用于制备香豆雌酚或香豆雌甙的方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及用于制备香豆雌酪或香豆雌武（coumestrin)的方法。
【背景技术】
[0002] 由于US抑A禁止在对绝经女性的雌激素疗法中使用具有强大的雌激素影响的便 宜的合成雌激素，例如己締雌酪（DES)，因此可替代女性荷尔蒙的天然植物雌激素已囊括了 研究兴趣。但是，由于运些物质是W微量形式存在于自然界，所W非常困难获得大量的运 些物质。由于对大规模合成运些物质的不冷不热的态度，导致超过半个世纪也没有显著进 步。虽然已经报道了少量的合成方法，但是它们都仅仅是实验室规模，而且目前没有一种 用于大规模生产的容易的方法。香豆雌酪是至今知道的最强大的植物雌激素，主要发现于 豆科和菊科植物的种子、根和叶中。香豆雌酪是一种异黄酬，通常分类为香豆草酸类化合 物（coumestan-basedcompound)。在植物的伤口部位分泌高浓度的香豆雌酪，已知它能 够通过抗氧化、抗炎症、抗毒素的作用防止细菌、真菌和病毒的感染（Darbarwar,M.，et al., 乂 /打?化义，35, 297, 1982;Jeffr巧，B.比，etal.,Phytochemical Dictionary,Taylor&Rrancis,London,pp418, 1933)。因为各种细菌、真菌、病毒等 的感染导致包括香豆雌酪的各种芳香类化合物的合成。已知香豆雌酪的抗菌作用的原因在 于酪醒骨架结构，其通过防止自由基氧化剂的流入而抑制过氧化合物在体内的产生。此外， 在各种天然香豆草酸类衍生物中，已知仅仅香豆雌酪具有雌激素作用。通过对幼龄大鼠口 服给药香豆雌酪，然后监控子宫重量的变化来评估雌激素作用。应该注意到的是，香豆雌酪 对年轻雌性大鼠表现出雌激素作用，而对成熟雄性大鼠没有作用，而且没有表现出任何毒 性（Darbarwar,M. ,etal., 乂 /打 化 , 35, 297, 1982)。但是，因为香豆雌酪 W微量形式存在于豆科植物中，所W它非常昂贵。鉴于运个原因，已经有一些通过合成来获 得香豆雌酪的尝试。但是，由于其具有几个芳香稠环的相当复杂的化学结构，至今还没有报 道简单的合成方法。虽然已经报道了一些合成方法，但是它们有很多问题，且不适于商业应 用。目前，在天然衍生的物质比化学合成的物质更安全的方面，正积极地研究通过天然途径 进行大规模生产的方法。
【发明内容】
[000引技术问题 一方面，本发明设及提供一种从豆科植物制备香豆雌酪或香豆雌武的方法。另一方面， 本发明设及提供通过香豆雌武的脱糖基化制备大批量的香豆雌酪的方法。
[0004] 技术方案 一方面，本发明提供一种制备香豆雌武的方法，包括在豆科植物的营养生长期，用壳聚 糖处理豆科植物或±壤。
[0005] 另一方面，本发明提供一种制备香豆雌武的方法，其中用壳聚糖处理豆科植物的 根。
[0006] 另一方面，本发明提供一种制备香豆雌武的方法，其中在营养生长期的VE至V4期 中的任一期用壳聚糖处理豆科植物。
[0007]另一方面，本发明提供用于制备香豆雌武的方法，其中使用低分子量、水溶性壳聚 糖。
[0008] 另一方面，本发明提供用于制备香豆雌武的方法，其中每隔4-6天进行一次壳聚 糖处理。
[0009] 另一方面，本发明提供用于制备香豆雌武的方法，其进一步包括制备豆科植物的 提取物。
[0010] 另一方面，本发明提供用于制备香豆雌武的方法，其中使用所述豆科植物的根部 提取物。
[0011] 另一方面，本发明提供一种制备香豆雌酪的方法，包括在豆科植物的营养生长期， 用壳聚糖处理豆科植物或±壤。
[0012] 另一方面，本发明提供一种制备香豆雌酪的方法，其中用壳聚糖处理豆科植物的 根。
[0013] 另一方面，本发明提供一种制备香豆雌酪的方法，其中在营养生长期的VE至V4期 中的任一期用壳聚糖处理豆科植物。
[0014] 另一方面，本发明提供用于制备香豆雌酪的方法，其中使用低分子量、水溶性壳聚 糖。
[0015] 另一方面，本发明提供用于制备香豆雌酪的方法，其中每隔4-6天进行一次壳聚 糖处理。
[0016] 另一方面，本发明提供用于制备香豆雌酪的方法，其进一步包括制备豆科植物的 提取物。
[0017] 另一方面，本发明提供用于制备香豆雌酪的方法，其中使用所述豆科植物的根部 提取物。
[001引另一方面，本发明提供一种制备香豆雌酪的方法，包括：根据上述方法制备香豆雌 武和香豆雌酪；通过利用选自酸、碱、酶和微生物中的一种或多种物质来处理所述香豆雌 武，对香豆雌武脱糖基化。
[0019] 另一方面，本发明提供一种制备香豆雌酪的方法，其中利用选自酸、碱、酶和微生 物中的一种或多种物质处理含有香豆雌武的豆科植物的提取物。
[0020] 有益效果 一方面，一种用于制备香豆雌酪或香豆雌武的方法，其中使用豆科植物，通过增加制备 的香豆雌酪或香豆雌武的含量，使得大批量生产高产率的香豆雌酪。制得的香豆雌酪或香 豆雌武可用于各种应用，例如药物、食品或化妆品。
【附图说明】
