纳米抗体串联体、编码基因及应用的制作方法

本发明属于细胞免疫学，具体涉及纳米抗体串联体、编码基因及应用。

背景技术：

1、il-17是具有广谱促炎效应的细胞因子，通过激活dcs、单核和中性粒细胞浸润诱导和调节炎性th17细胞应答。il-17家族包括il-17a～il-17f以及受体il-17ra、il-17rc等，不同组织局部的不同il-17分子与其相应受体作用，发挥不同的促炎作用。其中il-17a的分布最广，il-17a的细胞来源主要有3种，包括适应性免疫细胞cd4+th17、固有免疫的γδt细胞和固有样淋巴细胞3(ilc3s)，il-17a可通过激活t细胞和其他免疫细胞产生各种炎性反应，导致机体自身免疫紊乱，在诸如系统性红斑狼疮(sle)、类风湿性关节炎(ra)和多发性硬化(ms)、银屑病(psoriasis)等自身免疫性疾病中均发挥重要作用。

2、il-17a可作用于纤维母细胞、上皮细胞以及巨噬细胞，诱导多种炎症前因子及趋化因子例如cxcl1、ccl2、ccl7、ccl20以及基质金属蛋白酶(mmp)等的表达。il-17a还可以通过介导聚集中性粒细胞和巨噬细胞来参加炎症发生。在一些自身免疫性疾病的研究中，通过阻断il-17a，可以减轻实验性自身免疫性脑脊髓炎的严重程度(park,h.,et al.,adistinct lineage of cd4 tcells regulates tissue inflammation by producinginterleukin 17.nat immunol,2005.6(11):1133-41)。

3、单克隆抗体(mabs)作为一种新的药物形式，来阻断疾病的可溶性介质，如细胞因子和受体。这种新的药物与传统治疗方法相比有一些特点，如高特异性，靶向选择性，具有治疗自身免疫性疾病的免疫抑制和抗炎药物的优点。

4、中国专利cn103936854b中公开了一种抗il-17a单克隆抗体及其制备与应用，该专利中还包含编码所述抗体的多核苷酸序列的表达载体，宿主细胞，以及单克隆抗体用于制备治疗由il-17a介导的免疫系统疾病中的用途。该发明从全合成噬菌体抗体库中筛选出抗il-17a单克隆抗体，然后用一种构建小容量定点突变的全合成噬菌体抗体库的方法，对筛选出的抗il-17a单克隆抗体的重链可变区cdr3区突变建库进行抗体体外亲和力成熟，最终获得高亲和力的抗体，同时增加了抗体库的多样性。但单克隆抗体具有一定的缺点，生产成本高，会产生耐药性，并且可能会出现机会性感染和毒性。

5、单域抗体(sdab)与常规的单克隆抗体不同，单域抗体缺少轻链，并且重链的可变区与铰链区之间没有ch1区，只有重链的可变区(vhh)和两个常规的ch2和ch3区。单域抗体的分子质量仅为传统抗体的十分之一，是最小的功能性抗原结合片段，由于其分子尺寸小，能够穿透到细胞间隙和组织中，并且能够穿过血脑屏障并在中枢神经系统中发挥作用。单域抗体的结构稳定，并且免疫原性低，易于人源化改造。单域抗体的cdr3较长，与抗原的结合方式更加灵活。

6、对于自身免疫性疾病临床可用的特效药物较少，单克隆抗体治疗存在一定的缺陷。因此，亟需开发一种稳定性高、亲和力强、制备方法简单、生产成本低的单域抗体类的药物。

7、本发明人致力于抗il-17a抗体开发，基于筛选出的9个单域抗体(已另案申请)，进行进一步的技术开发，获得了12个亲和力、阻断效果和稳定性相对提升的单域抗体组合，基于专利法单一性的相关规定，对12个不同单域抗体组合分别请求保护。

8、本发明是针对上述12个单域抗体组合抗体之一所进行的专利申请。

9、本发明人还基于以上，开发了基因修饰干细胞技术以及后续的应用技术，基于专利法单一性的相关规定，对3个不同的基因修饰干细胞以及3项不同的应用分别请求保护。

10、为便于理解本发明技术方案，可选地参阅本项目其他专利申请文件。

技术实现思路

1、本发明的术语和声明：

2、1、如本文所用，术语“氨基酸”：包含天然氨基酸、合成氨基酸、以及以类似于天然氨基酸的方式起作用的氨基酸类似物和氨基酸模拟物。天然氨基酸是由遗传密码编码的氨基酸。氨基酸类似物是指具有与天然存在的氨基酸相同的基本化学结构。氨基酸在本文中可以由其通常已知的三字母符号或由iupac-iub生物化学命名法委员会(biochemicalnomenclature commission)所推荐的单字母符号来提及。

