一种新型喹唑啉衍生物lu1502及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物医药领域，具体地涉及一种新型喹唑啉衍生物LU1502及其制备方 法和应用。
【背景技术】
[0002] 恶性肿瘤是一种严重威胁人类健康的常见病和多发病，近20年来，我国肿瘤死亡 率上升了29.42%。在35至59岁的中壮年人群中，肿瘤已列居各类死因之首。有数据显示:我 国肿瘤发病率约为200/10万人，每年新发病例约220万人以上，在治患者约600万人以上。月中 瘤的治疗方法有手术治疗，放射治疗和化学治疗。目前，化学治疗仍然是临床治疗肿瘤的主 要手段。寻找抗肿瘤药物是新药研究的热点之一。近些年来，4-氨基喹唑啉类化合物因具有 优良的生物活性，备受人们的广泛关注，成为生物学界和化学界学者们研究的热点。它们对 EGF受体或TOGF受体酪氨酸激酶产生较好的抑制作用，表现出具有抗肺癌、胃癌、结肠癌、乳 腺癌、胆囊癌和前列腺癌等的功效，抗菌，抗HIV，抗炎，治疗糖尿病等作用，如吉非替尼、厄 洛替尼、二甲苯磺酸拉帕替尼等上市药物。发明人发现，N-[(4-氟苯基）甲基]-4-N-[7-甲氧 基-6-[ 2- (1 -吡咯-2-基)羟乙基]喹唑啉-4-基]苯-1，4-二胺有一定抗肿瘤活性，发明人提 出与N-[(4-氟苯基）甲基]-4-N-[7-甲氧基-6-[2-(l-吡咯-2-基)羟乙基]喹唑啉-4-基]苯-1，4_二胺或者该化合物的药学上可接受的盐、溶剂化物或者药物前体或者立体异构体或者 互变异构体或者代谢物相关的发明。
【发明内容】
[0003] 发明目的：为解决现有技术中存在的问题，本发明提供一种新型喹唑啉衍生物 LU1502,其化学命名为N-[(4-氟苯基）甲基]-4-N-[7-甲氧基-6-[2-(l-吡咯-2-基)羟乙基] 喹唑啉-4-基]苯-1，4-二胺，其对MDA-MB-435、SK-BR-3、A549、HCT 116、MDA-MB-468 五株肿 瘤细胞增殖具有抑制活性。
[0004] 技术方案:为实现上述技术目的，本发明提供了一种新型喹唑啉衍生物LU1502,其 化学命名为N-[ (4-氟苯基）甲基]-4-N-[7-甲氧基-6-[2-(1 -吡咯-2-基)羟乙基]喹唑啉-4-基]苯-1，4-二胺，其结构式如下所示：
[0006]本发明进一步提出了上述新型喹唑啉衍生物LU1502的制备方法，包括如下步骤：
[0007] S1:在氮气保护下，将吡咯溶解于四氢呋喃，冰浴下缓慢滴加 EtMgBr乙醚溶液，搅 拌30分钟~2小时，反应液0~60°C搅拌30分钟~2小时，0~60°C加入溴乙酸甲酯搅拌30分 钟~2小时，生成化合物（1 )，即2-( 1-吡咯-2-基）乙酸酯；
[0008] S2:在氮气保护下，将化合物（1)溶解于四氢呋喃，冰浴下边搅拌边分批加入 LiAlH430分钟以上，得到还原产物化合物(2)，即2-(1-吡咯-2-基）乙醇；
[0009] S3:在氮气保护下，将化合物（2)与4-氯-7-甲氧基喹唑啉-6-醇、PPh3溶解于四氢 呋喃，在冰浴下边搅拌边分批加入DTAD，反应6小时以上，生成化合物（3)，即4-氯-7-甲氧 基-6-[2-(l-吡咯-2-基)羟乙基]喹唑啉；
[001 0] S4:氩气保护下，将1-氟-4-硝基苯、4-氟苯基甲胺和碳酸钠以DMS0溶解，100~120 °〇搅拌反应4~12小时，生成化合物(4)，即N-[(4-氟苯基）甲基]-4-硝基苯胺；
[0011] S5:在氮气保护下，以二氯甲烷为溶剂，在冰浴条件下将化合物（4)分批加入 Boc20,然后加入DMAP催化，搅拌反应4~12小时，进行仲胺基Boc保护，生成化合物(5)，即N-[(4-氟苯基）甲基]-N-(4-硝基苯基)氨基甲酸叔丁酯；
