茶多酚的微波辅助酶法提取工艺的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于植物提取技术领域，具体涉及茶多酚的微波辅助酶法提取工艺。
【背景技术】
[0002] 茶多酚（Tea Polyphenols简称TP)，又名茶单宁，是茶叶中所含有的一类多羟基 酚类化合物的总称。茶多酚是一种新型的天然抗氧化剂，可有效杀菌和抑制细菌生长，还可 以清除活性氧自由基，抑制脂质过氧化，具有抗衰老特性。同时茶多酚具有解毒和抗辐射作 用，能有效地阻止放射性物质侵入骨髓，并可使锶90和钴60迅速排出体外，被健康及医学 界誉为"辐射克星"，已被列为天然食品添加剂。其在食品、医药、农业、日用化工等领域均有 较广泛的应用。
[0003] 目前茶多酚的浸提纯化方法主要有溶剂浸提法、金属离子沉淀法、树脂吸附法、超 临界萃取法等。常规的溶剂萃取法，将茶叶用极性溶剂浸渍，然后把浸取液进行液-液萃取 分离，最后浓缩得到产品。溶剂浸提法是目前工业化生产主要采用的方法，产品收率5 %~ 10%，产品纯度为80%~98%。所用溶剂有丙酮、乙醚、甲醇、己烷及三氯甲烷等。该法生 产成本高，且易造成污染，有机溶剂毒性大、成本高，在高温条件下提取茶多酚易氧化变质， 生物活性降低。金属离子沉淀法使用了对人体有害的重金属做沉淀剂，在后续的加工中金 属离子难以去除，不能满足食品、医药卫生等领域的要求。超临界萃取法制得的茶多酚纯度 高，品质好，但超临界萃取对设备要求较高，设备投资大。
[0004] 中国专利CN201210258868. 2公开了一种工业化生产高纯度茶多酚提取技术，该 发明从对新鲜的茶叶杀青、干燥获得有效茶多酚物质到运用微波提取茶多酚溶液，再以独 特的膜浓缩技术提取茶多酚的浓缩液，最后利用大孔树脂的吸附、解析特性和活性碳独特 功能除杂纯化，最大限度的获取高纯茶多酚。该方法降低提取工艺成本、无污染、能耗低、茶 多酚得率高。微波为一种电磁波，具有穿透性，可同时作用于物料内外的极性分子，使得产 品迅速升温。因此该发明可能会存在反应温度不易控制，导致产品中有效成分损失较大等 问题。
[0005] 中国专利CN201110167931.7公开了超声波辅助浸提鲜茶叶中茶多酚的工艺，该 发明采用的工艺为：称取定量鲜茶叶于容器中，加入一定量溶剂，浸置一定时间后，于微波 超声波耦合动态逆流浸提机中进行浸提操作。该发明利用溶剂进行茶多酚的浸提，产品存 在有机溶剂使用量大，溶剂残留等问题。
【发明内容】
[0006] 针对上述茶多酚提取过程中的问题，本发明旨在提供一种反应条件温和，提取效 率高，提取时间短，纯度高的茶多酚提取方法，为实现上述目的本发明所采用的技术方案如 下：
[0007] 茶多酚的微波辅助酶法提取工艺，包括以下步骤：
[0008] a)除杂清洗：选新鲜绿茶叶，除去木屑、树枝等杂质，用清水洗净茶叶表面尘土， 浙干表面水分，备用；
[0009] b)茶叶粉碎：取步骤a)中的茶叶用粉碎机粉碎至30-50目筛，备用；
[0010] c)调液加酶：按料液比1 : 13~18添加纯净水，混合均匀后调整茶水pH为4. 0~ 5. 5,搅拌均匀，按茶叶质量的0. 1 %~0. 4%添加复合酶液，搅拌均匀后，备用；其中，复合 酶为纤维素酶与果胶酶按酶活1:1混合而成；
[0011] d)真空微波处理：将步骤c)中的物质置于真空微波炉中，调整真空度 为-0. 090~-0. 080MPa，微波剂量为0. 01-0. 07kw / kg条件下，使得物料温度维持在 50-60°C之间，处理 25-39min ;
[0012] e)离心分离：将步骤d)中物料离心分离，滤渣重复步骤c)、d)后离心，将两次上 清液合并后备用；
[0013] f)树脂吸附：将合并后的滤液通过大孔树脂柱进行吸附；
