一种从广陈皮中快速制备3,5,6,7,8,3′,4′-七甲氧基黄酮的方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种从广陈皮中快速制备3, 5, 6, 7, 8, 3'，4' -屯甲氧基黄酬的方法， 属于天然药物技术领域。
【背景技术】
[0002] 广陈皮为常用传统中药，正品来源为茶枝相（Citrusreticulate乂hachi')的干 燥成熟果皮。其性溫，味苦、辛，归肺、脾经，具有理气健脾、燥湿化疲之功效，主要用于腕腹 胀满、食少吐泻、咳嗽疲多。广陈皮为历代众多名医所推崇，被认为质量最优，奉为陈皮道地 药材，位列于十大广药之首。
[0003] 现代研究表明广陈皮药材中主要含有黄酬（包括二氨黄酬氧巧、黄酬碳巧、黄酬 氧巧、多甲氧基黄酬和二氨黄酬等）、生物碱、挥发油、环肤等多类成分。广陈皮黄酬具有防 治屯、血管疾病、抗氧化、抗肿瘤、降低胆固醇、镇静消炎、抗菌杀虫、抗血小板凝集、抗过敏等 作用。其中，3, 5, 6, 7, 8, 3'，4' -屯甲氧基黄酬是广陈皮中一种微量活性多甲氧基黄酬，其结 构如下式（I)所示。研究证实3, 5, 6, 7, 8, 3'，4' -屯甲氧基黄酬具有抗动脉粥样硬化、抗 肿瘤、抗炎等药理活性，因此3, 5, 6, 7, 8, 3'，4' -屯甲氧基黄酬的制备对于广陈皮新药开发 和产品质量控制具有重要的意义。
[0004]
阳〇化]目前，广陈皮中多甲氧基黄酬类化合物的分离多采用溶剂萃取结合高速逆流色谱 或常压硅胶柱层析法，但存在设备昂贵、操作繁琐、分离效率不高等缺点，很难得到纯度大 于98%的局纯样品。
【发明内容】
[0006] 鉴于上述现有技术存在的缺陷，本发明的目的是提出一种从广陈皮中快速 制备3, 5, 6, 7, 8, 3'，4' -屯甲氧基黄酬的方法，能够快速、高效率地得到高纯度的 3, 5, 6, 7, 8, 3'，4'-屯甲氧基黄酬。
[0007] 本发明的目的通过W下技术方案得W实现：
[0008] 一种从广陈皮中快速制备3, 5, 6, 7, 8, 3'，4' -屯甲氧基黄酬的方法，包括如步骤：
[0009] 步骤一、将广陈皮药材粉碎成粗粉，用质量浓度为50% -95%的乙醇回流提取，对 提取液进行减压回收溶剂，得到提取物；
[0010] 步骤二、将提取物用质量浓度为40%的乙醇溶解，过大孔树脂，然后用质量浓度为 20% -45%的乙醇洗脱除去黄酬巧、生物碱、糖类等成分，再用质量浓度为50% -95%的乙 醇洗脱富集多甲氧基黄酬部位，并对多甲氧基黄酬部位的洗脱液回收溶剂、干燥，得到多甲 氧基黄酬部位粗品；
[0011] 步骤S、将多甲氧基黄酬部位粗品用100-200目硅胶拌样，装入填有300-400 目硅胶的中压层析柱中，有机溶剂系统梯度洗脱，高效液相色谱法监测，收集含有 3, 5, 6, 7, 8, 3'，4'-屯甲氧基黄酬的洗脱液，回收溶剂，得到3, 5, 6, 7, 8, 3'，4'-屯甲氧基黄 酬。
[0012] 上述的从广陈皮中快速制备3, 5, 6, 7, 8, 3'，4' -屯甲氧基黄酬的方法中，步骤一 中，用质量浓度为50% -95%的乙醇回流提取时，50% -95%的乙醇的用量为刚好淹没广陈 皮药材粗粉，或者其用量为广陈皮药材粗粉体积的4-6倍。
[0013] 上述的从广陈皮中快速制备3, 5, 6, 7, 8, 3'，4' -屯甲氧基黄酬的方法中，将提取 物用质量浓度为40%的乙醇溶解时，乙醇的用量为使得提取物刚好溶解为宜，或者乙醇的 用量为使得提取物成混悬液即可。
[0014] 上述的从广陈皮中快速制备3, 5, 6, 7, 8, 3'，4' -屯甲氧基黄酬的方法中，优选的， 步骤一中，所述粗粉的粒径为过24目筛。
[0015] 上述的从广陈皮中快速制备3, 5, 6, 7, 8, 3'，4' -屯甲氧基黄酬的方法中，优选的， 步骤一中，用质量浓度为50% -95%的乙醇回流提取时，提取时间为1-化，提取次数为1-3 次。
[0016] 上述的从广陈皮中快速制备3, 5, 6, 7, 8, 3'，4' -屯甲氧基黄酬的方法中，该方法 还包括合并多次质量浓度为50% -95%的乙醇提取液的步骤。
