种种公牛冻精总rna的提取方法，其特征在于：所述体细胞裂解液包括0.1％sds和1m tris-hcl，ph为7.3。
3.一种种公牛不同活力精子pirna检测方法，其特征在于：利用pirna转录组测序为基础的荧光定量分析来检测影响精子活力中的10种功能性pirna，主要包括以下步骤，
4.根据权利要求3所述的一种种公牛不同活力精子pirna检测方法，其特征在于：通过分析od260/280比值判断nanodrop检测rna的纯度。
5.根据权利要求3所述的一种种公牛不同活力精子pirna检测方法，其特征在于：所述pirna数据库网址为http://pirnabank.ibab.ac.in/。
6.根据权利要求3所述的一种种公牛不同活力精子pirna检测方法，其特征在于：使用茎环法逆转录合成pirna的cdna，通用茎环序列为：gtcgtatccagtgcagggtccgaggtattcgcactggatacgac；pirna的逆转录引物如下所示：
7.一种种公牛不同活力精子pirna检测方法的应用，其特征在于：包括用于评价公牛精子活力的功能性差异表达pirna以及分析不同活力精子中pirna组合表达。
8.根据权利要求7所述的一种种公牛不同活力精子pirna检测方法的应用，其特征在于：采用实时荧光定量pcr分析不同活力精子中pirna组合表达，实时荧光定量pcr 20μl反应体系为：10μl的2×real-time pcr master mix，正、反向引物各0.5μl，cdna 1μl，8μlh2o；反应条件为：95℃3min；95℃，15s，57℃，15s，72℃，20s，40个循环。
9.根据权利要求8所述的一种种公牛不同活力精子pirna检测方法的应用，其特征在于：所述实时荧光定量pcr检测中所使用的上游引物为的特异性引物,下游引物为根据茎环序列设计的通用下游引物：5’—agtgcagggtccgaggtatt--3'。
10.根据权利要求9所述的一种种公牛不同活力精子pirna检测方法的应用，其特征在于：所述特异性荧光定量引物序列如下：