一种人造石抗菌性能的快速检测方法

本发明涉及抗菌性能检测，具体涉及一种人造石抗菌性能的快速检测方法。

背景技术：

1、当前，人造石抗菌性能检测主要是外送第三方检测机构，但国内第三方从送样到拿到检测报告需要近一个月的时间，人造石产品的抗菌性能下线时无法检测，导致该性能处于无监管状态，这显然不能满足产品生产的要求。本着一个班次生产的产品需要在当班次完成检测的原则，抗菌检测也需要在一个班次完成，因此亟需开发一种人造石抗菌性能快速检测方法，以解决抗菌产品下线无法监管的问题。同时快速检测方法不但要能快速获得产品抗菌性能，对新产品做出合格与否的判断，还要能适应生产车间简陋检测条件和非专业人员操作的特殊情况。

2、在现有的一些抗菌性能快速检测方法中，比如专利cn113308511a公开了一种玻璃表面抗菌性快速检测方法，在抗菌玻璃表面接种大肠杆菌检测液，然后再在其表面覆盖一片抗菌玻璃，等待10-100min检测时间；接着取下覆盖的抗菌玻璃，将荧光检测拭子的棉签吸取抗菌玻璃表面接种的大肠杆菌检测液；然后掰断密封杆，充分摇匀至出现气泡，使得荧光液把检测液中的大肠杆菌染色；接着放置预设时间后，把荧光检测拭子放入atp检测仪中测量抗菌玻璃的atp含量，从而判断抗菌玻璃的抗菌性。专利cn108998500a公开了一种材料抗菌性能快速检测方法，取试验菌种的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物，用磷酸缓冲液反复冲洗斜面，洗下菌苔，振荡混匀，稀释，4℃冰箱保存备用；取对照样品材料和受检样品材料，用70％乙醇溶液擦拭其表面，用无菌水冲洗，自然干燥；取对照样品材料和受检样品材料，放入三角瓶中，加入95ml pbs，混匀后加入5ml预制菌悬液，振荡接触处理；振荡培养接触后的菌液加入ttc标准溶液，避光振荡，取10ml菌液离心，取沉淀加入10ml丙酮进行萃取，将萃取液离心后取上清液测定od485，根据ttc标准曲线，计算抗菌率。虽然上述专利都实现了快速检测获得抗菌结果，但几乎都是借助了较为高端的精细化检测设备，这对于国内大部分生产车间和工人操作是难以实现的。因此，现有的这些快速检测方法显然是不适用的。

3、传统的抗菌检测需要经历检测和培养两个环节，耗费时间至少是24小时以上，因此，传统抗菌检测方法显然不适应连续化大生产过程。再者，在绝大部分工厂是缺少相关抗菌检测的精密仪器，而且也无法专门配备抗菌检测人员，一般由普通工人兼职。所以，针对于连续化生产的工厂抗菌检测需求的发展趋势是快速、无需精密仪器和工人即可操作。为了实现这个目的，需要解决抗菌检测试剂性能稳定、检测操作简单、可重复性高等问题。

技术实现思路

1、为了克服现有技术存在的缺点和不足，本发明提供了一种人造石抗菌性能快速检测方法。

2、本发明旨在开发一种能快速检测产品抗菌性能且检测过程不需要精细化设备的检测方法，同时，该检测方法经过简单培训普通工人即可上岗操作，非常适合应用于抗菌人造石产品车间下线时的品质监控。

3、抗菌性能好即细菌无法繁殖代谢，抗菌性能差即细菌能繁殖代谢，本着细菌繁殖代谢这个出发点，利用细菌繁殖代谢过程会导致ph的变化，可以通过某些对ph敏感的试剂以显色的形式来反映抗菌活性。本发明以一种对细菌繁殖代谢导致ph变化敏感的抗菌检测试剂为检测药剂，该检测试剂是由佛山齐晋新材料科技有限公司生产和销售的一种抗菌显色试剂(齐晋牌，型号qj-01，规格500ml，可通过常规途径购买得到)，呈紫色液体，将待测样品浸泡于该紫色检测试剂中，当抗菌性能差时，细菌大量繁殖代谢，抗菌检测试剂接触后会发生颜色变化(由紫色变为黄色)，颜色变化越深，细菌繁殖更强，即抗菌性能越差，同理可知，当抗菌性能好时，细菌无法繁殖代谢，抗菌检测试剂接触后保持原有颜色(紫色)，与此同时，为了实现大大缩短检测时间，我们在单一抗菌检测试剂的基础上加入细菌特需营养液(肉汤)，这样就可以将细菌检测和细菌培养合二为一，把整体时间大大减少，这样就实现了抗菌性能检测的简单化、快速化操作。