[0017]上述的从广陈皮中快速制备3, 5, 6, 7, 8, 3'，4'-屯甲氧基黄酬的方法中，优选的， 步骤二中，用质量浓度为20% -45%的乙醇洗脱除去黄酬巧、生物碱、糖类等成分时，质量 浓度为20% -45%的乙醇的用量为大孔树脂体积的6-15倍。
[0018] 上述的从广陈皮中快速制备3, 5, 6, 7, 8, 3'，4' -屯甲氧基黄酬的方法中，优选的， 步骤二中，用质量浓度为50% -95%的乙醇洗脱富集多甲氧基黄酬部位时，质量浓度为 50% -95 %的乙醇的用量为大孔树脂体积的4-10倍。
[0019]上述的从广陈皮中快速制备3, 5, 6, 7, 8, 3'，4'-屯甲氧基黄酬的方法中，优选的， 步骤二中，过大孔树脂所用的大孔树脂为非极性大孔树脂，包括D101型和/或AB-8型大孔 树脂。
[0020] 上述的从广陈皮中快速制备3, 5, 6, 7, 8, 3'，4' -屯甲氧基黄酬的方法中，优选的， 步骤=中，所述有机溶剂系统梯度洗脱时，有机溶剂系统为石油酸-乙酸乙醋，其梯度为从 10 : 1渐变为1 : 2。
[0021] 上述的从广陈皮中快速制备3, 5, 6, 7, 8, 3'，4'-屯甲氧基黄酬的方法中，优选 的，步骤=中，所述有机溶剂系统梯度洗脱时，有机溶剂系统为石油酸-丙酬，其梯度为从 20 : 1渐变为1 : 1。
[0022]上述的从广陈皮中快速制备3, 5, 6, 7, 8, 3'，4'-屯甲氧基黄酬的方法中，步骤S 中，所述有机溶剂系统梯度洗脱时，梯度渐变的时间W长为好，较长的时间能够得到较好的 分离度，但也不能过长，一般不超过12小时，一般控制在4小时-6小时为宜。
[0023] 上述的从广陈皮中快速制备3, 5, 6, 7, 8, 3'，4'-屯甲氧基黄酬的方法中，优选 的，步骤=中，所述高效液相色谱法监测所用的流动相为乙腊-0. 1 %甲酸水溶液；所用的 洗脱程序为：〇-3min，25% -50% 乙腊，3-7min，50% -58% 乙腊，7-llmin，58-58% 乙腊， ll-16min，58% -70% 乙腊，16-18min，70-76% 乙腊。
[0024] 根据具体实施方案，优选的，所述高效液相色谱法监测所用的HPLC条件为： AgilentZorbaxSBC18 色谱柱（4. 6mmX250mm，5ym)，检测波长：330nm;柱溫：30°C;流动 相：（A)乙腊-做 0. 1% 甲酸水溶液，0-3min，25% -50%A;3-7min，50% -58%A;7-llmin， 58-58 %A; 1l-16min，58 % -70 %A; 16-18min，70-76 %A。流动相流速：1. 0血/min,进样量： 5yL。
[00巧]本发明还提供一种上述的从广陈皮中快速制备3, 5, 6, 7, 8, 3'，4' -屯甲氧基黄酬 的方法制备得到的3, 5, 6, 7, 8, 3'，4' -屯甲氧基黄酬，所述3, 5, 6, 7, 8, 3'，4' -屯甲氧基黄 酬的纯度大于98%。 阳0%] 本发明的突出效果为：
[0027]本发明的从广陈皮中快速制备3, 5, 6, 7, 8, 3'，4' -屯甲氧基黄酬的方法，基于大 孔树脂与中压柱色谱，能够得到高纯度的3, 5, 6, 7, 8, 3'，4' -屯甲氧基黄酬，分离效率高、 毒性溶剂消耗少、能够实现大量制备。
【附图说明】
[0028]图1为实施例1中从广陈皮药材中分离得到的3, 5, 6, 7, 8, 3'，4' -屯甲氧基黄酬 的高效液相色谱图；
[0029]图2为实施例2中从广陈皮药材中分离得到的3, 5, 6, 7, 8, 3'，4' -屯甲氧基黄酬 的高效液相色谱图。
【具体实施方式】
[0030]为了对本发明的技术特征、目的和有益效果有更加清楚的理解，现对本发明的技 术方案进行W下详细说明，但不能理解为对本发明的可实施范围的限定。下述实施例中所 述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途 径获得。 阳0川实施例1
[0032] 本实施例提供一种从广陈皮中快速制备3, 5, 6, 7, 8, 3'，4' -屯甲氧基黄酬的方 法，包括如步骤：
[003引步骤一、将2.OKg广陈皮药材粉碎成粗粉（过24目筛），用4倍广陈皮药材粗粉体 积的质量浓度为95 %的乙醇回流提取3次，