一种对称性结构甘油三酯的酶法合成方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于油脂合成技术领域，涉及一种对称性结构甘油三酯的酶法合成方法。
【背景技术】
[0002] 结构甘油三酯是人体不可或缺的营养要素之一，已报道的关于结构酯的营养功能 有很多，例如，加强sn-2脂肪酸的吸收和利用、促进其他类型脂质的吸收、降低血清胆固醇 水平、提高免疫力、防止肥胖（能量值低）以及防癌等。近年来，富含多不饱和脂肪酸的对 称性结构甘油三酯因其具有极高的营养价值而备受人们关注。
[0003] 对称性结构甘油三酯是指sn-1，3位是饱和脂肪酸，sn-2位是不饱和脂肪酸的甘 油三酯。一般情况下，对称性结构甘油三酯的酶法合成可通过甘油三酯与脂肪酸的酸解 反应（Chen et al. , Journal of American Oil Chemists' Society, 2004, 81, 525-532) 或者通过2_单甘酯与脂肪酸的酯化反应（Alicia et al.Enzyme and Microbial Technology, 2012, 57, 148-155)，并以sn-1，3特异性脂肪酶作为催化剂来实现对称性结构 甘油三酯的合成。但是，此类反应属于可逆反应，反应温度较高，一般在50~70°C，酸解反 应制备对称性结构甘油三酯的得率较低，一般为40 %左右。目标产物和其他类型的甘油三 酯难以分离。2-单甘酯与脂肪酸的酯化反应，同样需要较高的反应温度，由于2-单甘酯极 其不稳定，平衡状态下2-单甘酯和1-单甘酯的比例为1:9(4]1(1代￥3 6丨31.，161：抑116(^ on，2008, 64, 9197-9202)，因此，较高反应温度下2-单甘酯的酰基转移生成1-单甘酯，2-单 甘酯的酰基转移降低了目标产物的得率。
【发明内容】
[0004] 本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施 方式。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或者省略以避免本 部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。
[0005] 鉴于现有对称性结构甘油三酯的制备方法中存在的问题，提出了本发明。
[0006] 因此，本发明的目的是解决现有技术中的不足，提供一种以脂肪酸乙烯酯作为酰 基供体与2-单甘酯合成对称性结构甘油三酯的酶法方法。
[0007] 为解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案：一种对称性结构甘油三酯 的酶法合成方法，对称性结构甘油三酯合成的酰基供体是脂肪酸乙烯酯，酰基受体是2-单 甘酯，将2-单甘酯与脂肪酸乙烯酯混合，加入脂肪酶作为催化剂，在一定温度下搅拌一定 时间，反应得到对称性结构甘油三酯。
[0008] 作为本发明所述一种对称性结构甘油三酯的酶法合成方法的优选方案，其中：所 选用的脂肪酸乙烯酯的碳链长度为C6~C20。
[0009] 作为本发明所述一种对称性结构甘油三酯的酶法合成方法的优选方案，其中：所 选用的脂肪酶为Lipozyme RM IM，Novozym 435或Lipozyme 435商品化脂肪酶。
[0010] 作为本发明所述一种对称性结构甘油三酯的酶法合成方法的优选方案，其中：所 述所述2-单甘酯与脂肪酸乙烯酯混合的摩尔比为1:2~1:5。
[0011] 作为本发明所述一种对称性结构甘油三酯的酶法合成方法的优选方案，其中：所 选用的反应体系为无溶剂或者有溶剂体系，溶剂体系中添加的溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷、 丙酮、乙酸乙酯、乙醚、石油醚或正己烷有机溶剂。
[0012] 作为本发明所述一种对称性结构甘油三酯的酶法合成方法的优选方案，其中：所 述一定温度为〇~50 °C，反应时间为0. 5~3. 5h。
[0013] 作为本发明所述一种对称性结构甘油三酯的酶法合成方法的优选方案，其中：所 述加酶量为反应物总质量的6%~22%。
[0014] 本发明采用脂肪酸乙烯酯作为酰基供体，由于选用脂肪酸乙烯酯而不是脂肪酸作 为酰基供体，反应会生成乙醛，乙醛的沸点为20. 8°C，在室温下极易挥发离开反应体系，从 而导致反应往正方向持续进行，因此该反应为不可逆反应。此反应的特点是反应效率高、反 应温度低，并且低温反应极大的抑制了 2-单甘酯的酰基转移。
【附图说明】
[0015] 图1为本发明一个实施例中比较脂肪酸和脂肪酸乙烯酯两种不同的酰基供体对 反应产物中对称性甘油三酯含量的影响示意图；
[0016] 图2为本发明一个实施例中lmmol sn_2花生四稀酸单甘酯与2. 5mmol棕榈酸乙 稀酯混合于1.5ml正己烧中，加入10% (w/w，酶添加量与总反应物质量之比）的Lipozyme RM頂作为催化剂，350rpm的转速下搅拌2. 5h，不同的反应温度对产物中对称性甘油三酯 含量的影响示意图；
[0017] 图3为本发明一个实施例中lmmol sn_2花生四稀酸单甘酯与2. 5mmol棕榈酸乙 烯酯混合于1. 5ml正己烷中，30°C，350rpm的转速下搅拌2. 5h，不同的酶添加量对产物中对 称性甘油三酯含量的影响示意图；
[0018] 图4为本发明一个实施例中lmmol sn_2花生四稀酸单甘酯与2. 5mmol棕榈酸乙 稀酯混合于1.5ml正己烧中，加入10% (w/w，酶添加量与总反应物质量之比）的Lipozyme RM頂作为催化剂，30°C，350rpm的转速下搅拌，不同反应时间对产物中对称性甘油三酯含 量的影响示意图；
[0019] 图5为本发明一个实施例中lmmol sn_2花生四稀酸单甘酯与2. 5mmol棕榈酸乙 稀酯混合于1.5ml正己烧中，加入10% (w/w，酶添加量与总反应物质量之比）的Lipozyme RM頂作为催化剂，30°C，350rpm的转速下搅拌2. 5h。反应初期，反应体系的液相色谱图；
[0020] 图6为本发明一个实施例中lmmol sn_2花生四稀酸单甘酯与2. 5mmol棕榈酸乙 稀酯混合于1.5ml正己烧中，加入10% (w/w，酶添加量与总反应物质量之比）的Lipozyme RM頂作为催化剂，30°C，350rpm的转速下搅拌2. 5h。反应后期，反应体系的液相色谱图；
[0021] 图7为本发明另一个实施例中lmmo