Pedf衍生的多肽在预防和/或缓和皮肤老化中的用图
【专利说明】PEDF衍生的多肽在预防和/或缓和皮肤老化中的用途
[0001] 发明背景 1、发明领域
[0002] 本公开涉及预防和/或缓和皮肤老化。具体而言，所公开的发明涉及使用PEDF衍 生的合成肽来预防和/或缓和皮肤老化。
[0003] 2、相关技术的描述
[0004] 人类皮肤和其它活体组织一样，会随着时间而老化。皮肤老化导致皱纹与细纹形 成、皮肤变薄、皮肤脱色或色素沉着过多，并且失去紧致与弹性。可根据皮肤老化的成因，将 其分为内因性老化与外因性老化。内因性老化又称为自然老化，此一过程会影响几乎所有 内部器官，主要受到个体遗传组成的调控。外因性老化则是暴露于多种环境因子、尤其是紫 外线（UV)辐射所导致的老化，，故此一过程又称为光老化。暴露于阳光的部分，譬如脸部、 颈部、手背等，会受到内因性老化与光老化的双重影响，因此在这些部分老化的痕迹也特别 明显。
[0005] 胶原蛋白是构成结缔组织的主要成分，其外观呈纤维状，属于细胞外的不可溶蛋 白质。在各种胶原蛋白中，I型与III型胶原蛋白最为重要。I型胶原蛋白是人类皮肤最 主要的结构蛋白质，占皮肤干重中90%以上的重量；而III型胶原蛋白广泛分布于身体各 部位，在胚胎组织内的含量较为丰富。随着皮肤老化，皮肤中总体胶原蛋白的含量减少，且 I型胶原蛋白与III型胶原蛋白的比例也会下降；再者，细胞外基质（ECM)也会变得较不规 贝1J。举例来说，内因性老化与紫外线B(UVB)暴露会削弱胶原蛋白纤维（尤其是I型胶原蛋 白纤维）的更新。此外，UVB暴露会提高多种降解胶原蛋白的酶的生产，这些酶已知被称为 基质金属蛋白酶（MMP)。在UVB暴露后数小时内，即可诱导人体产生基质金属蛋白酶（特别 是胶原酶与明胶酶）。以上现象都可能导致皮肤细胞外基质组成的改变。
[0006]目前已有多种可对抗皮肤老化的处置方式。举例来说，由于胶原蛋白的在老化中 的重要性，已开发出多种含有胶原蛋白的局部给药产品。许多美妆保养产品也采用了据称 可刺激胶原蛋白合成的成分，如视黄酸、维他命C与透明质酸等。另外还有一些美容手术 (如激光换肤），亦可有效减少脸部皱纹与皮肤不平整。
[0007] 虽然已有许多减少老化痕迹或刺激皮肤再生的解决方案，但现有的方法都无法启 动皮肤的内生修补机制（即，胶原蛋白合成）。因此，本领域亟需一种能够有效治疗皮肤老 化（尤其是光老化）的措施。
【发明内容】
[0008] 下文提供本公开的简化摘要，以使阅读者对本揭示内容具备基本的理解。此发明 内容并非本公开的完整概述，且其未指出本发明的重要/关键组件或界定本发明的范围。 本部分内容的目的仅是以简化形式阐明一些概念，更详细的内容将在后文予以呈现。
[0009] 本发明至少部分是基于发现色素上皮衍生因子（PEDF)衍生的合成肽能够刺激胶 原蛋白生成、促进皮肤成纤维细胞增殖，以及降低UVB引发的MMP-1表达；因此这些肽能够 有效预防和/或缓和个体的皮肤老化。因此，本发明PEDF衍生的合成肽能够作为抗皮肤老 化的制剂或药物。
[0010] 有鉴于此，一方面，本发明涉及一种用于预防和/或缓和个体的皮肤老化的合成 肽。
[0011] 根据本公开多个实施例，所述的合成肽长度为20 - 39个氨基酸残基，且具有与 SEQIDNO: 1至少80%相同的氨基酸序列。此外，上述氨基酸序列包含的至少20个连续的 残基与SEQIDNO: 1的残基11-30至少90%相同，而使得此合成肽能用于预防和/或缓和 个体的皮肤老化。
