一种基于RPA-CRISPR/Cas12a检测鸭圆环病毒的试剂组合及其试剂盒以及应用

技术特征：

1.一种基于rpa-crispr/cas12a检测鸭圆环病毒的试剂组合，其特征在于：它包括引物对和crrna；

2.根据权利要求1所述的基于rpa-crispr/cas12a检测鸭圆环病毒的试剂组合，其特征在于：它包括引物对ducv-rep-rpa-f1/ducv-rep-rpa-r2和crrna。

3.根据权利要求1或2所述的基于rpa-crispr/cas12a检测鸭圆环病毒的试剂组合，其特征在于：它还包括ssdna探针，所述ssdna探针的核苷酸序列为5`-ttatt-3’。

4.根据权利要求3所述的基于rpa-crispr/cas12a检测鸭圆环病毒的试剂组合，其特征在于：所述ssdna探针的5’端标记有fam且3’标记有bhq或者所述ssdna探针的5’端标记有fam且3’标记有biotin。

5.一种检测鸭圆环病毒的rpa-crispr/cas12a检测试剂盒，其特征在于：它包括权利要求1所述的试剂组合。

6.根据权利要求5所述的rpa-crispr/cas12a检测试剂盒，其特征在于：它还包括核酸扩增试剂、crrna转录试剂和cas12a酶。

7.根据权利要求6所述的rpa-crispr/cas12a检测试剂盒，其特征在于：所述核酸扩增试剂为rpa扩增试剂。

8.根据权利要求5或6所述的rpa-crispr/cas12a检测试剂盒，其特征在于：它还包括ssdna探针，所述ssdna探针的核苷酸序列为5`-fam-ttatt-bhq-3’。

9.如权利要求8所述的rpa-crispr/cas12a检测试剂盒在鸭圆环病毒非诊断目的检测中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：包括以下步骤：

技术总结
本发明涉及一种基于RPA‑CRISPR/Cas12a检测鸭圆环病毒的试剂组合及其试剂盒以及应用，基于RPA‑CRISPR/Cas12a检测鸭圆环病毒的试剂组合，它包括引物对和crRNA；所述引物对为DuCV‑Rep‑RPA‑F1/DuCV‑Rep‑RPA‑R2、DuCV‑Rep‑RPA‑F1/DuCV‑Rep‑RPA‑R3、DuCV‑Rep‑RPA‑F2/DuCV‑Rep‑RPA‑R4这3对引物对中的任意一对，引物以及crRNA对应的核苷酸序列如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3‑7所示；本发明提供引物对与crRNA组合的RPA‑CRISPR/Cas12a检测体系，其具有极高的特异性及灵敏度，可以实现DuCV高特异性、高灵敏度和可视化检测。

技术研发人员：梁齐章,黄瑜,傅光华,刘荣昌,傅秋玲,程龙飞,陈红梅,江南松
受保护的技术使用者：福建省农业科学院畜牧兽医研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/9/2