[0014] g)二级洗脱：吸附树脂先用6-9 %浓度的HC1+8 %浓度的乙醇溶液洗脱，洗脱液流 速为6-71111/1^11，之后采用80%的乙醇溶液，控制流速为0.7-1.31111/1^11洗脱解析茶多 酚；
[0015] h)真空浓缩：将步骤g)中的洗脱液注入真空浓缩罐中，调整真空度 为-0. 090~-0. 080MPa，温度为45-60°C，浓缩至30° Β?(波美度）；
[0016] i)冷冻干燥：将步骤h)中浓缩后的茶多酚浓浆置于冷冻干燥箱中干燥，得茶多酚 干粉。
[0017] 具体的，所述的微波真空处理所采用的微波为脉冲微波，脉冲宽度为10-20S，脉冲 周期为13-25s。
[0018] 做为优选条件之一，所述的脉冲微波脉冲宽度为10s，脉冲周期为13s。
[0019] 做为优选条件之二，所述的脉冲微波脉冲宽度为20s，脉冲周期为25s。
[0020] 做为优选条件之三，所述的脉冲微波脉冲宽度为15s，脉冲周期为19s。
[0021] 本发明具有以下优势：
[0022] 效率高，时间短：本发明采用微波辅助酶法提取茶叶中的茶多酚，以新鲜茶叶为原 料，经除杂清洗、粉碎后，将复合酶加入到茶水中，采用真空微波处理料液，提高了茶多酚的 提取效率。采用果胶酶与纤维素酶组成的复合酶系做为反应酶，可充分分解细胞壁，促进茶 多酚的溶解。采用真空脉冲微波作用于反应物料，控制反应温度在50~60°C，保证反应酶 处于最适反应温度。在脉冲微波的作用下充分发挥微波的生物学效应，激发反应酶系的酶 活性，提高反应速度，缩短反应时间。
[0023] 活性高、纯度高：本发明浸提过程中严格控制反应温度为50~60°C，保证了酶活 性的同时，保证茶多酚不会因为温度的升高而丧失活性。同时整个反应体系处于真空环境 中，防止产品的氧化。产品的浓缩干燥过程均在真空环境中操作，保证产品在各个环节中均 具有较高的活性。采用树脂吸附法纯化茶多酚，两段式洗脱工序，先通过酸性洗脱液除去体 系中的咖啡碱类物质，之后通过乙醇溶液解析吸附剂中的茶多酚，提高了产品的纯度。因此 本发明生产的茶多酚产品纯度高，且具有较高的生物活性。
[0024] 绿色环保、天然无污染：本发明使用纯净水做为浸提剂，不使用有机溶剂、不使用 重金属，保证了产品的品质。利用脉冲微波技术辅助酶法提取，避免了传统茶多酚提取过程 中的浸提液反复浸提的繁琐，仅需两次浸提即可满足要求，降低了生产能耗，整个生产过程 更加低碳环保。采用脉冲微波充分发挥微波的生物学非热效应，激发反应酶系的活性，提高 了反应速率。茶多酚纯化过程中采用的洗脱剂为易脱除的乙醇溶液，真空浓缩后进行冷冻 干燥保证了产品的天然。
【具体实施方式】
[0025] 下面结合具体实施例，以新鲜绿茶为原料，对本发明做进一步说明，但本发明的保 护范围并不局限于此。
[0026] 实施例1
[0027] a)除杂清洗：选新鲜绿茶叶，除去木屑、树枝等杂质，用清水洗净茶叶表面尘土， 浙干表面水分，备用；
[0028] b)茶叶粉碎：取步骤a)中的茶叶用粉碎机粉碎至30目筛，备用；
[0029] c)调液加酶：按料液比1 : 13添加纯净水，混合均匀后调整茶水pH为4. 0,搅拌 均匀，按茶叶质量的〇. 1%添加复合酶液，搅拌均匀后，备用；其中，复合酶为纤维素酶与果 胶酶按酶活1:1混合而成；
[0030] d)真空微波处理：将步骤c)中的物质置于真空微波炉中，调整真空度 为-0. 090~-0. 080MPa，微波采用脉冲微波处理，脉冲微波剂量为0.0 lkw / kg条件下，脉 冲宽度为l〇s，脉冲周期为13s，物料温度维持在50-60°C之间，处理25min ;
[0031] e)离心分离：将步骤d)中物料离心分离，滤渣重复步骤c)、d)后离心，将两次上 清液合并后备用；
[0032] f)树脂吸附：将合并后的滤液通过AB-8型大孔树脂柱进行吸附；