一种抗血管新生化合物及其中间体的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及用于制备一类新生血管抑制剂类化合物的工艺方法以及该方法中的 关键中间体的新制备方法。
【背景技术】
[0002] 新生血管（angiogenesis)，是从已有血管发芽生成新血管的过程。这一过程与血 管内皮细胞迀移和增殖相关。新生血管与多种人类重大疾病有关，如恶性肿瘤。目前发现， 眼部血管新生性疾病，包括年龄相关性黄斑变性（AMD)、糖尿病视网膜病变、新生血管性青 光眼等，这类疾病的共同特点都在于眼部新生血管的异常增生（金晓等，抗VEGF药物在眼 科疾病中的应用及机制研究进展，中外医疗，2012年）。
[0003] 其中，黄斑变性主要有干性和湿性两种，湿性黄斑变性（AMD)的特点是，脉络膜的 新生血管进入视网膜下以及继而发生的出血、渗出及水肿等病理变化。湿性黄斑变性将迅 速丧失视力，较干性更为严重。目前，在湿性黄斑变性的治疗方面已有较好的进展。早期的 激光烧烁止血被血管内皮因子拮抗剂所代替，但因后者效果不佳，很快被光动力疗法所取 代。光动力疗法虽然提高了疗效，但仍不理想。近年又出现了新的血管内皮因子拮抗剂一一 雷珠单抗（Lucentis)，是一种人源性VEGF亚型单克隆抗体片段的重组体，可减少新生血管 生成。2006年，该药物被美国FDA批准用于治疗湿性黄斑变性，疗效良好；同时，目前也发 现该类抗VEGF药物对糖尿病视网膜病变、新生血管性青光眼有治疗作用。但由于雷珠单抗 为抗体药，价格极高，它还不能在全世界普及。因此，研究疗效良好、价格低廉的小分子新生 血管抑制剂药物是当今国际制药界激烈竞争的焦点。
[0004] 本申请人最新开发了一种新型抑制新生血管的化合物并已向中国专利局递交了 发明专利申请No. 201410125752.0,该专利申请的全文通过引用并入本文。该申请中公开了 一种式I化合物：
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[0006]其中，X为C，Y为N;
[0007]R1选自H或氨基；R2选自H、氨基或-(CH2)nNHR8，其中，n= 1-3,RAH或C1-2的 烷基；R3选自H或C1-2烷基；R4、R5、R6分别独立选自卤素、C1-2的烷基或卤素取代烷基；R7 选自H或卤素；
[0008] 或者，R2、R3与其相连的碳原子共同构成取代或非取代的含1个N的五元或六元 环，取代基为C1-3的烷基。
[0009] 并公开了一种用于制备优选的式I化合物的中间体化合物10 :
[0010]
[0011] 由该中间体化合物通过与带有氨基保护基（如Boc)的胺基取代的二氮杂芳香化 合物反应，并进一步脱去氨基保护基，从而得到上述式I化合物。
[0012] 上述合成反应以合成VOl化合物为例，
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[0016] 在上述合成路线中，共涉及11步反应，总收率仅约0. 58%，特别是最后两步，使用 了Boc保护的22来成醚键，然后在酸性条件脱Boc保护得到VOl，总收率仅为约10%，极大 地制约了该工艺方法的商业化。其它缺陷主要还在于其中化合物4、5、11、12以及终产物 VOl均需要通过柱层析纯化；步骤4中的钯催化剂费用昂贵以及其配体需要高负载量。可 见，该方法并不适于商业化生产。因此需要成本进一步降低，工艺进一步简化的适于商业化 生产的合成工艺方法。
【发明内容】
[0017] 针对以上问题，本发明提供一种产率显著提高、工艺进一步简化的制备式I化合 物的新的合成工艺方法以及合成其中关键中间体的新工艺方法。
[0018] 根据本发明的第一方面，提供一种制备式I化合物的方法，
[0019]
[0020] 其中，X为C，Y为N;
[0021] R1选自H或氨基；R2选自H、氨基或-(CH2)nNHR8，其中，n= 1-3,RAH或C1-2的 烷基；R3选自H或C1-2烷基；R4、R5、R6分别独立选自卤素、C1-2的烷基或卤素取代烷基；R7 选自H或卤素；
[0022] 或者，R2、私与其相连的碳原子共同构成被C1-3的烷基取代的或非取代的含1个 N的五元或六元环，
[0023] 其中，所述方法包括在极性有机溶剂中，使式II化合物在Cs2CO3的存在下与式III 化合物反应得到式I化合物的步骤：