[0012] 在本公开可任选的实施例中，上述合成肽中有至少四个连续的氨基酸与SEQID NO: 1的残基11-14相同。此种合成肽的非限制性例示包括具有SEQIDNO: 1(39-聚 体）、5￡〇10勵：2(34-聚体）、5￡〇10勵：3(29-聚体）、5￡〇10勵：5(24-聚体）、5￡〇10 勵:6(2〇-聚体）、5￡〇1〇勵:8 0\?)29-聚体）与5￡〇1〇勵:9(]\?)2〇-聚体）所示的氨基酸 序列的合成肽。根据本公开某些实施例，上述合成肽的氨基酸序列为SEQIDN0:3(29-聚 体）、SEQIDNO: 5 (24-聚体）或SEQIDNO: 6 (20-聚体）。
[0013] 依据本公开多种实施例，所述的皮肤老化是由紫外线辐射所致。
[0014] 根据本公开多种实施例，所述的个体可以是任何归类为哺乳动物的动物，包括人 类。
[0015] 另一方面，本公开涉及一种用以预防和/或缓和个体皮肤老化的药物组合物。所 述的个体可以是任何哺乳动物，包括人类。
[0016] 根据本公开一实施方式，上述药物组合物包含任一根据本发明上述方面/实施例 的合成肽，且此合成肽以足以治疗该个体的皮肤老化的有效量存在。此药物组合物亦包含 可用以携带该合成肽的药学上可接受的赋形剂。
[0017] 在某些任选实施例中，该药物组合物还含有至少一种用于促进本发明合成肽或药 物组合物流动（flux)的穿透增强剂。
[0018] 依据本公开多种实施例，所述的药物组合物可以是以下任一种剂型：溶液、喷剂、 气雾剂、泡沫、面霜、洗剂、软膏、凝胶或敷料。
[0019] 又一方面，本发明涉及一种用以预防和/或缓和个体皮肤老化的方法。所述的个 体可以是任何哺乳类动物，包括人类。
[0020] 于一实施例中，上述方法包含对该个体给予有效量的根据本发明上述方面/实施 例的合成肽，以使得此合成肽经皮递送至该个体的真皮。
[0021] 于可任选的实施例中，可将合成肽调制为根据上述方面/实施例所述的药物组合 物。于一实施例中，可将此药物组合物局部给予个体的皮肤上。在可任选的实施例中，此方 法还包含于上述局部给予该药物组合物之前、同时或之后，对该个体的皮肤施加外来刺激 (如，机械、电、热、超声波或无线射频刺激），藉以促进所述合成肽或药物组合物的经皮递 送。同样可任选地，此药物组合物还可包含至少一种穿透促进剂，以促进此合成肽或组合物 的流动。
[0022] 依据本发明多种实施例，所述的皮肤老化是由紫外线辐射所致。
[0023] 在参阅下文详细描述，并结合附图后，本公开许多附带的特征和优点将更易于理 解。
[0024] 附图简要说明
[0025] 本专利或申请文件包含至少一幅彩图。在提出请求并缴纳所需费用后，专利局将 提供带有彩图的此专利或专利申请出版物的副本。
[0026] 结合附图及下文详述，本说明书将更易于理解。
[0027] 图1显示本公开一实施例中皮肤样本的经H&E染色的切片照片（左图）以及荧光 照片（中间、右图）；
[0028] 图2显示本公开另一实施例中经麦森（Masson)三色染色以突出胶原蛋白纤维的 皮肤组织切片的代表性照片；
[0029] 图3为原代皮肤成纤维细胞免疫染色（波形蛋白：绿色；BrdU:红色）的代表性照 片以及与Hoechst33258(细胞核：蓝色）染色样本的合并照片；
[0030] 图4的代表性照片呈现各实验条件下小鼠的皱纹形成；以及
[0031] 图5显示本公开又一实施例中经麦森三色染色以突出胶原蛋白纤维的皮肤组织 切片的代表性照片。
[0032] 详述
[0033] 下文结合附图详细描述的内容仅仅是对本实施例的描述，并非是实施或运用本发 明具体实施例的唯一形式。此部分公开了实施例的功能以及用于建构与操作这些具体实施 例的步骤的顺序。然而，亦可利用其它具体实施例来达成相同或等同的功能与顺序。