3、2、如本文所用，术语“抗体”：指特异性结合和识别抗原的包括免疫球蛋白基因的构架区的多肽或其片段。术语抗体的使用意指包含全抗体和其抗原结合片段。术语抗体包含单特异性抗体、双特异性抗体和多特异性抗体，只要其表现所期望的生物活性或功能即可。

4、3、如本文所用，术语“单域抗体(vhh)”、“单域抗体”(singledomain antibody,sdab，或纳米抗体nanobody)具有相同的含义，指克隆抗体重链的可变区，构建仅由一个重链可变区组成的单域抗体，它是具有完整功能的最小的抗原结合片段。通常先获得天然缺失轻链和重链恒定区1(ch1)的抗体后，再克隆抗体重链的可变区，构建仅由一个重链可变区组成的单域抗体(vhh)。“本发明单域抗体”、“本发明的抗il-17a单域抗体”可互换使用，均指特异性识别和结合于il-17a的单域抗体。

5、4、如本文所用，术语“同源性”或“同一性”是指两个肽或两个核酸分子之间的序列相似性。同源性可以通过比较每个序列中的位置来确定，为了进行比较的目的，这些位置可能会被对齐。当比较序列中的一个位置被相同的碱基或氨基酸占据时，则分子在该位置是同源的。

6、5、如本文所用，术语“表位”指抗体的互补位所结合的抗原上的任何抗原决定簇。抗原决定簇通常包含分子的化学活性表面基团，例如氨基酸或糖侧链，并且通常具有特定的三维结构特征以及特定的电荷特征。例如，表位通常以独特的空间构象包括至少3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15个连续或非连续的氨基酸，其可以是“线性”表位或“构象”表位。

7、6、如本文所用，术语“氨基酸序列”是指氨基酸相互连接形成肽链(或多肽)的顺序，氨基酸序列只能按照一个方向读取。

8、7、如本文所用，术语“核酸分子”可以是dna形式或rna形式。dna形式包括cdna、基因组dna或人工合成的dna。dna可以是单链的或是双链的。dna可以是编码链或非编码链。本发明中的核苷酸分子全长序列或其片段通常可以用pcr扩增法或人工合成的方法获得。

9、8、如本文所用，术语“核苷酸序列”是指dna或rna中碱基的排列顺序，即在dna中为a、t、g、c的排列顺序，或者在mrna中a、u、g、c的排列顺序，也包括rrna、trna、mrna中碱基的排列顺序。

10、9、如本文所用，术语“框架区”即骨架区，在免疫球蛋白的h和l链的近n端约有110个氨基酸序列的变化很大，其他部分的氨基酸序列相对恒定，据此可将轻链和重链区分为可变区(v)和恒定区(c)。可变区内包含超变区hvr或称互补决定区cdr与fr骨架区。

11、10、如本文所用，术语“人源化”抗体是指抗体的可变区(vh或vhh)的fr区部分，恒定区部分(即ch和cl区)或抗体所有全部由人类抗体基因所编码。人源化抗体包括嵌合抗体、改型抗体和全人源化抗体等几类。

12、11、如本文所用，术语“fc区”是指免疫球蛋白的c端区域，该区域是由重链恒定结构域中仅ch2和ch3组成的功能性结构单元。fc没有结合抗原的能力，然而其具有半衰期延长的性质，并且具有恒定的氨基酸序列。

13、12、如本文所用，术语“可变”表示抗体中可变区的某些部分在序列上有所不同，它形成了各种特定抗体对其特定抗原的结合和特异性。然而，可变性并不均匀地分布在整个抗体可变区中。它集中于轻链和重链可变区中称为互补决定区或超变区中的三个片段中。本文中，“可变区”与“互补决定区”可互换使用。

