一种植物乳杆菌液体培养基及植物乳杆菌的发酵培养方法

文档序号:8454039阅读:3315来源:国知局
一种植物乳杆菌液体培养基及植物乳杆菌的发酵培养方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及乳酸菌培养技术领域,尤其设及的是一种植物乳杆菌液体培养基植物 乳杆菌的发酵培养方法。
【背景技术】
[0002] 植物乳杆菌可W产生有机酸、细菌素、过氧化氨、双己酷等多种天然抑菌物质,因 此应用于生物饲料中既可W产更多的益生菌活菌数,又可W产生天然的抑菌物质,起到饲 料防腐的同时,饲喂动物又能更好的维持肠道内菌群平衡,提高机体免疫抗病能力,促进动 物更加健康生长。由于在固态发酵基质中的水溶性碳氮源比较少,所W植物乳杆菌利用豆 稍、玉米粉效果不好,在固态发酵时要迅速增长繁殖也比较困难。
[0003] 采用乳酸菌专用MRS培养基进行生产,可W使乳酸菌生长迅速。但是,利用实验室 MRS培养基进行工业化大生产的成本也较昂贵,不适合饲用乳酸菌生产。
[0004] 国内外研究表明,植物乳杆菌培养基中利用葡萄糖或庶糖作碳源比较常见,薛德 林等利用葡萄糖、庶糖、庶糖蜜、玉米浆等原材料,发酵生产了高密度的酿酒酵母与嗜酸乳 杆菌的饲料用复合微生物制剂(CN103173371A,酿酒酵母与嗜酸乳杆菌的饲料用复合微生 物制剂的生产)。虽然菌数达到高数量级,但该工艺需要将酿酒酵母与嗜酸乳杆菌分开发酵 并离屯、浓缩再复配,工艺流程复杂,成本不低。
[0005] 国内利用果蔬类如菊芋汁、番茄汁替代葡萄糖作碳源的专利也较多,其中田洪涛 等利用菊芋汁、番茄汁培养保加利亚乳杆菌,效果不错,成本降低了 1600元(CN184435保加 利亚乳杆菌复合增菌培养基)。贾英民利用菊芋汁培养双歧杆菌,使双歧杆菌最高生长量达 10 9c化/mL(CN1584013, 一种双歧杆菌发酵用复合培养基及其制备方法)。韩瑶植物乳杆菌 ST-III接种于灭菌番茄汁中,植物乳杆菌ST-III在该培养基中的发酵增殖效果与实验室常 用的MRS培养基相当;但发酵获得相同剂量ST-III活菌花费的成本比MRS培养基降低80% (CN102732470A,一种纯天然、低成本的植物乳杆菌ST-III培养方法及其产品和应用)。利用 果蔬类原材料做发酵培养基虽然成本有明显降低,但由于菊芋与番茄是人畜共用果蔬,作 为饲料添加大量使用将会带来对人类供应的紧张,价格不易控制。
[0006] 因此,现有技术还有待于改进和发展。