[0034] 出于方便，本申请（包括说明书、实施例和权利要求书）所用的某些术语汇集于 此。除非本说明书另有定义，本公开所用的科学与技术词汇的含义与本发明所属技术领域 中具有通常知识者所理解与惯用的意义相同。此外，除非另有说明，应理解的是，所用的单 数名词涵盖该名词的复数型；而所用的复数名词时亦涵盖该名词的单数型。具体而言，如本 文及权利要求书所用，除非另有说明，单数形式"一"包括其复数形式。
[0035] 虽然用以界定本发明较广范围的数值范围与参数界是约略的数值，具体实施例的 相关数值已尽可能精确地呈现。然而，任何数值本质上不可避免地含有因个别测试方法所 致的标准偏差而导致的误差。同时，本文中，"约"通常指实际数值在一给定数值或范围的正 负10%、5%、1%或0.5%之内。或者是，"约"代表实际数值落在平均值的可接受标准误差 之内，视本发明所属技术领域中具有通常知识者的考虑而定。除了实施例之外，或除非另有 明确的说明，当可理解本文所用的所有数值范围、数量、数值与百分比（例如用以描述材料 用量、时间长短、温度、操作条件、数量比例等）均经过"约"的修饰。因此，除非另有相反的 说明，本公开与权利要求书所涉及的数值参数皆为约略的数值，且可视需求而更改。至少应 将这些数值参数理解为所指出的有效位数与套用一般进位法所得到的数值。
[0036] 本文中，术语"肽"指氨基酸残基的多聚物。本文中，术语"合成肽"指未包含存在 于自然界的完整蛋白质分子的肽。此种肽是"合成的"，因为其由人类利用技术手段所得，譬 如化学合成、重组遗传技术或将整个蛋白切段等。于本公开中，任何指定氨基酸残基于一肽 中的位置系由该肽的N端起算。
[0037] 本文所用"增殖"指族群中的细胞数目通过细胞分裂而增加。
[0038] 本文针对合成多肽序列所述的"氨基酸序列相同性百分比（％ )"系指该候选合 成肽的氨基酸残基与参考多肽的氨基酸残基完全相同的百分比。进行上述比对时，可将该 候选合成肽与该参考多肽并排，并于必要时引入间隙（gap)，以使两条序列形成最高的序列 相同性，且在计算相同性时，并未将保守性取代的氨基酸残基纳入考虑。可采用本领域已 有的多种方法进行上述比对，以确定序列相同性百分比，譬如可使用可公开取得的软件如 BLAST、BLAST-2、ALIGN或Megalign(DNASTAR)。本领域技术人员可确定比对时的适当参 数，包括需要在对比序列的整个长度上获得最大比对所需的各种算法。为了本文的目的，二 氨基酸序列间的序列比较是采用美国国家生物科技信息中心（NCBI)所提供的计算机程序 Blastp(蛋白质-蛋白质BLAST)来进行。给定氨基酸序列A相较于给定氨基酸序列B的 氨基酸序列相同性百分比（亦称为给定氨基酸序列A与给定氨基酸序列B具有特定百分比 (% )的氨基酸序列相同性）的计算方式如下：
[0039]
[0040] 其中X是利用比对程序BLAST对A和B进行比对后所得到的计为完全匹配的氨基 酸残基的数量，而Y是A或B中较短者的氨基酸残基总数。
[0041]本文所用"治疗"指将本公开合成肽或药物组合物给予或施用于一个体，此个体具 有皮肤老化的征兆或易于发生皮肤老化，以期能部分地或完全地缓和、改善、减轻皮肤老化 的一或多种征兆或特征，或延缓其发生、抑制其进展、减轻其严重性和/或减低其发生率。 [0042]本文所用术语"有效量"指一成分的用量足以产生所欲的反应。具体的有效量取 决于多种因素，诸如欲治疗的特定病症、患者的身体条件（如患者体重、年龄或性别）、接受 治疗的哺乳动物或动物的类型、治疗持续时间、共同施与的疗法（如果有的话）的本质以及 所用的具体配方。有效量亦指于此用量下，该化合物或组合物的毒