一种葡萄糖检测试剂盒的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及临床体外检测试剂技术领域，特别涉及一种葡萄糖检测试剂盒。
【背景技术】
[0002] 葡萄糖（Glucose)(化学式C6H1206)又称为玉米葡糖、玉蜀黍糖，简称为葡糖。英 文别名Dextrose，Cornsugar，Grapesugar，Bloodsugar。是自然界分布最广且最为重要的 一种单糖，它是一种多羟基醛。纯净的葡萄糖为无色晶体，有甜味但甜味不如蔗糖（一般 人无法尝到甜味），易溶于水，微溶于乙醇，不溶于乙醚。水溶液旋光向右，故属于〃右旋糖 〃。葡萄糖在生物学领域具有重要地位，是活细胞的能量来源和新陈代谢中间产物，即生物 的主要供能物质。植物可通过光合作用产生葡萄糖。在糖果制造业和医药领域有着广泛应 用。
[0003] 它是自然界分布最广泛的单糖。葡萄糖含五个羟基，一个醛基，具有多元醇和醛的 性质。
[0004] 葡萄糖无色结晶或白色结晶性或颗粒性粉末；无臭，味甜，有吸湿性。易溶于水，在 碱性条件下加热易分解。应密闭保存。口服后迅速吸收，进入人体后被组织利用，也可转化 成糖原或脂肪贮存。正常人体每分钟利用葡萄糖的能力为每公斤体重6毫克。是一种能直 接吸收利用，补充热能的碳水化合物，是人体所需能量的主要来源，在体内被氧化成二氧化 碳和水，并同时供给热量，或以糖原形式贮存。能促进肝脏的解毒功能，对肝脏有保护作用。 是生物体内最为常见的能源物资。
[0005] 人血清或血浆中葡萄糖参考范围为3. 9~6. I mmol/L。葡萄糖的准确测定对于诊 断和治疗高血糖症和低血糖症十分重要。高血糖症可见于糖尿病、静脉输入含葡萄糖液体、 严重应激状态、脑血管意外。低血糖症可见于胰岛素用药、先天性碳水化合物代谢障碍和禁 食。通常在研究这些疾病时，还将葡萄糖测定与各种耐量试验和刺激试验一同进行。
[0006] 葡萄糖氧化酶（GOD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放出过氧化氢。 过氧化物酶（POD)在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，使色原性氧受体4-氨 基安替比啉（4-AA)和对羟基苯甲酸钠去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder反应。红色 醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。该方法是一种无需预处理样本，技术和设备要 求不高，而精密度和特异性更高的分析方法。由于该方法不需要昂贵的设备，可以实现自动 化，且可测定大量标本，因此受到临床广泛推广。但是普通的葡萄糖检测试剂中由于存在 酶，会使该试剂的稳定性受到影响，不利于试剂的长期保存，从而造成准确度差及浪费的不 良后果。
【发明内容】
[0007] 针对现有技术中存在的问题，本发明提供了一种葡萄糖检测试剂盒。该试剂盒与 常规的试剂盒相比，稳定性好，准确度高，线性范围好，分析灵敏度高，有利于试剂在临床上 的推广应用。
[0008] 本发明是通过以下措施实现的： 一种葡萄糖酶检测试剂盒，其特征在于，它包含试剂RU试剂R2和校准品，其中试剂Rl 组成为： 磷酸氢二钠 25 mmol/L 憐酸二氛钟 50 mmol/L 亚铁氰化钾 0. 05 mmol/L 对羟基苯甲酸钠 15 mmol/L 4-氨基安替比林 500 ymol/L 过氧化物酶 2000 U/L Triton X-100 0. 5% (V/V) 叠氮化钠 0· 5% (W/V) 试剂R2组成为： 磷酸氢二钠 25 mmol/L 憐酸二氛钟 50 mmol/L 葡萄糖氧化酶 24000U/L 乙二胺四乙酸二钠 10mmol/L 4-甲酰苯基硼酸 0.01% 葡甘露聚糖 0· 5-1 mg/mL NaCl 5mmol/L 丙二醇 20mg/mL 曲拉通100 1% BSA 0.l-lg/L〇
[0009] 所述试剂Rl和试剂R2在使用时的比例为Rl :R2=4 :1。
[0010] 本发明的试剂盒在具有双试剂功能的自动生化分析仪上进行，其具体使用方法见 图4。 本发明所使用的校准品为英国朗道公司生产的复合校准品。
[0011] 加入生理盐水、样本或校准品5 μ 1，之后再加入Rl试剂400 μ 1预孵育5min后读 取吸光度A1，之后再加入100μ1的试剂R2反应5min后，读取吸光度A2,并计算ΔΑ。
[0012] 本发明的有益效果： 本发明提供的葡萄糖酶显色法检测试剂盒，通过在试剂R2中加入了由4-甲酰苯基硼 酸（4-FPBA)、葡甘露聚糖、NaCl、丙二醇、曲拉通100、BSA组成的复合稳定剂，各组分协同作 用使试剂稳定性能优异，解决了酶长期保存不稳定这一难题，在试验中它能增加酶的稳定 时间，而不会影响酶的活性，从而有效地增强了试剂盒的稳定性，却不会对试剂的准确度和 分析灵敏度产生影响，有利于该试剂在市场中进一步的推广。
【附图说明】
[0013] 图1实施例2准确度验证实验检测结果与对照组检测结果相关性； 图2实施例3准确度验证实验检测结果与对照组检测结果相关性； 图3实施例4准确度验证实验检测结果与对照组检测结果相关性； 图4本发明试剂盒使用方法步骤。
【具体实施方式】
[0014] 为了更好的理解本发明，下面结合具体实施例来进一步详细说明。
[0015] 实施例1 市场上获得认可的一种准确度优异的葡萄糖试剂盒，它包括试剂RU试剂R2、校准品。
[0016] 其中试剂Rl组成为： 磷酸氢二钠 25 mmol/L 憐酸二氛钟 50 mmol/L 亚铁氰化钾 0. 05 mmol/L 对羟基苯甲酸钠 15 mmol/L 4-氨基安替比林 500 ymol/L 过氧化物酶 2000 U/L Triton X-100 0. 5% (V/V) 叠氮化钠 0· 5% (W/V) 试剂R2组成为： 磷酸氢二钠 25 mmol/L 憐酸二氛钟 50 mmol/L 葡萄糖氧化酶 24000U/L 乙二胺四乙酸二钠 10mmol/L 本实施例描述的试剂盒，在使用时，其测定方法是采用具有双试剂功能的东芝120自 动分析仪，操作如下： 加入生理盐水、样本或校准品5 μ 1，之后再加入Rl试剂400 μ 1预孵育5min后读取吸 光度A1，之后再加入100μ1的试剂R2反应5min后，读取吸光度A2,并计算ΔΑ。
[0017] 本实施例所使用的校准品为英国朗道公司生产的复合校准品。
[0018] 实施例2 一种葡萄糖检测试剂盒，它包括试剂RU试剂R2、校准品。
[0019] 其中试剂Rl组成为： 磷酸氢二钠 25 mmol/L 憐酸二氛钟 50 mmol/L 亚铁氰化钾 0. 05 mmol/L 对羟基苯甲酸钠 15 mmol/L 4-氨基安替比林 500 ymol/L 过氧