一种含咖啡酰基的鞣质衍生物及其制备工艺和应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于林业加工剩余物的次生代谢活性成分及其利用技术领域，具体涉及一 种新的含咖啡酰基的鞣质衍生物1，3-二-O-没食子酰基-6-0-咖啡酰基-β -D-吡喃葡萄 糖（l，3-di-〇-galloyl-6-〇-caffeoyl-0-D-glucoside)及其制备工艺和用途。
【背景技术】
[0002] 漾擤核桃（Juglans sigillata Doda)为胡桃科（Juglandanceae)胡桃属 (Juglans)落叶乔木，主要分布在我国西南部的云南、西藏、四川及贵州的山坡和山谷地区 (Wu&Raven，Flora of China，Vol. 4，Science Press，Beijing，1999, 283 ~284)。潇潯核 桃树树高可达30米以上，其果核表面褶皱明显，极不平滑，内褶壁发达，取仁较难。漾濞核 桃根深，主根发达。漾濞核桃喜光，耐湿热，不耐干冷（周成贵，林业科技开发，2004,18 (3)， 42~44)。漾濞核桃仁因膳食营养价值极高而一直备受推崇，其种子外壳一直被用作民间 药物治疗食道癌、胃癌、心脏癌和肺癌（Si et al，Chemistry ofNatural Compounds，2011， 47(3)，442~445)。最新研宄表明漾濞核桃种子外壳具有优异的酪氨酸酶抑制活性（Si CL，et al，Bioresources，2014,9 (2)，2226~2236)。到目前为止，对漾濞核桃树化学成分 的研宄主要集中在其核桃仁、核桃仁壳、果实青皮、树干皮等部位，而且从以上诸部位中提 取分离的化合物主要是水解单宁类、缩合单宁类、α -四氢萘酮类，然而对漾濞核桃树叶次 生代谢化学成分的研宄却甚少（Liu et al，Helvetica Chimica Acta，2010,93 (2)，265 ~ 271 ；Si et al, Chemistry ofNatural Compounds，2011，47(3)，442 ~445 ;Si et al， Biochemical Systematics andEcology，2011，39(3)，225 ~227)〇
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是提供一种具有抗氧化活性的含咖啡酰基的鞣质衍生物1， 3-二-0-没食子酰基-6-0-咖啡酰基-β -D-吡喃葡萄糖（英文名为1，3-di-0-galloyl-6 -〇-caffeoyl-β -D-glucoside)〇
[0004] 本发明的另一个目的是提供从胡桃科胡桃属中的漾濞核桃树树叶中制备1， 3-二-0-没食子酰基-6-0-咖啡酰基-β -D-吡喃葡萄糖的工艺。
[0005] 本发明的第三个目的是提供1，3-二-0-没食子酰基-6-0-咖啡酰基-β -D-吡喃 葡萄糖的抗氧化活性功效用途。
[0006] 本发明的技术方案概述如下：
[0007] 下述结构式的化合物：
[0008]
[0009] 从漾濞核桃树中制备I，3-二-O-没食子酰基-6-0-咖啡酰基-β -D-吡喃葡萄糖 的工艺，包括如下步骤：
[0010] (1)取粉碎的漾濞核桃树叶，按质量比为1 : 3~I : 10加入体积百分浓度为 40 %~95%的丙酮水溶液，常温提取或加热提取或微波辅助提取或超声波辅助提取1~6 次，每次1~96小时，过滤，滤液减压浓缩至原体积的1 %~10%，得粗提物；
[0011] ⑵加入粗提物质量1~5倍的水，搅拌，加入粗提物质量1~5倍的正己烷萃取 1~5次，分离出正己烷层，将正己烷层减压浓缩得正己烷萃取相；
[0012] (3)正己烷萃取相经硅胶柱层析和凝胶柱层析之至少一种制备得到1，3_二-0-没 食子酰基-6-0-咖啡酰基-β -D-吡喃葡萄糖。
[0013] 在上述1，3-二-0-没食子酰基-6-0-咖啡酰基-β -D-吡喃葡萄糖的制备工艺步 骤中，所述漾濞核桃树叶原料包括漾濞核桃树的新鲜叶、落叶、干叶中的一种或几种。
[0014] 1，3_二-0-没食子酰基-6-0-咖啡酰基-β -D-吡喃葡萄糖在制备抗氧化产品中 的应用。
[0015] 本实验证明本发明的化合物分子式为C29H26O 17，化学名为1，3-二-0-没食子酰 基-6-0-咖啡酰基-β -D-吡喃葡萄糖，即 l，3-di-〇-galloyl-6-〇-caffeoyl-0 -D-glucos ide。该化合物为淡黄色，其熔点为193~195°C，旋光度为Mgi +l〇.5°(c，0.5, MeOH)。其 淠（人_腦，]^0!1):245、300、332;11?(1?1')￥_￡〇^ 13395、1676、1612;正性卩六8-]^111/2[]\1+!1] +为 647，而 m/z [M+Na] + 为 669。
[0016] 本发明的制备工艺具有操作方法简单规范、得率高、制备成本低等特点。
[0017] 实验证实1，3-二-0-没食子酰基-6-0-咖啡酰基-β -D-吡喃葡萄糖对DPPH自 由基有优异的清除效果（IC5tl值为6. 28 μ Μ)，其清除能力强于正对比组中的人工合成抗氧 化剂BHT (IC5tl值为6. 86 μ Μ)和天然抗氧化剂a -tocopherol (IC 5。值为6. 70 μ Μ)。这表明 本发明制备的1，3-二-0-没食子酰基-6-0-咖啡酰基-β -D-吡喃葡萄糖的抗氧化活性显 著，可作为抗氧化剂应用于保健品、药品、食品以及化妆品等行业。
【具体实施方式】
[0018] 参考下列实施例将更全面、更容易地理解本发明，给出实施例是为了更清楚地阐 明本发明，而不是以任何方式限制本发明。
[0019] 实施例1 :
[0020] 1，3-二-ο-没食子酰基-6-0-咖啡酰基-β -D-吡喃葡萄糖的制备
[0021] (1)取粉碎的漾濞核桃树叶，按质量比为1 : 4加入体积百分浓度为60%的丙酮 水溶液，常温提取3次，每次72小时，过滤，滤液减压浓缩至原体积的4%，得粗提物；
[0022] (2)加入粗提物质量3倍的水，搅拌，加入粗提物质量2倍的正己烷萃取4次，分离 出正己烷层，将正己烷层减压浓缩得正己烷萃取相；
[0023] (3)正己烷萃取相经硅胶柱层析制备得到1，3-二-0-没食子酰基-6-0-咖啡酰 基-β-D-吡喃葡萄糖。
[0024] 该化合物的结构鉴定：
[0025] 由正性快原子轰击质谱图谱（Positive FAB-MS)可知该化合物的m/z[M+Na]+为 669,而m/z [M+H]+为647,结合1H和13C NMR图谱得出其分子式为C29H26O17。以1 %的三氯 化铁乙醇溶液（质量百分比）喷雾显色反应时呈深绿色，表明该化合物分子中含有酚羟基 团（Imakura et al，Phytochemistry，1985, 24(1)，139 ~146)。1H NMR 谱图数据（表 1) 中，特征质子峰[S7.09(2H，s，H-2' &6' )、δ7· 12(2H，s，H-2" &6")]表明该