14、13、如本文所用，术语“表达载体”是多核苷酸，其在引入合适的宿主细胞后能够被转录和翻译为多肽。

15、14、本文所用的术语“高变区”、“超变区”、“互补决定区”、“hvr”或“cdr”，是指在抗体可变结构域区域中序列上高变和/或形成结构上限定的环(“高变环”)的区域。通常，天然四链抗体包含六个hvr或cdr：三个存在于vh中(h1、h2、h3)，三个存在于vl中(l1、l2、l3)。基于chothia定义规则，示例性cdr(lcdr1、lcdr2、lcdr3、hcdr1、hcdr2和hcdr3)位于氨基酸残基l26-l32(l1)、l50-l52(l2)、l91-l96(l3)、h26-h32(h1)、h52-h56(h2)和h96-h101(h3)处(chothia等人，j.mol.biol.196:901-917(1987))。基于kabat定义规则，示例性cdr(lcdr1、lcdr2、lcdr3、hcdr1、hcdr2和hcdr3)位于氨基酸残基l24-l34(l1)、l50-l56(l2)、l89-l97(l3)、h31-h35(h1)、h50-h65(h2)和h95-h102(h3)处(kabat等人，sequences of proteinsofimmunological interest,the fifth edtion,public health service,nationalinstitutes of health,bethesda,md(1991))。基于imgt定义规则，示例性cdr(lcdr1、lcdr2、lcdr3、hcdr1、hcdr2和hcdr3)位于氨基酸残基l27-l32(l1)、l50-l51(l2)、l89-l97(l3)、h26-h33(h1)、h51-h56(h2)和h93-h102(h3)处(honjo,t.和alt,f.w.(1995)immunoglobulin genes.academic press pp.3-443)。本领域人员公知，在本领域中可以通过多种方法来定义抗体的cdr，例如基于序列可变性的kabat定义规则、基于结构环区域位置的chothia定义规则和基于cdr移植的抗体人源化设计的参考工具(参见j molbiol.273:927-48,1997)。本领域技术人员应当理解的是，除非另有规定，否则术语给定抗体或其区(例如可变区)的“cdr”及“互补决定区”应理解为涵盖如通过本发明描述的上述已知方案中的任何一种界定的互补决定区。虽然本公开请求保护的范围是基于imgt定义规则所示出的序列，但是根据其他cdr定义规则所对应的氨基酸序列也应当落在本发明的保护范围中。

16、15、本文所用的术语“ec50”是指半最大效应浓度(concentration for 50％ofmaximal effect)，即能引起50％最大效应(在本文中为“结合il-17a能力”)的浓度。

17、16、本文所用的术语“ic50”是指半抑制浓度(half maximal inhibitoryconcentration)，即能引起50％最大抑制效应(在本文中为“抑制il-17a和其受体il-17ra结合的能力)的浓度。

18、本发明的技术方案如下：

19、第一方面，本发明提供了一种抗体，所述的抗体包含第一单域抗体和第二单域抗体；

20、所述的第一单域抗体的氨基酸序列包含如seq id no:1所示的hcdr1、如seq idno:2所示的hcdr2、如seq id no:3所示的hcdr3；和/或；与seq id no:1-3所示的氨基酸序列具有至少80％序列一致性的氨基酸序列；

21、所述的第二单域抗体的氨基酸序列包含如seq id no:4所示的hcdr4、如seq idno:5所示的hcdr5、氨基酸序列如seq id no:6所示的hcdr6；和/或；与seq id no:4-6所示的氨基酸序列具有至少80％序列一致性的氨基酸序列。

22、优选地，所述抗体的氨基酸序列包含：通过在seq id no:1-6所示的氨基酸序列上进行添加、缺失、修饰和/或取代中的至少一种方式所得到的氨基酸序列。

23、进一步地，所述抗体的氨基酸序列包含：与seq id no:1-6所示的氨基酸序列相比具有1、2、3、4、5、6、7、8或9个氨基酸差异的氨基酸序列。

24、在一些实施方式中，一个或多个氨基酸的取代可以是一个或多个氨基酸的保守性取代。这种保守性取代优选地是以下组(a)到(e)中的一个氨基酸被同组中的另一个氨基酸残基取代：(a)小的脂肪族、非极性或弱极性残基：ala、ser、thr、pro和gly；(b)极性、带负电的残基及其(不带电的)酰胺：asp、asn、glu和gln；(c)极性、带正电的残基：his、arg和lys；(d)大的脂肪族、非极性残基：met、leu、he、val和cys；以及(e)芳香族残基：phe、tyr和trp。

25、在一些具体的实施方式中，保守性取代如下：ala到gly或到ser；arg到lys；asn到gln或到his；asp到glu；cys到ser；gln到asn；glu到asp；gly到ala或到pro；his到asn或到gln；ile到leu或到val；leu到ile或到val；lys到arg、到gln或到glu；met到leu、到tyr或到ile；phe到met、到leu或到tyr；ser到thr；thr到ser；trp到tyr；tyr到trp；和/或phe到val、到ile或到leu。

