一种微藻混合培养生产油脂的方法与流程

本发明属于生物，具体涉及一种微藻混合培养生产油脂的方法。

背景技术：

1、目前对于小球藻、栅藻等产油微藻研究的较多。cn102250773a公开了一株栅藻藻株，该藻株的生长可利用人工培养基或经适当处理的废水生长，其特点是油脂产率高于目前大多数分藻株，该藻株应用领域包括co2的固定，废水的净化，油脂、蛋白质、色素、淀粉、多糖、核酸的生产。cn102660464a公开了一株富油海洋微藻微拟球藻(nannochloropsisgaditana)藻株及其应用，该藻株可在ph=4.5的环境下正常生长，其油脂含量可达35%。cn102703326a公开了一种高co2耐受性和固定率的微藻及其选育方法，但该专利所提供的藻株并未涉及该藻株的油脂含量。在实际应用中，当环境中co2体积分数大于5v%时，大部分微藻的生长将受到抑制，固碳效率低；同时一般微藻在中性条件下适宜生长，在偏酸性或者偏碱性的条件下不利于微藻的生长，且微藻的产油效果一般。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种提高微藻生物增长率且微藻产油量高的微藻混合培养生产油脂的方法。

2、本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：

3、一种微藻混合培养生产油脂的方法，包括：由强化培养液对微藻进行强化培养得到强化微藻，然后将强化微藻应用于待处理废液进行混合培养，最后收集混合培养的微藻，分离油脂；所述强化培养液中含有木糖衍生物，木糖衍生物中具有2-呋喃甲酰肼结构。本发明由2-呋喃甲酰肼与木糖反应制备得到一种木糖衍生物，通过将木糖衍生物加入适用培育微藻的培养液中，可以提高微藻的生长性能，提高微藻产量，并且在进一步的产油测试中，由含有木糖衍生物的培养液培养得到的微藻，其油脂含量进一步提高，表明本发明制备得到的木糖衍生物并非仅仅起到碳源的作用，其还以刺激微藻，从而提高微藻的产量及产油性能。

4、优选地，强化培养液包括碳源试剂和无机盐，碳源试剂包括葡萄糖；或，所述待处理废液中含有厨余废液、城市污水或畜牧业沼液；或，所述微藻包括栅藻和/或小球藻。

5、更优选地，碳源试剂为葡萄糖和木糖衍生物，木糖衍生物的量为葡萄糖的5-20wt%；或，所述无机盐包括硝酸钠、磷酸氢二钾、硫酸镁、氯化钙和碳酸钠；或，所述强化培养中，微藻的接种量为10-40wt%。

6、优选地，木糖衍生物的制备中，由木糖和2-呋喃甲酰肼在催化剂作用下反应制成木糖衍生物。

7、优选地，木糖衍生物的制备溶剂为乙醇；或，所述催化剂为乙酸，乙酸的使用量为木糖的40-80wt%；或，所述2-呋喃甲酰肼的使用量为木糖的1-3wt%。

8、优选地，强化培养中，将微藻接种到强化培养液中，调节ph为中性，生长培养得到强化微藻；或，所述强化培养中，光照强度2000-3000 lux，温度20-35℃，转速100-200 rpm，光暗比8-16h：16-8h，培养时间3-7d。

9、优选地，微藻混合培养生产油脂中，将厨余废液、稀释剂和强化微藻混合于光生物反应器中，培养至生长稳定期结束，收集混合微藻。

10、更优选地，微藻混合培养生产油脂中，稀释剂为水，厨余废液的使用量为稀释剂的10-30wt%。

11、更优选地，微藻混合培养生产油脂中，强化微藻为强化栅藻和强化小球藻。

12、更优选地，微藻混合培养生产油脂中，强化栅藻的接种量为厨余废液的10-50wt%。

13、更优选地，微藻混合培养生产油脂中，强化小球藻的接种量为厨余废液的10-50wt%。

14、本发明公开了一种木糖衍生物，所述木糖衍生物中具有2-呋喃甲酰肼键合基团。

15、优选地，木糖衍生物的制备中，将木糖和2-呋喃甲酰肼加入乙醇中，然后加入催化剂，回流反应2-6h，tlc监测反应，反应完成后，冷却，抽滤，干燥，得到木糖衍生物。