[0021] 图1展示了根据诱导处理和营养生长期，豆科植物的根部提取物中的香豆雌酪的 含量； 图2展示了在将豆科植物的根部提取物溶解在水中之后，利用P-葡糖糖巧酶进行酶 促反应，并利用HPLC分析酶促反应产生的沉淀物的结果； 图3对比了在进行酶促反应之前和之后，所述豆科植物的根部提取物中的香豆雌酪的 含量。
【具体实施方式】
[002引香豆雌酪（CMS, 3, 9-二径基-6H-苯并巧喃（3, 2-C) (1)苯并化喃-6-酬。5&05，MW: 268.2)是香豆素类化合物，其结构与天然雌激素雌二醇或己締雌酪类似，具有W下化 学式1: 化学式1
香豆雌武由化学式2表示。
[002引化学式2
本发明提供一种制备香豆雌武的方法，该方法在豆科植物播种后的预设营养生长期， 用壳聚糖处理豆科植物或±壤。本发明还提供一种制备香豆雌酪的方法，该方法在豆科植 物播种后的预设营养生长期，用壳聚糖处理豆科植物或±壤。壳聚糖可用于处理所述豆科 植物的整个植物或其部分，例如种子、叶、茎、果实等。具体地，壳聚糖可用于处理根部。
[0024] 根据本发明的一方面，豆科植物不作具体限定，只要是产生香豆雌武和/或香豆 雌酪的豆科植物即可。例如，可用于本发明的所述豆科植物可W是用于制作豆酱、豆腐或 豆芽的豆科植物，用于煮饭的豆科植物，或者按其自身现状使用的豆科植物。用于豆酱 和豆腐的种类包括大豊（韩国品种名称登记（下文中省略）申请公开号2003-940)、湖 酱（申请公开号2003-950)、壮元（申请公开号2002-76)、大演（申请公开号2000-379)、 sodam(sodam，申请公开号1999-933)、松鹤（申请公开号1999-936)、大元（韩国国家品 种清单（下文中省略）清单号01-0003-1997-38)、眞品（清单号01-0003-1997-26)、 蛋白（清单号01-0003-1997-18)、豆油（清单号01-0003-1997-22)、新八达（清单号 01-0003-1997-15)、太光（清单号 01-0003-1997-12)、万里（清单号 01-0003-1997-11)、 长寿（清单号01-0003-1997-9)、无限（清单号01-0003-1997-7)、白云（清单号 01-0003-1997-2)、saeal(清单号 10-0003-1997-3)、黄金（清单号 01-0003-1997-1)、 长叶（清单号01-0003-1997-41)等等。用于豆芽的品种包括shinhwa-kong(申请公 开号2009-982)、sowon-kong(申请公开号2000-376)、安平（申请公开号2003-939)、 西南（申请公开号2003-948)、多彩（申请公开号2003-930)、小绿、小湖（申请公开号 2002-78)、疏明（申请公开号1999-932)、多元（清单号01-0003-1997-40)、豊产（清单号 01-0003-1997-34)、益山（清单号 01-0003-1997-29)、小白（清单号 01-2003-1997-31)、 光安（清单号01-0003-1997-19)、短叶、银河（清单号01-0003-1997-6)等等。用于煮饭 的品种包括靑磁（申请公开号2002-80)、黑靑（申请公开号2000-381)、褐味（申请公开号 2000-380)、鲜黑（申请公开号 1999_9；34)、geomjeong-kong(清单号 01-2003-1997-17), 一品geomjeong-kong(清单号01-0003-1997-42)等等。按其自身现状使用的品种 包括daol(申请公开号2003-931)、新绿（申请公开号2002-77)、saeol(申请公开 号 1999-938)、geomjeongol(清单号 01-2003-1997-37)、seokyang-putkong(清单 号 01-0003-1997_2f5)、hwaeom-putkong(清单号 01-0003-1997-21)、keunol(清单号 01-2003-1997-14)等等。
[00巧]根据本发明的一方面，在营养生长期的VE、VC、V1、V2、V3和V4期中的一个或多个 期中，可用壳聚糖处理豆科植物。具体地，可W从VE至V3期用壳聚糖进行处理，更具体地 从VE至V4期。VE期是发芽期，其中种子叶从±壤中长出，VC期为子叶期，其中初级幼苗叶 子长出。VI期是初级幼苗期，其中初级幼苗叶子完全长出，V2期为第一复叶期，其中第一复 叶完全长出，V3为第二复叶期，其中第二复叶完全长出。V4期为第S复叶期，其中第S复叶 完全长出。
[0026] 此外，可隔4-6天的间隔用壳聚糖处理豆科植物和/或±壤。
[0027] 根据本发明的一方面，用于制备香豆雌酪或香豆雌武的方法中使用的所述壳聚糖 具体可W为低分子量、水溶性壳聚糖，更具体地为具有分子量为20000或更低、15000或更 低、10000或更低、或者5000或更低的低分子量、水溶性壳聚糖。具体地，所述低分子量、水 溶性壳聚糖的分子量可W是500或更大、1000或更大、2000或更大、或者5000或更大。壳 聚糖的最重要的性质