26、seq id no:1为：esllrlya。

27、seq id no:2为：httsdtt。

28、seq id no:3为：hvtsmrdsqny。

29、seq id no:4为：gfsthiya。

30、seq id no:5为：itrggvt。

31、seq id no:6为：naggtnggy。

32、优选地，所述第一单域抗体或第二单域抗体还包括用于连接重链可变区的至少4个重链框架区。

33、进一步地，所述重链框架区包含部分或全部选自人源、鼠源、灵长目动物源或骆驼科动物源的抗体重链框架区或其变体；

34、优选地，包含部分或全部选自骆驼科动物源的抗体重链框架区或其变体；

35、更优选地，包含部分或全部选自羊驼源的抗体重链框架区或其变体。

36、第二方面，本发明提供了一种抗体，所述的抗体包括：

37、(1)第一单域抗体，所述的第一单域抗体的结构为：

38、fr1-hcdr1-fr2-hcdr2-fr3-hcdr3-fr4；

39、(2)第二单域抗体，所述的第二单域抗体的结构为：

40、fr5-hcdr4-fr6-hcdr5-fr7-hcdr6-fr8；

41、其中hcdr1、hcdr2和hcdr3选自：

42、如seq id no:1-3所示的氨基酸序列；或；与seq id no:1-3相比具有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、或11个氨基酸差异的氨基酸序列；

43、hcdr4、hcdr5和hcdr6选自：

44、如seq id no:4-6所示的氨基酸序列；或；与seq id no:4-6相比具有1、2、3、4、5、6、7、8或9个氨基酸差异的氨基酸序列；

45、fr1、fr2、fr3和fr4选自：如seq id no:7-10所示的氨基酸序列；或；与seq id no:7-10相比具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列；

46、fr5、fr6、fr7和fr8选自：如seq id no:11-14所示的氨基酸序列；或；与seq idno:11-14相比具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列；

47、所述的氨基酸差异通过在seq id no:1-6所示的氨基酸序列上进行添加、缺失、修饰和/或取代中的至少一种方式实现。

48、优选地，所述的hcdr1的氨基酸序列如seq id no:1所示，所述的hcdr2的氨基酸序列如seq id no:2所示，所述的hcdr3的氨基酸序列如seq id no:3所示，所述的hcdr4的氨基酸序列如seq id no:4所示，所述的hcdr5的氨基酸序列如seq id no:5所示，所述的hcdr6的氨基酸序列如seq id no:6所示。

49、优选地，所述的fr1的氨基酸序列如seq id no:7所示，所述的fr2的氨基酸序列如seq id no:8所示，所述的fr3的氨基酸序列如seq id no:9所示，所述的fr4的氨基酸序列如seq id no:10所示，所述的fr5的氨基酸序列如seq id no:11所示，所述的fr6的氨基酸序列如seq id no:12所示，所述的fr7的氨基酸序列如seq id no:13所示，所述的fr8的氨基酸序列如seq id no:14所示。

50、seq id no:7为：dvqlvesggglvqpggslrlscaas。

51、seq id no:8为：mgwyrqlpgqerewvai。

52、seq id no:9为：

53、nyrdsvkgrftlsrdvatntiylqmtslkpedtavyyc。

54、seq id no:10为：wgqgtqvtvss。

55、seq id no:11为：qvqlvesggglvqpggslrlscaas。

56、seq id no:12为：mgwyrqapgkqrelvat。

57、seq id no:13为：

58、nnadsvkgrftisrdnakntaylqmnslkpedtavyyc。

59、seq id no:14为：wgqgtqvtvss。

60、优选地，所述的第一单域抗体和第二单域抗体的氨基酸序列直接连接；或；通过连接子间接连接。

61、进一步地，所述连接子为(ggggs)n，其中n选自1、2、3、4、5或6；较佳地，所述连接子为(ggggs)3。

62、具体地，所述的第一单域抗体和第二单域抗体以任选的顺序连接；或；第一单域抗体和第二单域抗体按照从n端到c端的顺序连接；或；第一单域抗体和第二单域抗体按照从c端到n端的顺序连接。

63、优选地，所述的抗体为抗il-17a抗体。

64、第三方面，本发明提供了一种重组蛋白，所述的重组蛋白包含上述第一方面或第二方面任一方面所述的抗体。

65、优选地，所述重组蛋白还包含协助其表达和/或分泌，或延长其在体内半衰期的生物活性蛋白或其功能片段。

66、优选地，所述生物活性蛋白或其功能片段选自免疫球蛋白fc结构域、血清白蛋白、白蛋白结合多肽、前白蛋白、羧基末端肽、弹性蛋白样多肽、his标签、gst标签、mbp标签、flag标签和sumo标签中的至少一种。

