一种毛叶鹰爪花总生物碱提取物及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于天然药物领域，设及一种总生物碱提取物及其应用，具体是一种毛叶 鹰爪花总生物碱提取物及其在抗肿瘤药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 番慕枝科（Annonaceae)鹰爪花属（Art油otrys)植物通常为攀援灌木植物，全世 界约有100种，分布于热带和亚热带地区，我国有4种，即毛叶鹰爪花（A.pilosusMerr.et Qum)、狭瓣鹰爪花（A.hainanensis化E.Rries)、香港鹰爪花（A.hon址ongensisHance)和 鹰爪花（A.hexapetalus(L.f.)化andari)，分布于西南部至东南部，其中毛叶鹰爪花和狭瓣 鹰爪花为海南特有植物[中国科学院中国植物志编委会.中国植物志.第30卷.科学出版 社.北京：1979,P121-128.]。鹰爪花属植物在民间作为药用植物已有很长历史，具有清热 解毒，消炎止痛的作用，常用于治疗追疾和头颈部淋己结核等疾病。现代药理学研究表明， 该属植物具有广泛的生物活性，如抗肿瘤、抗菌、抗追W及杀虫等活性[顾关云；蒋畳.番慕 枝科植物细胞毒成分的研究概况III.国外医药（植物药分册），1995, 10:153-156.;Radloff P.D,PhilippsJ,NkeyiM,etal.Arteflenecomparedwithmefloquinefortreating Plasmodiumfalciparummalariainchildren.AmericanJournalofTropicalMedicine andHygiene, 1996, 55:259-262.间nghD.K,BashaS.A,Sarma,B.K,etal.Antifungal activityofaphytoterpenoid(A0S_A)isolatedfromArtabotrytisodoratissimus onsporegerminationofsomefungi.Mycobiology, 2006, 34:120-123.；Srivastava B,SinghP,SrivastavaA.K,etal.EfficacyofArtabotrysodoratissimusoilasa plantbasedantimicrobialagainststoragefungiandaflatoxinBlsecretion. InternationalJournalofFoodScienceandTechnology,2009, 44:1909-1915.； TattersfieldF,PotterC.Theinsecticidalpropertiesofcertainspecies ofAnnonaandofanIndianstrainofMunduleasericea.AnnalsofApplied Biology, 1940, 27:262-273.]。正因为如此，多年来，该属植物备受植物化学界和药理 学界的青睐，截至目前已从该属多种植物中分离鉴定了大量类型极其丰富并具有广泛 生物活性的化合物，如生物碱类化合物口houQ，化Y.H.;LiX.B，etal.Bioactive benzylisoquinclinealkaloidsfromArtabotryshexapetalus.Phytochemistry Lett. 2015, 11:296-300.；SichaemJ,RuksilpT,WorawalaiW,etal.Anewdimeric aporphinefromtherootsofArtabotrysspinosus.Fitoterapia2011，82:422-425.]、 聰类化合物[加ptaC,PrasadS,SahaiM,etal.ArtabotiyolsA-E,NewLanostane TriterpenesfromtheSeedsofArtabotrysodoratissimus.Helv.Chim. Act. 2010,93:1925-1932.;ZhangL,ZhouW.S,XuX.X.etal.Anewsesquitei'pene peroxide(yingzhaosuC)andsesquiterpenol(yingzhaosuD)fromArtabotrys uncia化s(L)Meer.J.Qiem.Soc.，Qiem.Commun. 1988, 8:523-524.]、下内醋类化合物[Wong 比F,Brown,G.D.目-Methoxy-y-methylene-a，目-unsaturated-y-butyrolactones fromArt油ot;ryshexapetalus.Phytochemistry2002, 59:99-104. ]W及黄酬类化合物[LiT.M,LiW.K,YuJ.G.FlavonoidsfromArtabotryshexapetalus.Phytochemistry 1997,45:831-833.间nghA.P,SahaiM.Isolationofflavonolglycosidesfromthe leavesofArt油ot;rysodoratissmus.Plantamed. 1996, 62:192-194.]等多种类型化合 物。
[0003] 毛叶鹰爪花（(A.pilosus)为番慕枝科鹰爪花属攀援植物，常生于低海拔至中海 拔的山地林中，为我国特有植物，仅分布于海南岛。前期初步研究发现，毛叶鹰爪花的己醇 提取物具有很好的抗阳V活性田eJ.J,ParkI.W,QienG.Y.etal.Extractsofmedicinal plantandusesthereof.PCTInt.Appl. 2011,WO2011014561A120110203.]，除此之外，目 前国内外均未见有关毛叶鹰爪花中化学成分及其生物活性的研究报道。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是针对现有技术的不足而提供一种毛叶鹰爪花总生物碱提取物及 其应用，利用简单的提取分离方法对毛叶鹰爪花枝叶总生物碱进行制备，完成抗肿瘤活性 测试，经多次反相硅胶柱层析，阐明其化学成分。
[0005] 本发明所采用的技术方案：
[0006] 一种毛叶鹰爪花总生物碱提取物，其提取步骤如下：
[0007] 1、取毛叶鹰爪花枝叶的干燥粉末，用酸水冷浸提取后，合并酸水提取液，经过滤后 进行碱化，加入有机溶剂进行萃取；所述酸水为0. 5~2%的醋酸、盐酸、硫酸或酒石酸；所 述碱水为饱和的NasCOs溶液或20%的氨水；所述有机溶剂为己酸己醋、氯仿或二氯甲烧；
[0008] 2、将毛叶鹰爪花枝叶的酸水提取液经过滤、碱化后用己酸己醋萃取，减压回收得 到己酸己醋萃取部位，即总生物碱提取物；
[0009] 3、总生物碱提取物经反复反相柱层析，得到12个生物碱类化合物，其中4个为阿 朴菲类生物碱、2个为苄基异嗟咐类生物碱、2个为原阿朴菲类生物碱、2个吗啡烧类生物 碱、2个原小窠碱类生物碱。
[0010] 上述方法中，所述毛叶鹰爪花枝叶的干燥粉末是将毛叶鹰爪花枝叶经阴干后粉碎 得到。
[0011] 上述方法中，所述提取方法包括室温浸泡或超声提取。
[0012] 上述方法中，毛叶鹰爪花枝叶的干燥粉末与酸水的体积比为1 ;1~1:3。
[0013] 上述方法中，柱层析用填料为反相硅胶和葡聚糖凝胶。
[0014] 上述方法中，12个生物碱类化合物，包括4个为阿朴菲类生物碱、2个为苄基异嗟 咐类生物碱、2个为原阿朴菲类生物碱、2个吗啡烧类生物碱和2个原小窠碱类生物碱，分别 为Norisocorydine(1),Isocorydine(2),Lanuginosine(3),Atherospermidine(4),Reticu line(5),Laudanidine(6),Glaziovina(7),Pronuciferine(8),Pallidine(9)Salutaridin e(10), (-)-lO-demethyldiscretine(ll)和（-)-l