[0012] S6:将化合物(5)溶于甲醇，加入10 %Pd/C催化，通入H2，搅拌反应4~12小时，还原 成化合物(6)，即N-(4-氨基苯基)-N-[(4-氟苯基）甲基]氨基甲酸叔丁酯；
[0013] S7:将化合物(6)与化合物(3)溶于正丁醇，加三氟乙酸，在60~100°C搅拌反应1~ 6小时，生成化合物(7)，即N-[ (4-氟苯基）甲基]-N-[ (7-甲氧基-6-[2-(l-吡咯-2-基)羟乙 基]喹唑啉-4-基]氨基)苯基]氨基甲酸叔丁酯。
[0014] S8:将化合物(7)溶于二氯甲烷，加三氟乙酸，在25~100°C搅拌反应1~6小时，生 成化合物(8)，即N-[(4-氟苯基）甲基]-4-N-[7-甲氧基-6-[2-(l-吡咯-2-基)羟乙基]喹唑 啉-4-基]苯-1，4-二胺。
[0015] 优选地，步骤S1中，EtMgBr乙醚溶液的浓度为3M，滴速为5~10ml/min，EtMgBr乙 醚、溴乙酸甲酯、四氢呋喃、吡咯的用量比为100~500mL: 20~50g: 250~1000ml: 20~50g; 步骤S2中，LiAlH4的用量为每克化合物（1)加入0.25~2g。
[0016] 步骤S3中，所述的DTAD分3~6批加入，间隔2~4小时/次，其中，4-氯-7-甲氧基喹 唑啉-6-醇、PPh3、DTAD、化合物(2)的摩尔用量比为1:1:1:0.8~1.4。
[0017]步骤S4中，卜氟-4-硝基苯、4-氟苯基甲胺和碳酸钠的摩尔用量比为1:1:0.3~3。
[0018] 步骤S5中，所述的化合物⑷分3~6批加入B〇C2〇，间隔5~10分钟/次，其中，化合 物(4)、8〇〇20与01^3的摩尔用量比为1:0.8~1.5:0.8~1.5。
[0019] 步骤S6中，10%Pd/C的加入量为每lOmmol化合物(5)加入0.6~1.5g 10%Pd/C。
[0020] 步骤S7中，化合物(6)、化合物(3)、三氟乙酸的摩尔用量比为1:1:0.01~0.2。
[0021] 本发明进一步提出了上述新型喹唑啉衍生物在制备抗肿瘤剂中的应用。
[0022] 本发明同时提出一种药物组合物，该组合物包括上述权利要求1中所述的化合物 和药学上可接受的载体。
[0023] 更近一步地，本发明提出了上述化合物，或者上述的药物组合物在制备药剂中的 用途。
[0024]同时，本发明还提出了上述新型喹唑啉衍生物LU1502或者该化合物的药学上可接 受的盐、溶剂化物或者药物前体或者立体异构体或者互变异构体或者代谢物在制备抗肿瘤 剂中的应用。
[0025]最后，本发明提出了上述新型喹唑啉衍生物LU1502或者该化合物的药学上可接受 的盐、溶剂化物或者药物前体或者立体异构体或者互变异构体或者代谢物与一种或多种抗 癌药剂结合在制备用于治疗肿瘤的药物上的用途。
[0026]有益效果:本发明公开了一种新型喹唑啉衍生物LU1502,并采用MTT法评价其抑制 MDA-MB-435、SK-BR-3、A549、HCT 116、MDA-MB-468五株肿瘤细胞增殖活性，计算抑制这五种 肿瘤细胞增殖的IC5Q值，结果表明所制备的新型喹唑啉衍生物LU1502对上述肿瘤细胞具有 抑制作用，可用于制备抗肿瘤制剂。
【附图说明】
[0027] 图1为喹唑啉衍生物的合成路线图，其中：i )溴乙酸甲酯，EtMgBr，THF; i i ) THF， LiAlH4; iii)4-氯-7-甲氧基喹唑啉-6-醇，PPh3，DTAD，THF; iv)4-氟苯基甲胺，Na2C03，DMSO; v)B〇C2〇，DMAP;vi)MeOH，H2，Pd/C;vii)n-BuOH，TFA;viii)DCM，TFA。
【具体实施方式】
[0028]为了进一步阐述本发明，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它 们仅用来对本发明进行具体描述，不应当理解为对本发明的限制。
[0029]实施例1制备2-(1 -吡咯-2-基)乙酸酯(化合物1)。