67、优选地，所述的免疫球蛋白fc结构域源自人抗体、鼠抗体、灵长目动物抗体或骆驼科动物抗体、或其变体；

68、较佳地，所述的免疫球蛋白fc结构域源自人igg抗体，例如igg1 fc、igg2fc、igg3fc或igg4 fc，优选igg1 fc。

69、在一些实施方案中，可在本文中所提供抗体的fc区或fc结构域中引入一个或多个氨基酸修饰，以此产生fc区变体。fc区变体可包含在一或多个氨基酸位置处包含氨基酸修饰(例如置换、缺失和插入)的人fc区序列(例如人igg1、igg2、igg3或igg4 fc区)。

70、在一些实施方案中，所述重组蛋白可以为单聚体、二聚体或多聚体。

71、第四方面，本发明提供了一种药物偶联物，所述的药物偶联物包括：

72、(1)上述第一方面或第二方面任一方面所述的抗体或所述的重组蛋白；和

73、(2)与(1)偶联的偶联部分。

74、在一些实施方式中，所述偶联部分包括可检测标记物、药物、毒素、细胞因子、放射性核素或酶。

75、第五方面，本发明提供了一种抗体制剂，所述的抗体制剂包括：

76、(1)第一方面或第二方面任一方面所述的抗体或所述的重组蛋白；和；

77、(2)药学上可接受的载体。

78、具体地，所述的药学上可接受的载体包括生理学相容的任何和所有的溶剂、分散介质、包衣、抗细菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。优选地，该载体适合于静脉内、肌内、皮下、肠胃外、脊柱或表皮施用。

79、进一步地，所述的药学上可接受的载体选自赋形剂、缓冲剂、乳化剂、稳定剂、稀释剂、粘合剂、防腐剂、润滑剂中的一种或多种。

80、第六方面，本发明提供了一种试剂盒，所述的试剂盒包括上述第一方面或第二方面任一方面所述的抗体或所述的重组蛋白或所述的抗体制剂；

81、任选地，所述的试剂盒还包括装载所述抗体制剂的容器。

82、第七方面，本发明提供了一种核酸分子，所述的核酸分子编码上述第一方面或第二方面任一方面所述的抗体或所述的重组蛋白。

83、具体地，所述的核酸可为rna、dna或cdna。

84、对于一些实施方式，本发明的核酸也可呈载体形式，可存在于载体中和/或可为载体的一部分，该载体例如质粒、粘端质粒或yac。载体可为表达载体，该表达载体通常包含至少一种本发明的核酸，其可操作地连接至一个或多个适合的表达调控元件(例如启动子、增强子、终止子等)。

85、第八方面，本发明提供了一种表达载体，所述的表达载体包含所述的核酸分子。

86、优选地，所述的表达载体选自dna、rna、病毒载体、质粒、转座子、或其组合。

87、第九方面，本发明提供了一种药物组合物，所述的药物组合物包含上述第一方面或第二方面任一方面所述的抗体、所述的重组蛋白、所述的药物偶联物、所述的抗体制剂、所述的核酸分子或所述的表达载体；

88、任选地，所述药物组合物还包括至少一种药学上可接受的辅料。

89、具体地，所述的药学上可接受的辅料选自稀释剂、等渗剂、缓冲剂、乳化剂、增稠剂、甜味剂、崩解剂、防腐剂、吸收剂、分散剂、稳定剂、助悬剂、溶剂、沉淀抑制剂、表面活性剂、助流剂、粘合剂、润滑剂、水合剂、乳化加速剂、着色剂、香味剂、离子交换剂、脱模剂、涂布剂、矫味剂或抗氧化剂中的一种或多种。

90、第十方面，本发明提供了上述第一方面或第二方面任一方面所述的抗体、所述的重组蛋白、所述的药物偶联物、所述的抗体制剂或所述的药物组合物的用途，所述的用途为以下用途中的至少一种：

