气泡去除方法以及气泡去除装置的制造方法
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及液体中的气泡的去除方法，特别是涉及在由软包装材料构成的容器中封入含有气泡的液体时用于从该容器的一部分区域去除气泡的气泡去除方法、以及气泡去除装置。
【背景技术】
[0002]近年来，在药品生产、基因治疗、再生医学、免疫疗法等领域中，要求在人工环境下高效地大量培养细胞、组织、微生物等。
[0003]在这样的情况下，使用透气性的培养袋，在封闭系统中自动地大量培养细胞。
[0004]在长期培养细胞时，要求每隔恒定时间自动拍摄培养袋内的细胞，定期观察所培养的细胞的数量及其状态，此时，始终获得稳定的拍摄图像是必不可少的。
[0005]然而，由于培养袋内的培养液像肥皂水那样会起泡，因此在拍摄细胞的情况下，存在照入气泡，无法适当进行计数、观察的问题。
[0006]认为在培养袋内产生气泡的原因主要有两方面。其中之一是因为在培养袋中封入有预先溶解了氧气和二氧化碳的培养液。因此，当使用前冷藏保管的培养液在使用时变热，溶解的这些气体有时作为气泡而产生。另一个原因在于，形成培养袋的薄膜能够供氧气和二氧化碳透过。因此，当出于使培养液变得均匀等目的而想要摇晃培养袋等，由此搅拌培养袋内的培养液时，由于从外部透过薄膜进入培养袋内的气体而使培养液起泡，产生气泡。
[0007]因此，若不将以上述方式产生的气泡赶出观察范围，则在拍摄容器内时会拍摄到气泡，无法获得稳定的图像，存在观察失败的情况。
[0008]图12以及图13示出存在这类问题的以往的培养袋观察装置的结构、以及使用该培养袋观察装置进行细胞的观察的情况。
[0009]如图12所示，在以往的培养袋观察装置中，封入有包含气泡I’的培养液2’的培养容器3’载置在装载台4’上。并且，通过照明9’照亮培养容器3’的观察范围，通过拍摄机构8’来拍摄容器内的细胞的照片。
[0010]如上所述，由于在培养液中预先溶有氧气、二氧化碳，因此如图13(a)所示，有时它们作为气泡而产生。这样的气泡大多比较小。然而，在通过具备显微镜与照相机的拍摄机构8’来拍摄细胞的放大照片的情况下，即便是小气泡也将其拍摄得较大，其影响较大。因此，在产生小气泡的情况下，也无法适当地进行细胞的观察。
[0011]另外，在细胞培养中，搅拌培养袋内的培养液，当进行这样的搅拌时，如图13(b)所示，透过形成培养袋的薄膜而进来的气体因搅拌而起泡，在容器内产生气泡。这样的气泡大多比较大并凝聚。在这样的状态下，即便利用拍摄机构8’自动地拍摄细胞，也几乎无法进行细胞的观察。
[0012]这里，作为从液体中去除气泡的方法，例如像专利文献I所记载的那样，具有通过在容器内的液体的流路设置压力差来控制液体内的气泡的移动并去除该气泡的方法。另夕卜，如专利文献2、3所记载的那样，具有通过施加超声波振动来去除液体中的气泡的方法。此外，专利文献4公开了通过控制流路控制制动器而向细胞培养室供给添加的培养液，由此赶出气泡的方法。
[0013]专利文献1:TO2007/077607 号
[0014]专利文献2:日本特开2004 - 198356号
[0015]专利文献3:日本特开2009 — 31173号
[0016]专利文献4:日本特表平11 一 507229号
[0017]发明要解决的课题
[0018]然而，专利文献I所记载的方法因一边使液体流动一边去除气泡而不适于使用培养袋的细胞培养，在该方法中，无法适当地进行培养袋内的细胞的观察。另外，在如专利文献2、3所记载的那样使用超声波的情况下，担心对细胞造成不良影响。此外，当像专利文献4所记载的那样利用添加的培养液来去除气泡时，由于同时也将细胞从观察范围去除，因此无法应用于细胞的观察。
[0019]作为从液体去除气泡的方法，除此之外还考虑在已产生气泡的状态下相对地降低温度、升高压力、升高湿度的方法。另外，也考虑使用消泡剂。
[0020]然而，在使用培养袋的细胞培养中，在去除培养袋内的气泡的情况下，降低温度会使细胞增殖效率降低，因此是不优选的。另外，升高压力的方法在培养开始时等的、使用比较小的培养袋的情况下优选，但是在使用大培养袋的情况下，因装置大型化而不优选。此夕卜，在升高湿度的方法中，由于比较难以产生小气泡，还能够减少从培养袋的外部透过的气体的量，因此，也能够减少因搅拌培养液而产生的大气泡，但是存在容易发霉等卫生方面的问题。另外，由于消泡剂可能对细胞的生存、增殖造成负面影响，因此不适合添加于培养液。
【发明内容】
[0021]因此，本发明的发明人深入研宄，通过使用按压构件从上方压入容器的上表面的一部分并使按压构件移动，由此成功将气泡挤出到观察范围外，从而完成了本发明。根据这样的方法，能够在不损害细胞的前提下从观察范围自动去除气泡，在自动拍摄培养袋内的细胞的情况下，能够稳定地获得未拍摄到气泡的图像。另外，这样的方法不仅能够应用于细胞培养，在从由封入有液体的软包装材料构成的容器的一部分区域去除气泡的情况下，也能够广泛应用。