【发明内容】

[0007] 本发明的目的在于提供一种植物乳杆菌液体培养基及植物乳杆菌的发酵培养方 法,配方中采用糖蜜替代MRS葡萄糖,玉米浆替代牛肉膏,鱼溶浆替代酵母粉,无机氮源替 代蛋白腺,同时简化对植物乳杆菌生长影响因素不大的原料,W解决上述现有技术中植物 乳杆菌发酵培养存在的成本过高或培养工艺流程复杂的问题。
[000引本发明的技术方案如下:
[0009] 一种植物乳杆菌液体培养基,其中,其配方组成如下:
[0010] 糖蜜10-50g/l,玉米浆10-50g/l,鱼溶浆10-50g/l,磯酸氨二锭5-25g/l,己酸钢 2-8g/L,硫酸儀 0. 5-lg/L,硫酸铺 0. 1-0. 5g/L,吐温 1-3血/L;
[0011] 其中,培养基的抑值为6.0-6.8左右。
[0012] 所述的植物乳杆菌液体培养基,其中,其配方组成如下:
[0013] 糖蜜40g/l,玉米浆lOg/l,鱼溶浆15g/l,磯酸氨二锭5g/l,己酸钢5g/l,硫酸儀 0. 58g/L,硫酸铺 0. 25g/L,吐温 1 血/L。
[0014] 所述的植物乳杆菌液体培养基,其中,所述鱼溶浆用鱼粉替代。
[0015] 所述的植物乳杆菌液体培养基,其中,所述玉米浆用大豆提取液替代。
[0016] 一种植物乳杆菌的发酵培养方法,其中,包括W下步骤:
[0017] W植物乳杆菌为发酵菌株,接入MRS液体培养基中活化处理;将活化后的植物乳 杆菌,接入如权利要求1~5任一所述的植物乳杆菌液体培养基中,接种量为4%~10%, 进行发酵培养18~24小时;
[0018] 其中,发酵培养的条件为在30~35°C下厌氧静置培养。
[0019] 所述的植物乳杆菌的发酵培养方法,其中,所述活化处理的过程为在MRS液体培 养基中30°C培养24小时。
[0020] 本发明所提供的植物乳杆菌液体培养基,W糖蜜、玉米浆、鱼溶浆、磯酸氨二锭等 为原料,糖蜜替代MRS葡萄糖,玉米浆替代牛肉膏,鱼溶浆替代酵母粉,无机氮源替代蛋白 腺。采用低成本的农业副产品部分或全部替代MRS培养基中的葡萄糖和有机氮源,同时优 化培养基组合,不仅提高了植物乳杆菌的菌体数量和有机酸含量,同时明显降低了生产成 本。
【附图说明】
[0021] 图1为本发明实施例1中实验组和对照组的生长曲线图。
【具体实施方式】
[0022] 为使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚、明确,W下通过详细描述W及举实 施例对本发明进一步详细说明。
[0023] 本发明提供一种植物乳杆菌液体培养基,W糖蜜、玉米浆、鱼溶浆、磯酸氨二锭等 为原料,糖蜜替代MRS葡萄糖,玉米浆替代牛肉膏,鱼溶浆替代酵母粉,无机氮源替代蛋白 腺。糖蜜为制糖副产物,含有大量的可发酵糖(主要是庶糖),因此是很好的发酵原料。玉米 浆是制玉米淀粉的副产物,含有丰富的可溶性蛋白、生长素和一些前体物质,是微生物生长 很普遍应用的有机氮源。鱼溶浆主要成分为游离氨基酸、低分子肤、核酸和水溶性维生素及 微量元素,不仅补充原MRS培养基生长因子不足的缺点,还可替代蛋白腺、牛肉膏、酵母膏, 降低成本,而且具有很强的诱食性,为后期生产固态生物饲料提供良好的原材料。所述植物 乳杆菌液体培养基既作为种子培养基配方,也作为发酵培养基配方,在使用前需要采用MRS 液体培养基进行活化。
[0024] 具体地,所述植物乳杆菌液体培养基,其配方组成如下:
[0025] 糖蜜10-50g/l,玉米浆10-50g/l,鱼溶浆10-50g/l,磯酸氨二锭5-25g/l,己酸钢 2-8g/L,硫酸儀 0. 5-lg/L,硫酸铺 0. 1-0. 5g/L,吐温 801-3血/L。
[0026] 其中,培养基的抑值为6. 0-6. 8左右。鱼溶浆可W采用鱼粉替代;玉米浆可W采 用大豆提取液替代。
[0027] 进一步地,本发明中还提供最佳实施方案,所述植物乳杆菌液体培养基,其配方组 成如下:
[002引糖蜜40g/l,玉米浆lOg/l,鱼溶浆15g/l,磯酸氨二锭5g/l,己酸钢5g/l,硫酸儀 0. 58g/L,硫酸铺 0. 25g/L,吐温 801 血/L。
[0029] 本发明中还提供一种植物乳杆菌的发酵培养方法,采用本发明植物乳杆菌液体培 养基对植物乳杆菌进行发酵培养,其步骤如下:
[0030] W植物乳杆菌为发酵菌株,取斜面菌种一环,接入MRS液体培养基中进行活化处 理,将活化后的植物乳杆菌,接入本发明液体培养基中,接种量为4 %~10 %,进行发酵培 养18~2化。其中,发酵培养的条件为:在30~35°C下厌氧静置培养。
[0031] 本发明通过改变优化种子培养基,驯化培养植物乳杆菌,使植物乳杆菌既能提前 适应后期发酵的环境,又能快速生长,使植物乳杆菌活菌数在生物饲
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