一种从桦褐孔菌子实体中提取水溶性β葡聚糖的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及中药的活性成分提取领域，特别是一种从桦褐孔菌子实体中提取水溶性β葡聚糖的方法。
【背景技术】
[0002]桦褐孔菌(Inonotus obliquus)是一种药用价值很高的名贵真菌，其有效成分在食品、药品、保健品中有着广泛的应用。随着对桦褐孔菌研究的深入，大量的活性成分被分离出来，主要有:桦褐孔菌多糖、桦褐孔菌素、桦褐孔菌醇和多种氧化三萜类化合物。桦褐孔菌具有抑制肿瘤生长、增强机体免疫功能、抗氧化和抗病毒等功效。
[0003]随着桦褐孔菌的应用越来越广泛，桦褐孔菌的活性成分提取成为了一个比较热门的课题。桦褐孔菌多糖是桦褐孔菌的主要活性成分之一，对于桦褐孔菌多糖的提取液已经有了一些报道。但是这些文献都只是对桦褐孔菌总多糖的提取，桦褐孔菌多糖在桦褐孔菌中以α和β两种构型共存，目前对于桦褐孔菌总多糖的工艺研究的文献都没有提到这两种构型的分离，仅仅是从提取总多糖本身入手，对提取的总多糖进行进一步纯化，分离得到某一种构型的多糖均一体。
[0004]多糖分子量从几千到几百万不等，分子量越大其水溶性越差，桦褐孔菌多糖也不例外。桦褐孔菌多糖大分子量部分水溶性较差，在分离提取中用水做溶剂很难提取完全，即使使用碱液提取，虽然提取率高，但是干燥后得到多糖产品应用时仍然不溶解于水。人体对于这种大分子桦褐孔菌多糖吸收不好。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于提供一种从桦褐孔菌子实体中提取水溶性β葡聚糖的方法，解决β葡聚糖的水溶性问题，更有利于桦褐孔菌β葡聚糖的吸收利用和产品开发，提高了桦褐孔菌多糖的收率，增加了水溶性，更有利于人体吸收。
[0006]本发明的目的通过以下技术方案来实现:
一种从桦褐孔菌子实体中提取水溶性β葡聚糖的方法，包括以下步骤:
步骤1、制备枠揭孔菌粗多糖:
取桦褐孔菌子实体，粉碎得到粉末，粉末用碱液浸提，过滤除去残渣，滤液中加入乙醇，静置，过滤得到沉淀，得桦褐孔菌粗多糖；
步骤2、制备桦褐孔菌β葡聚糖:
取桦褐孔菌粗多糖，干燥后加水搅拌，加入α淀粉酶水解，水解液过滤，弃去滤液，得到残渣，得桦褐孔菌β葡聚糖；
步骤3、制备水溶性β葡聚糖:
取桦褐孔菌β葡聚糖，加碱液搅拌提取，提取液调酸碱度至ΡΗ2.0-6.8，加热水解，水解液过滤，滤液中加入乙醇，静置，分离沉淀并干燥，得到水溶性β葡聚糖。
[0007]所述步骤1中，将桦褐孔菌子实体粉碎后过50目的筛，得到粉末。
[0008]所述步骤1中，向粉末中加入5-20倍重量的碱液浸提取1-10小时，所用碱液的浓度优选是0.1-1.0摩尔/升。
[0009]所述步骤1中，过滤采用滤布进行过滤，其中滤布孔径为0.5-5微米。
[0010]所述步骤1或步骤3中，向滤液中加入1-4倍体积的无水乙醇静置2小时。
[0011]所述步骤2中，桦褐孔菌粗多糖干燥后加5-10倍重量的水搅拌，充分溶解。
[0012]所述步骤3中，碱液浓度是0.1-0.4摩尔/升；所述的加热水解优选为加热至80_100°C，水解时间为1-4小时。
[0013]本发明的有益效果:
