一种化合物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及医药技术领域，尤其设及一种化合物及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 巧等，俗称云等、松等、巧灵，为寄生在松树根上的菌类植物，形状像甘馨，外皮黑 褐色，里面白色或粉红色。其原生物为多孔菌科真菌巧等的干燥菌核，多寄生于马尾松或赤 松的根部，产于云南、安徽、湖北、河南、四川等地。
[0003] 巧等味甘、淡、性平，能渗湿利水，健脾和胃，宁屯、安神；古人称巧等为"四时神药"， 因为它功效非常广泛，不分四季，将它与各种药物配伍，不管寒、溫、风、湿诸疾，都能发挥其 独特功效。
[0004] 目前，关于巧等组成成分及其用途的分析并未见报道。
【发明内容】
阳〇化]有鉴于此，本发明所要解决的技术问题在于提供一种化合物及其制备方法和应 用。
[0006] 本发明提供了一种化合物，具有式（I)结构，
[0007]
[000引本发明提供了一种式（I)结构的化合物的制备方法，包括：
[0009] 1)对巧等进行提取，得到浸膏；
[0010] 。将得到的浸膏进行萃取，得到含有式（I)结构化合物的粗品；
[0011] 3)将含有式（I)结构化合物的粗品进行纯化，得到式（I)结构的化合物，
[0012]
[0013] 优选的，所述步骤2)中萃取所用的溶剂为乙酸、乙酸乙醋、乙酸甲醋、甲酸甲醋、 甲酸乙醋、甲酸丙醋和乙酸丙醋中的一种或几种。
[0014] 优选的，所述步骤3)具体为：
[0015] 3-1)将含有式（I)结构化合物的粗品通过柱色谱分离，得到柱色谱分离后的产 品；
[0016] 3-2)将柱色谱分离后的产品通过高效液相色谱分离，得到式（I)结构的化合物。
[0017] 优选的，所述步骤3-1)柱色谱分离的洗脱剂为石油酸、乙酸乙醋和醋酸。
[0018] 优选的，所述步骤3-1)中柱色谱分离的具体方法为：依次用石油酸与乙酸乙醋的 体积比为（8~15) :1的溶液，石油酸、乙酸乙醋和乙酸的体积比为（40~60) :10:1的溶液 和石油酸、乙酸乙醋和乙酸的体积比为（40~60) : (40~60) : 1的溶液洗脱，收集洗脱剂为 石油酸、乙酸乙醋和乙酸的体积比为（40~60) : (40~60) : 1时的产品，即为柱层析分离后 的广品。
[0019] 优选的，所述高效液相色谱分离采用的流动相为乙腊和4wt%~8wt%的甲酸水 溶液。
[0020] 优选的，所述高效液相色谱分离为依次采用制备型高效液相色谱和半制备型高效 液相色谱分离。
[0021] 本发明还提供了一种式（I)所示化合物在制备治疗癌症的药物中的应用，
[0022]
[0023] 优选的，所述癌症为宫颈癌。
[0024] 与现有技术相比，本发明提供了一种式（I)所示结构的化合物，且通过细胞实验 发现，本发明所述的化合物能够抑制人宫颈癌细胞化ela)的活性，其ICs。为18. 26iiM。
【附图说明】
[00巧]图1为本发明实施例1制得的式（I)结构的化合物的IhNMR谱图；
[0026] 图2为本发明实施例1制得的式（I)结构的化合物的"CNMR谱图和DEPT135谱 图；
[0027] 图3为本发明实施例1制得的式（I)结构的化合物的服QC谱图；
[00測图4为本发明实施例1制得的式（I)结构的化合物的Ih-IhCOSY谱图；
[0029] 图5为本发明实施例1制得的式（I)结构的化合物的HMBC谱图；
[0030] 图6为本发明实施例1制得的式（I)结构的化合物的HRESI(+)MS谱图。
【具体实施方式】
[0031] 本发明提供了一种化合物，具有式（I)结构，
[0032]
[0033] 本发明还提供了一种式（I)结构的化合物的制备方法，包括：
[0034] 1)对巧等进行提取，得到浸膏；
[00对。将得到的浸膏进行萃取，得到含有式（I)结构化合物的粗品；
[0036]扣将含有式（I)结构化合物的粗品进行纯化，得到式（I)结构的化合物，
[0037]