91、(1)制备预防和/或治疗自身免疫性疾病的药物；

92、(2)制备预防和/或治疗癌症的药物；

93、(3)制备检测试剂或试剂盒。

94、具体地，所述自身免疫性疾病包括银屑病、类风湿关节炎、卡斯尔曼病、恶性类风湿关节炎、血管炎、自身免疫性肝炎、脊椎关节炎、狼疮性肾炎、大疱性类天疱疮、天疱疮、恶性贫血、艾迪生病、局灶性硬皮病、特发性艾迪生病、炎症性肠病、结节病、妊娠疱疹、多发性肌炎、巴塞杜病、成人斯蒂尔病、系统性红斑狼疮、视神经脊髓炎、慢性盘状红斑狼疮、多发性硬化症、系统性硬皮病、进行性系统性硬化症、硬皮病、皮肌炎、自身免疫性溶血性贫血、结节性动脉周围炎、主动脉炎综合征、幼年特发性关节炎、混合性结缔组织病、干燥综合征、过敏性肉芽肿性血管炎、过敏性血管炎、类风湿性血管炎、大血管血管炎、igg4相关疾病、anca相关性血管炎、good-pasture综合征、cogan综合征、线性iga大疱性皮肤病、缓慢进展型i型糖尿病、i型糖尿病、rs3pe综合征、颞动脉炎、白塞氏病、风湿性多肌痛、纤维肌痛、抗磷脂抗体综合征、嗜酸性筋膜炎、格林巴利综合征、重症肌无力、慢性萎缩性胃炎、非酒精性脂肪性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、急进性肾小球肾炎、巨幼红细胞性贫血、自身免疫性中性粒细胞减少症、特发性血小板减少性紫癜、桥本病、自身免疫性肾上腺皮质功能减退症、原发性甲状腺功能减退症、银屑病关节炎、类天疱疮、获得性大疱性表皮松解症、斑秃、白斑病、寻常型白斑病、慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经病、多灶性运动神经病、巨细胞动脉炎、肌萎缩侧索硬化、原田病、自身免疫性视神经病、特发性无精子症、习惯性流产、乳糜泻、强直性脊柱炎、严重哮喘、慢性荨麻疹移植免疫、家族性地中海热、嗜酸性粒细胞慢性鼻窦炎、扩张型心肌病、系统性肥大细胞增多症或包涵体肌炎；

95、进一步地，所述自身免疫性疾病为斑块状银屑病、类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、银屑病关节炎或狼疮性肾炎。

96、具体地，所述癌症包括口腔癌、呼吸系统癌、眼癌、皮肤癌、头颈癌、喉癌、食道癌、淋巴瘤、胃癌、骨癌、消化系统癌症、肝癌、肝癌、肺癌、肾癌、神经母细胞瘤、白血病、胶质母细胞瘤、胆管癌、膀胱癌、子宫内膜癌、乳腺癌、腹膜癌、宫颈癌、胆管癌、绒毛膜癌、结直肠癌、结缔组织癌、黑色素瘤、骨髓瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、基底细胞癌、直肠癌、唾液腺癌、肉瘤、鳞状细胞癌、睾丸癌、甲状腺癌、子宫癌、泌尿系统癌症、b细胞淋巴瘤、慢性淋巴细胞性白血病、急性成淋巴细胞性白血病、毛细胞白血病或慢性成髓细胞性白血病。

97、第十一方面，本发明提供了一种用于非诊断目的的体外检测样品中il-17a的方法，所述的方法包括以下步骤：

98、(1)将上述第一方面或第二方面任一方面所述的抗体、所述的重组蛋白、所述的药物偶联物或所述的抗体制剂与待测样品接触；

99、(2)检测抗原-抗体复合物；

100、(3)进行结果判读。

101、第十二方面，本发明提供了一种预防和/或治疗自身免疫性疾病的方法，所述方法包括：

102、向受试者施用治疗有效量的上述第一方面或第二方面任一方面所述的抗体、所述的重组蛋白、所述的药物偶联物或所述的抗体制剂。

103、第十三方面，本发明提供了一种预防和/或治疗癌症的方法，所述方法包括：

104、向受试者施用治疗有效量的上述第一方面或第二方面任一方面所述的抗体、所述的重组蛋白、所述的药物偶联物或所述的抗体制剂。

105、本发明所取得的技术效果：

106、(1)本发明的串联抗体1-c11+1-g4的亲和力好，可与目标蛋白结合，且结合能力显著优于阳性抗体。

107、(2)阻断效果好，串联抗体1-c11+1-g4可以阻断human il-17a蛋白激活293f-il-17ra-il-17rc-act1-nfκb-luc；1-c11+1-g4阻断效果显著优于阳性对照抗体。

108、(3)稳定性强，1-c11+1-g4的tm值为62.37，tagg值为63.35，优于阳性抗体。