16、更优选地，木糖衍生物的制备中，木糖的使用量为乙醇的1-4wt%。

17、更优选地，木糖衍生物的制备中，2-呋喃甲酰肼的使用量为木糖的1-3wt%。

18、更优选地，木糖衍生物的制备中，催化剂为乙酸，乙酸的使用量为木糖的40-80wt%。

19、本发明公开了一种强化培养液，包括上述木糖衍生物。

20、优选地，强化培养液的制备中，将碳源试剂和无机盐混合于水中，制备得到强化培养液。碳源试剂包括葡萄糖和木糖衍生物，无机盐包括硝酸钠、磷酸氢二钾、硫酸镁、氯化钙、碳酸钠。

21、更优选地，强化培养液的制备中，葡萄糖的使用量为水的0.5-2wt%。

22、更优选地，强化培养液的制备中，木糖衍生物的使用量为葡萄糖的5-20wt%。

23、更优选地，强化培养液的制备中，硝酸钠的使用量为葡萄糖的4-12wt%。

24、更优选地，强化培养液的制备中，磷酸氢二钾的使用量为葡萄糖的0.2-0.6wt%。

25、更优选地，强化培养液的制备中，硫酸镁的使用量为葡萄糖的0.3-1.4wt%。

26、更优选地，强化培养液的制备中，氯化钙的使用量为葡萄糖的0.1-0.5wt%。

27、更优选地，强化培养液的制备中，碳酸钠的使用量为葡萄糖的0.1-0.4wt%。

28、更优选地，强化培养液中还可以加入乙酰丙酸苯腙内酰胺，乙酰丙酸苯腙内酰胺的使用量为葡萄糖的2-10wt%。本发明进一步发现，在木糖衍生物的使用下，同时使用乙酰丙酸苯腙内酰胺共同用于微藻的培育，然后再应用于产油处理即废水处理中，可以提高微藻的产油量，微藻可以由多种微藻共同混合。

29、本发明公开了一种强化微藻的培育方法，包括：将微藻接种于上述强化培养液中，培育得到强化微藻。

30、优选地，强化微藻的培育中，将微藻接种到强化培养液中，调节ph为中性，生长培养得到强化微藻。

31、更优选地，强化微藻的培育中，强化培养中，光照强度2000-3000 lux，温度20-35℃，转速100-200 rpm，光暗比8-16h：16-8h，培养时间3-7d。

32、更优选地，强化微藻的培育中，微藻的接种量为5-40wt%。

33、更优选地，强化微藻的培育中，微藻为栅藻或小球藻。

34、本发明公开了木糖衍生物在培育微藻中的用途。

35、本发明由于采用木糖和2-呋喃甲酰肼在乙酸的催化作用下反应制备得到木糖衍生物，然后与其他碳源试剂、无机盐混合于水中，制备得到强化培养液，碳源试剂还包括葡萄糖，无机盐包括硝酸钠、磷酸氢二钾、硫酸镁、氯化钙、碳酸钠，本发明发现由木糖和2-呋喃甲酰肼制成木糖衍生物后，将其与其他碳源试剂、无机盐混合后，得到强化培养液，对微藻进行强化培育后，最后可以将强化培育后的微藻应用废液处理中；因而具有如下有益效果：由强化培养液对微藻进行强化培养，可以提高微藻的生物增长率；然后强化微藻应用于待处理废液中，可以提高微藻中油脂含量。因此，本发明是一种提高微藻生物且微藻产油量高的微藻混合培养生产油脂的方法。