3. 0, 6. 5 Hz, H-6a), 2. 72(1Η, m, Η-8), 2. 78(1Η, dd, J=4. 8, 2. 4 Hz, H-IOb), 2. 87(1Η, dd, J=9. 2, 4. 8 Hz, H-IOa), 3.94 (1Η, dd, J=IO. 4, 6. 0 Ηζ, H-6'b), 3.90 (1Η, dd, J=IO. 4, 2. 0 Hz, Η-6'a), 4.45 (1Η, dd, J=IL 5,4.0 Hz, H-7b), 4.52 (1Η, dd, J=12,4.0 Hz, H-7a), 4.68 (1Η, d, J=8.0Hz, Η-Γ), 5.92 (1Η, s, Η-1), 7.68 (1Η, s, Η-3). 13C-NMR(100MHz,CD3OD): δ c: 168.0(011),154.8(03),108.8(04),100.4 (C-Γ), 97. 5 (C-I),78.5 (C-5,), 77.7(C-3,),74.3 (C-2,),71.5 (C-4,),65.0 (C-7),65.0 (C-6) 62.7 (C-6,), 50. 9(C-8), 50. 6(C-9), 46. 2 (C-IO), 33. 4(C-6)〇
[0027] 实施例2 取阴干的西南獐牙菜粉碎,粗粉碎过50目筛;用75%甲醇提取10次,每次3 h ;合并提 取液,过滤除渣,合并滤液,然后减压浓缩得相对密度1. 3的浸膏;浸膏加入3倍体积的水搅 拌至呈悬浮状,用浓度95%二氯甲烷溶液萃取5次,每次30 min;合并萃取液,过MCI脱 色,用体积浓度75%的甲醇洗脱,收集洗脱液;再上D900大孔树脂柱脱糖,用体积配比0:1, 9:1,8:2,6:4,3:7和I: O的甲醇/水(V/V )溶液洗脱,收集洗脱液,经TLC监测,合并相同 的部分,浓缩得浸膏,0:1部分上HPLC进行分离,用70%的甲醇水溶液洗脱,最后艾杰尔半制 备柱进行纯化,用70%的甲醇水溶液洗脱,得到Eustomoside化合物,本实施例制备得到的 化合物鉴定结果如下: 白色粉末,分子式为 C16H22O11; 1H-NmrGOOMHz, CD3OD) : δ H: 2. 02 (1H, ddd, J=15. Ο, 8. Ο, 2. O Hz, H-6b), 2. 30(1Η, ddd, J=15. Ο, 13. Ο, 6. 5 Hz, H-6a), 2. 72(1H, m, H-8), 2. 78(1H, dd, J=4. 8, 2. 4 Hz, H-lOb), 2. 87(1H, dd, J=9. 2, 4. 8 Hz, H-lOa), 3.94 (1H, dd, J=IO. 4, 6. O Hz, H-6'b), 3.90 (1H, dd, J=IO. 4, 2. O Hz, H-6'a), 4.45 (1H, dd, J=IL 5,4.0 Hz, H-7b), 4.52 (1H, dd, J=12,4.0 Hz, H-7a), 4.68 (1H, d, J=8.0 Hz, Η-Γ), 5.92 (1H, s, H-l), 7.68 (1H, s, H-3). 13C-NMR(100MHz,CD3OD): Sc: 168. O (C-Il),154.8 (C-3),108.8 (C-4),100.4 (C-l,),97. 5 (C-I),78.5 (C-5,), 77.7(C-3,),74.3 (C-2,),71.5 (C-4,),65.0 (C-7),65.0 (C-6) 62.7 (C-6,), 50. 9(C-8), 50. 6(C-9), 46. 2 (C-IO), 33. 4(C-6)〇
[0028] 实施例3 取阴干的西南獐牙菜粉碎,粗粉碎过50目筛;用85%甲醇提取10次,每次3 h ;合并提 取液,过滤除渣,合并滤液,然后减压浓缩得相对密度1. 3的浸膏;浸膏加入3倍体积的水搅 拌至呈悬浮状,用浓度95%二氯甲烷溶液萃取5次,每次40 min;合并萃取液,过MCI脱 色,用体积浓度70%的甲醇洗脱,收集洗脱液;再上D900大孔树脂柱脱糖,用体积配比0:1, 9:1,8:2,6:4,3:7和1:0的甲醇/水(V/V )溶液洗脱,收集洗脱液,经TLC监测,合并相同 的部分,浓缩得浸膏,0:1部分上HPLC进行分离,用70%的甲醇水溶液洗脱,最后艾杰尔半制 备柱进行纯化,用70%的甲醇水溶液洗脱,得到Eustomoside化合物,本实施例制备得到的 化合物鉴定结果如下: 白色粉末,分子式为 C16H22O11; 1H-NmrGOOMHz, CD3OD) : δ H: 2. 