4、本发明的目的通过下述方案来实现：

5、一种人造石抗菌性能的快速检测方法，包括如下步骤：

6、首先，复苏菌种和检测用品灭菌，接着用灭菌后的紫色抗菌检测试剂稀释菌种至一定浓度，取一定量稀释后菌液接种到灭菌后的人造石表面，用透明圆环圈住菌液所在区域，再在菌液上盖透明薄片，然后整体放入无菌环境下培养一段时间后取出，肉眼直接查看菌液颜色变化，若菌液依旧为紫色，表明人造石具有抗菌性能，颜色越紫，抗菌性能越好；反之，若菌液颜色由紫色变为黄色，表明人造石不具有抗菌性能或抗菌性能差，黄色越深，抗菌性能越差。

7、为了半定量获得人造石产品的抗菌率，采用不同梯度的已知抗菌率人造石应用上述方法获得一系列对应颜色梯度，以此绘制抗菌检测标准曲线，后期通过对照标准曲线上颜色半定量获取人造石的抗菌率数据。

8、优选地，所述菌种为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌的一种或多种。

9、优选地，所述检测用品包括抗菌检测试剂、透明圆环和透明薄片。

10、优选地，所述透明圆环的材质为玻璃、亚力克和塑料。

11、优选地，所述透明薄片的材质为玻璃、亚克力和塑料。

12、优选地，所述灭菌为高温高压灭菌、紫外线灭菌和药剂灭菌的一种或多种组合。

13、优选地，所述灭菌的药剂为酒精、次氯酸钠和84消毒液的一种或多种。

14、优选地，所述紫色抗菌检测试剂来源为：购买自佛山齐晋新材料科技有限公司生产的型号为qj-01规格为500ml的齐晋牌抗菌显色试剂。

15、优选地，用灭菌后的紫色抗菌检测试剂稀释菌种至浓度为103-107cfu/ml。

16、优选地，接种到灭菌后的人造石表面的菌液量为100-1000μl。

17、优选地，所述无菌环境为室温，湿度40％-65％的无菌空间。一般来说，工厂的无菌车间或者无菌室亦可满足要求。

18、优选地，无菌环境下培养的时间为2-5h。

19、优选地，所述抗菌检测标准曲线为颜色-抗菌率变化曲线。

20、本发采用了检测和培养合二为一的细菌显色简易化技术，重点解决了车间工况下无法快速、简单、准确检测产品抗菌性能的技术问题，本发明的检测方法简单有效，可以快速检测产品抗菌性能且检测过程不需要精细化设备的检测方法，同时，该检测方法经过简单培训普通工人即可上岗操作，非常适合应用于抗菌人造石产品车间下线时的品质监控。

21、本发明创造性地提供了一种无需借助精密仪器就能快速、准确的检测产品的抗菌性能的方法。这与现有快速检测法中的atp法和od值法最大的区别是能规避死细菌或活性不高细菌带来的检测错误，现有atp法和od值法都是无法分辨死细菌(或活性低细菌)与正常细菌，导致检测失真；其次是atp法和od值法都是需要借助精密仪器，而本发明不需要，肉眼观察即可判断结果；最后，本发明的检测方法在车间环境也可实施，对检测环境要求不高。

22、相对于现有技术，本发明具有如下优点和有益的效果：

23、(1)本发明提供的人造石抗菌性能的快速检测方法，能通过抗菌检测试剂颜色变化，快速定性或半定量获取人造石产品的抗菌性能。

24、(2)本发明提供的人造石抗菌性能的快速检测方法，操作简单，车间工人经过简单培训即可上岗操作。

25、(3)本发明提供的检测方法无需高端仪器设备，而且在数个小时内(一般为2-5h)就能得出结果，非常适合车间工况。