[0022]S卩，本发明的目的在于提供气泡去除方法以及气泡去除装置，在该气泡去除方法以及气泡去除装置中，在观察由封入有混杂气泡的液体的软包装材料构成的容器内部时，从观察范围去除气泡。
[0023]用于解决课题的手段
[0024]为了实现所述目的，在本发明的气泡去除方法中，在观察由封入有混杂气泡的液体的软包装材料构成的容器内部时，以容器内的一部分作为观察范围，从观察范围去除气泡，其中，利用按压构件从上方压入位于观察范围的上方的容器上表面的一部分，使按压构件移动，由此将气泡挤出到观察范围外。
[0025]另外，本发明的气泡去除装置在观察由封入有混杂气泡的液体的软包装材料构成的容器内部时，从容器内的一部分观察范围去除气泡，该气泡去除装置具备:装载台，其具备由透明构件或者孔构成的观察区域，供容器载置，并将观察区域的上方的容器内的一部分规定为观察范围；按压构件，其从上方按压位于观察范围的上方的容器上表面的一部分；以及驱动装置，其使按压构件移动，驱动装置使按压构件移动，将气泡挤出到观察范围外。
[0026]发明效果
[0027]根据本发明，在观察由封入有混杂气泡的液体的软包装材料构成的容器内部时，能够从观察范围去除气泡。
[0028]另外，在使用培养袋进行细胞培养的情况下，能够在不损害细胞的前提下从观察范围自动去除气泡，能够自动拍摄培养袋内的细胞，能够稳定地获得未拍摄到气泡的图像。
【附图说明】
[0029]图1是示出本发明的气泡去除方法的概要的图。
[0030]图2是示出本发明的气泡去除装置的第一实施方式的图。
[0031]图3是示出本发明的气泡去除方法的方法I的工序的图。
[0032]图4是示出本发明的气泡去除装置的第二实施方式的图。
[0033]图5是示出本发明的气泡去除方法的方法2的工序的图。
[0034]图6是示出本发明的气泡去除方法的方法2’的工序的图。
[0035]图7是示出本发明的气泡去除装置的第四实施方式的图。
[0036]图8是示出本发明的气泡去除方法的方法3的工序的图。
[0037]图9是示出本发明的气泡去除装置的第五实施方式的图。
[0038]图10是示出本发明的气泡去除装置的第六实施方式的图。
[0039]图11是示出基于本发明的实施例的结果的照片图。
[0040]图12是示出以往的培养袋观察装置的图。
[0041]图13是示出使用以往的培养袋观察装置进行的细胞观察的情况的图。
【具体实施方式】
[0042]以下，对本发明的实施方式进行具体说明。
[0043]首先，参照图1对本发明的气泡去除方法的概要进行说明。
[0044]本发明的气泡去除方法是在观察由封入有混杂气泡的液体的软包装材料构成的容器内部时，以容器内的一部分作为观察范围而从观察范围去除气泡的方法，其特征在于，利用按压构件从上方压入位于观察范围的上方的容器上表面的一部分并使按压构件移动，由此将气泡挤出到观察范围外。
[0045]具体而言，有以下三个方法，也能够组合这些方法。
[0046](方法1:水平挤出法)
[0047]在方法I中，将棒状按压构件6 — I设为水平而对容器的上表面进行抵压，并在水平方向上移动，使该棒状按压构件6 — I通过观察孔5的上方、即容器3内的位于观察范围的上方的容器上表面的一部分，由此将气泡挤出到观察范围外。
[0048](方法2:倾斜挤出法)
[0049]在方法2中，使用板状按压构件6 — 2，以相对于观察孔5的上方、即容器3内的位于观察范围的上方的容器上表面的一部分具有角度的方式进行按压，使板状按压构件6 -2旋转移动至相对于容器的上表面成为水平，将气泡挤出到观察范围外。
[0050](方法2’:倾斜挤压摆动法)
[0051 ] 在方法2’中，使用板状按压构件6 — 2，以相对于观察孔5的上方、即容器3内的位于观察范围的上方的容器上表面的一部分具有角度的方式进行按压，使板状按压构件6 -2在具有该角度的位置与相对于容器的上表面成为水平的位置之间摆动，由此将气泡挤出到观察范围外。
[0052](方法3:上下反复移动法)
[0053]在方法3中，将板状按压构件6 — 3设为水平进行使用，按压观察孔5的上方、即容器3内的位于观察范围的上方的容器上表面的一部分，并使板状按压构件6 - 3沿上下方向反复移动，由此将气泡挤出到观察范围外。
[0054]如上所述，在溶于培养液的气体作为气泡而产生的情况下，大多产生小气泡。另夕卜，在从外部透过薄膜进入培养袋内的气体在搅拌培养液时起泡而产生气泡的情况下，大多产生比较大的气泡。需要说明的是，在本说明书中，小气泡是指直径为约0.1mm以下的大小的气泡，大气泡是