1、解决了桦褐孔菌子实体中提取β葡聚糖的工业化生产问题；现有技术提取通常提取的是总多糖，而本发明的方法提取得到了 β葡聚糖，并可应用于工业生产。
[0014]2、解决β葡聚糖的水溶性问题，更有利于桦褐孔菌β葡聚糖的吸收利用和产品开发。分子量大的葡聚糖不溶于水本发明利用酸水解技术降低了大分子量桦褐孔菌多糖的分子量。提高了桦褐孔菌多糖的收率，增加了水溶性，更有利于人体吸收。
【具体实施方式】
[0015]实施例1
称取桦褐孔菌子实体1公斤粉碎，过50目的筛，粉末加0.1摩尔/升的氢氧化钠溶液5升浸提1小时，0.5微米孔径滤布的板筐过滤除去残渣，得滤液4.6升。滤液加18.4升的无水乙醇，静置2小时后用0.5微米孔径布的板筐过滤得沉淀，沉淀干燥后称重共150克。沉淀加750毫升水室温搅拌10分钟，加入1克真菌α淀粉酶液(山东杰诺生物酶有限公司)，用6摩尔/升的盐酸调节pH值至5.5，50摄氏度保温24小时。而后用0.5微米孔径布的板筐过滤，弃去滤液，残渣加1.0摩尔/升氢氧化钠0.8升搅拌提取2小时，提取液调酸碱度至pH2.0，于90摄氏度加热密封水解1小时，水解液0.5微米孔径布的板筐过滤，滤液加
3.2升无水乙醇，静置2小时后分离沉淀并干燥称重为110克红外光谱表明此产物为β葡聚糖，硫酸苯酚法测多糖含量为65%，高效液相凝胶色谱法测得平均分子量为2060道尔顿；经试验检测，所得到β葡聚糖具有良好的水溶性。
[0016]实施例2
称取桦褐孔菌子实体1公斤粉碎，过50目的筛，粉末加1摩尔/升的氢氧化钠溶液10升浸提5小时，0.5微米孔径滤布的板筐过滤除去残渣，得滤液7.2升。滤液加28.8升的无水乙醇，静置2小时后用0.5微米孔径布的板筐过滤得沉淀，沉淀干燥后称重共142克。沉淀加1.4升水室温搅拌10分钟，加入0.6克真菌α淀粉酶液(购自无锡澄星生物科技有限公司)，用2摩尔/升的盐酸调节pH值至5.8，50摄氏度保温24小时。而后用0.5微米孔径布的板筐过滤，弃去滤液，残渣加1.0摩尔/升氢氧化钠0.8升搅拌提取2小时，提取液调酸碱度至PH6.8，于100摄氏度加热密封水解4小时，水解液0.5微米孔径布的板筐过滤，滤液加3.2升无水乙醇，静置2小时后分离沉淀并干燥称重为102克，即为本发明物。红外光谱表明此产物为β葡聚糖，硫酸苯酚法测多糖含量为58%，高效液相凝胶色谱法测得平均分子量为198056道尔顿；经试验检测，所得到β葡聚糖具有良好的水溶性。
[0017]实施例3
称取桦褐孔菌子实体1公斤粉碎，过50目的筛，粉末加0.5摩尔/升的氢氧化钠溶液20升浸提10小时，2微米孔径滤布的板筐过滤除去残渣，得滤液16.8升。滤液加67.2升的无水乙醇，静置2小时后用2微米孔径布的板筐过滤得沉淀，沉淀干燥后称重共143克。沉淀加1升水室温搅拌10分钟，加入1克真菌α淀粉酶液(山东杰诺生物酶有限公司)，ρΗ值至5.5，50摄氏度保温24小时。而后用4微米孔径布的板筐过滤，弃去滤液，残渣加0.6摩尔/升氢氧化钠0.8升搅拌提取2小时，提取液调酸碱度至ρΗ5.8，于80摄氏度加热密封水解2小时，水解液2微米孔径布的板筐过滤，滤液加3.2升无水乙醇，静置2小时后分离沉淀并干燥称重为101克，即为本发明物。红外光谱表