02 (1H, ddd, J=15. 0, 8. 0, 2. 0 Hz, H-6b), 2. 30(1Η, ddd, J=15. 0, 13. 0, 6. 5 Hz, H-6a), 2. 72(1Η, m, Η-8), 2. 78(1Η, dd, J=4. 8, 2. 4 Hz, H-IOb), 2. 87(1Η, dd, J=9. 2, 4. 8 Hz, H-IOa), 3.94 (1Η, dd, J=IO. 4, 6. O Ηζ, H-6'b), 3.90 (1Η, dd, J=IO. 4, 2. O Hz, Η-6'a), 4.45 (1Η, dd, J=IL 5,4.0 Hz, H-7b), 4.52 (1Η, dd, J=12,4.0 Hz, H-7a), 4.68 (1Η, d, J=8.0 Ηζ, Η-Γ), 5.92 (1Η, s, Η-1), 7.68 (1Η, s, H-3). 13C-NMR(100MHz,CD3OD): δ c: 168.0(011),154.8(03),108.8(04),100.4 (C-Γ), 97. 5 (C-I),78.5 (C-5,), 77.7(C-3,),74.3(C-2,),71.5(C-4,),65.0(07),65.0(C-6) 62.7(C-6,), 50. 9(C-8), 50. 6(C-9), 46. 2 (C-IO), 33. 4 (C-6) 〇
[0029] 实施例4 5 μ g/ml Eustomoside水溶液的配制: 称取实施例1制备得到的S印temfidoside化合物10 μ g溶于少量DMSO溶液,充分 搅拌混合,待其充分溶解后,加入余量的蒸馏水至终体积2 ml,制成水剂,即得5 μg/ml的 Septemfidoside 水溶液。
[0030] 实施例5 20 μ g/ml Eustomoside 水溶液的配制: 称取实施例3制备得到的Eustomoside化合物20 μ g溶于少量DMSO溶液,充分搅 拌混合,待其充分溶解后,加入余量的蒸馏水至终体积I ml,制成水剂,即得20 μ g/ml的 Eustomoside水溶液。使用时按照所需浓度稀释即可。
[0031] 实施例6 50 μ g/ml Eustomoside 水溶液的配制: 称取实施例2制备得到的Eustomoside化合物50 μ g溶于少量DMSO溶液,充分搅 拌混合,待其充分溶解后,加入余量的蒸馏水至终体积I ml,制成水剂,即得50 μ g/ml的 Eustomoside水溶液。使用时按照所需浓度稀释即可。
[0032] 实施例7 制备 I g Eustomoside 粉剂: 称取实施例2制备得到的Eustomoside化合物10 mg,加入少许DMSO使之充分溶解; 然后再加入0.1 g牛血清白蛋白粉,加水充分搅拌混匀,然后加入20%淀粉作为赋形剂,充 分混匀,干燥后磨碎制成粉剂。使用时将粉剂溶解于水并稀释至所需浓度即可。
[0033] 实施例8 制备 I g Eustomoside 粉剂: 称取实施例3制备得到的Eustomoside化合物0. 95 g,加入少许DMSO使之充分溶解; 然后再加入0. 01 g牛血清白蛋白粉,加水充分搅拌混匀,然后加入余量淀粉作为赋形剂,充 分混匀,干燥后磨碎制成粉剂。使用时将粉剂溶解于水并稀释至所需浓度即可。
[0034] 实施例9 制备I g Eustomoside颗粒剂: 称取实施例1制备得到的Eustomoside化合物0. 15 g,加入少许DMSO使之充分溶解; 然后再加入0. 5 g牛血清白蛋白粉,加水充分搅拌混匀,然后加入15%淀粉和15%果胶作为 赋形剂,充分混匀,制粒并干燥后成为颗粒剂。使用时将颗粒剂溶解于水并稀释至所需浓度 即可。
[0035] 实施例10 制备I g Eustomoside颗粒剂: 称取实施例2制备得到的Eustomoside化合物0. 001 g,加入少许DMSO使之充分溶解; 然后再加入0. 5 g牛血清白蛋白粉,加水充分搅拌混匀,然后加入20%淀粉和20%果胶作为 赋形剂,充分混匀,制粒并干燥后成为颗粒剂。使用时将颗粒剂溶解于水并稀释至所需浓度 即可。
[0036] 实施例11 制备 I g Eustomoside 乳剂: 称取实施例3制备得到的Eustomoside化合物0. 99 g,加入少许DMSO使之充分溶解; 然后加入10%十二烷基