[0025] 根据优选的实施方式，基于式II化合物的化学当量，式III化合物的加入量为 L2~L5当量；Cs2CO3的加入量为L5~3当量。
[0026] 所述极性有机溶剂没有特别的限制，只要对反应产生不利影响即可。可列举的有： DMSO、DMF等。
[0027] 所述反应优选在IKTC~120°C，最优选在115°C的温度下进行。
[0028] 优选地，式I中R1SH5R2选自氨基或-(CH2)nNHR8;或者，R2、R3与其相连的碳原子 共同构成被C1-3的烷基取代的或非取代的含1个N的五元或六元环；R4、R5、R6相同，为F、 Cl或Br;和R7为H。
[0029] 更优选地，所述式I化合物为如下式KDR6、V01、V3、V4、V5或V6的化合物：
[0030]
[0032] 在常规的反应路线设计中，通常会考虑先对式III中私和/或1?3中的氨基进行保 护后再与式II化合物进行成醚反应，然后在酸性条件下脱保护而得到最终式I化合物。例 如在中国专利申请No. 201410125752. 0中的实施例中均采用这种合成路线。然而这两步反 应的总收率仅为约10%左右，使式I化合物无法大量商业化合成。
[0033] 经反复实验，本发明人发现不对式III化合物中的氨基进行保护，在一定条件下 直接使式III化合物与式II化合物反应，出乎意料地将收率提高到约50%。而且在放大反 应中，该方法也取得了同样的成功。本发明的方法大大提高了收率，合成方法更加简单，成 本也大大降低，使式I化合物的商业化合成成为可能。
[0034] 根据本发明的第二方面，提供一种制备中间体式II化合物的方法，所述方法包括 以下步骤：
[0035] (1)使化合物19与有机金属试剂反应得到化合物21 ;
[0036] (2)通过滴加三溴化硼使化合物21脱甲醚得到化合物9;和
[0037] (3)和使化合物9与式IV化合物在HATU(2- (7-偶氮苯并三氮唑）-N，N，N'，N'-四 甲基脈六氣磷酸酯，（1_[Bis(dimethylamino)methylene] -1H-1, 2, 3-triazolo[4, 5_b] pyridinium3-oxidhexafluorophosphate))存在下反应得到式II化合物，
[0039] 其中，心、馬、1?6分别独立选自卤素、(：1-2的烷基或卤素取代烷基；1? 7选自11或卤素。
[0040]优选地，R4、R5、R6相同，为F、Cl或Br;R7 为H。
[0041] 步骤（1)中的有机金属试剂可为格氏试剂；锂试剂，例如烷基锂，如正丁基锂等； 氰化锌等。优选地，步骤（1)在钯催化剂的存在下，锌粉和氰化锌进行格氏反应，或者以正 丁基锂为锂试剂并通入二氧化碳气进行羧化反应。其中钯催化剂可为 ：？(12(此&)3等，其用 量以化合物19的量计为0. 001-0. 1当量，优选为约0. 005当量在制备VOl化合物的克级反 应规模中，转换数（TON，turnovernumber)从4. 3增长到200。毫无疑问，通过优化在将 来的放大生产中可以进一步提高TON。
[0042] 在本发明中，中间体式II化合物的合成采用活性更高的溴代化合物19代替了原 合成路线中的氯代化合物4,使羧化反应的产率进一步提高，而格氏反应中的催化剂用量大 大降低（在合成VOl化合物时，由原来的约0. 23当量降低至约0. 005当量）。因为反应中 优选的钯催化剂价格高昂，因此，这步反应的改进对整个合成工艺的成本降低贡献巨大。 [0043] 此外，锂试剂和格氏试剂均可用来将芳基溴代物转换为相应的芳基羧酸或者芳基 酰胺，因此使用中间体19来替代中间体4为VOl的合成路线提供了更多的选择。
[0045] 例如根据一种实施方式，化合物19可以与正丁基锂发生溴-锂交换，并与随后通 入的CO2气体发生反应生成化合物21。在多次克级规模实验中，反应后通过重结晶得到 53%收率的纯品化合物21。根据另一种实施方式，用异氰酸酯代替0) 2与化合物19反应则 可生成相应的酰胺衍生物化合物24。
[0046] 根据本发明的优选实施方式，步骤（1)采用格氏试剂在钯催化剂的存在下，由溴 代化合物19得到相应的氰基取代化合物20,再在碱性条件下水解得到羧基取代的化合物 21。在该实施方式中，化合物20不需通过色谱柱纯化。优选地，反应粗产物可在石油醚中 打衆，然后过滤、干燥而纯化。
[0047] 根据本发明的一种优选实施方式，在步骤（2)中，在滴加三溴