[0038] 按照本发明，本发明通过对巧等进行提取，得到浸膏；本发明对提取的方法没有特 殊限制，本领域公知的用于溶剂提取中草药成分的方法均可，本发明优选采用连续提取法； 所述提取的溶剂优选为醇和水的混合溶剂；所述混合溶剂中醇与水的体积比为（60~80): (40~20)，更优选为70:30;所述醇优选为甲醇和乙醇中的一种或两种；所述巧等与混合溶 剂的用量比优选为化g: (8~15化，更优选为化g:巧~12化，最优选为化g:10L;所述提取 优选在回流条件下提取，所述提取的时间优选为2~6小时，优选为4~5小时。
[0039] 提取完毕后，本发明优选还将提取液浓缩，得到浸膏；本发明对浓缩的方法没有特 殊限制，本领域技术人员公知的浓缩方法即可，本发明优选采用减压蒸馈浓缩。
[0040] 按照本发明，本发明对得到的浸膏进行萃取，得到含有式（I)结构化合物的粗品； 其中，萃取所用的溶剂优选为乙酸乙醋、乙酸甲醋、甲酸甲醋、甲酸乙醋、甲酸丙醋和乙酸丙 醋中的一种或几种，更优选为乙酸乙醋或乙酸甲醋；萃取的次数优选为3~5次；且为了能 够萃取的充分，本发明优选将浸膏与水混合，得到浸膏的水溶液，然后再萃取；所述浸膏与 水的体积比优选为1 : (10~20)，更优选为1 : (12~15)。
[0041] 按照本发明，本发明将含有式（I)结构化合物的粗品进行纯化，得到式（I)结构的 化合物；
[0042] 具体的，本发明优选将含有式（I)结构化合物的粗品通过柱色谱分离，得到柱色 谱分离后的产品；
[0043] 3-2)将柱色谱分离后的产品通过高效液相色谱分离，得到式（I)结构的化合物。
[0044] 按照本发明，将含有式（I)结构化合物的粗品通过柱色谱分离，得到柱色谱分离 后的产品；其中，柱色谱分离的填料优选为硅胶；且硅胶的用量（Wg计）优选为粗品用量(Wg计）的4~6倍；更优选为5倍；所述柱色谱分离的洗脱剂优选为石油酸、乙酸乙醋 和醋酸；且为了充分的分离各个化合物，本发明优选依次用石油酸与乙酸乙醋的体积比为 (8~15) :1的溶液，石油酸、乙酸乙醋和乙酸的体积比为（40~60) :10:1的溶液和石油酸、 乙酸乙醋和乙酸的体积比为（40~60) : (40~60) : 1的溶液洗脱；更优选为依次用石油酸 与乙酸乙醋的体积比为（10~12) :1的溶液，石油酸、乙酸乙醋和乙酸的体积比为（45~ 50) :10:1的溶液和石油酸、乙酸乙醋和乙酸的体积比为（50~55) : (50~55) : 1的溶液洗 脱；收集最后洗脱的产品，即为柱层析分离后的产品。
[0045] 将柱色谱分离后的产品通过高效液相色谱分离，得到式（I)结构的化合物，其中， 所述高效液相色谱分离优选为依次采用制备型高效液相色谱和半制备型高效液相色谱分 离；
[0046] 所述制备型高效液相色谱分离的过程优选为：
[0047] 具体的，将柱色谱分离后的产品通过制备型高效液相色谱分离，其中，所述色谱分 离采用的色谱柱优选为C18反向填料的色谱柱，更优选为50巧50mm汉邦柱；所述色谱分离 的流速优选为20~50mL/min;更优选为25~30mL/min;所述色谱分离的流动相优选为乙 腊和4wt%~8wt%的甲酸水溶液；所述甲酸水溶液更优选为5wt%~6wt% ;所述色谱分 离检测的波长优选为2lOnm、238nm、254nm、280nm和324nm;其中，流动相的洗脱优选为梯度 洗脱，具体的，所述梯度洗脱优选为O~40min，85~90 %乙腊；40~50min，90~95 %乙 腊；50~55min，95-100%乙腊；所述进样量优选为10血；更进一步的，收集出峰时间为7~ 14min，且在210皿，238皿，254皿，280皿，324nm下均有吸收的分离产物；
[0048] 且为了使上述分离产物纯度更高，本发明优选还将出峰时间为7~14minmin, 且在210皿，238皿，254皿，280皿，324皿下均有吸收的分离产物再次进行制备型高效液 相色谱分离；其中，所述色谱分离采用的色谱柱优选为C18反向填料的色谱柱，更优选为 50巧50mm汉邦柱；所述色谱分离的流速优选为20~50血/min;更优选为25~30血/