[0030] 将500mL四氢呋喃置于2000mL的氮气保护的四颈圆底烧瓶中，加入50g吡咯。冰浴 下缓慢滴加266.8mL 3M EtMgBr乙醚溶液（滴速为5ml/min)并搅拌30min。反应液室温下搅 拌1小时，冰浴下滴加45.7g溴乙酸甲酯，反应液室温下再搅拌1小时。加入500mL of IN HC1 终止反应。反应液用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，饱和氯化钠水溶液洗3次。分出合 并的乙酸乙酯层，在250mL三角瓶中加入无水硫酸钠干燥6小时，减压过滤。滤液减压浓缩至 干，经柱层析得到19g(产率46 % )化合物1，为棕色油状。
[0031]实施例2制备2-(1 -吡咯-2-基）乙醇(化合物2)。
[0032] 将19g 2-(1-吡咯-2-基）乙酸酯(化合物1)溶解于200mL四氢呋喃，置于500mL的氮 气保护的四颈圆底烧瓶中，冰浴下分四批加入5.6g LiAlH4,每批间隔lOmin，然后搅拌 30min。往反应液中加入5.6mL水，15 % NaOH 16.8mL，室温搅拌1 Omin，终止反应。在250mL三 角瓶中加入无水硫酸钠干燥6小时，减压过滤。滤液减压浓缩至干，经柱层析得到10g(产率 66%)化合物2,为棕色油状。
[0033] 对制备的化合物2进行1H-NMR标准，结果如下：
[0034] 咕-匪!?：（300MHz，DMS〇-d6，ppm): δ8.52(brs，1H)，6.73-6.71 (m，1H)，6.19-6.14(m， 1H)，6·01-6·00(ι?，1H)，3.87-3.83(t，J = 5.7Hz，2H)，2.88-2.84(t，J = 5.7Hz，2H).
[0035] 实施例3制备4-氯-7-甲氧基-6-[2-(l-吡咯-2-基)羟乙基]喹唑啉(化合物3)。 [0036] 将12.6g 4-氯-7-甲氧基喹唑啉-6-醇，6g2-(l-吡咯-2-基）乙醇（化合物2)， 17. lgPPh3溶解于150mL四氢咲喃，置于250mL氮气保护的三颈圆底烧瓶中，冰浴下分批(分 三批，每批间隔2h)加入15g DTAD，室温搅拌过夜。反应混合物抽滤滤除固体残渣，滤液减压 浓缩至干。得到的残余物用经柱层析得到8.8g(产率54%)化合物3,为无色粉末。
[0037]实施例4制备N_[ (4-氟苯基）甲基]-4-硝基苯胺(化合物4)。
[0038] 将10gl-氟-4-硝基苯，8.86g 4-氟苯基甲胺溶解于100mL DMS0,22.6g碳酸钠置于 250mL氩气保护的三颈烧瓶中，100°C搅拌过夜，冰浴冷却至室温。反应液加200mL冰水，减压 过滤，1 OOmL乙醚洗涤滤渣，得到12g(产率69 % )化合物4，为黄色粉末。
[0039] 实施例5制备N-[(4_氟苯基）甲基]-N_(4-硝基苯基)氨基甲酸叔丁酯(化合物5)
[0040] 将3g N-[ (4-氟苯基）甲基]-4-硝基苯胺(化合物4)(分3批加入，每批间隔5min)和 4g B〇C20溶解于100mL二氯甲烷，置于250mL氮气保护的三颈烧瓶中，冰浴下分批(分3批，每 批间隔lOmin)加入2.23g DMAP，室温搅拌过夜。反应液补加200mL二氯甲烷，100mL 1M HC1 溶液洗1次，1 OOmL饱和氯化钠水溶液洗1次。分出二氯甲烷层，在250mL三角瓶中加入无水硫 酸钠干燥6小时，减压过滤。滤液减压浓缩至干，经柱层析得到3.4g(产率81%)化合物5,为 无色粉末。
[0041] 实施例6制备N-[(4-氟苯基）甲基]-N-(4-氨基苯基)氨基甲酸叔丁酯(化合物6)
[0042] 将3.4g N-[(4_氟苯基）甲基]-N_(4-硝基苯基)氨基甲酸叔丁酯(化合物5)溶解于 100mL甲醇，置于250mL圆底烧瓶中，加1.5g 10%钯碳，通入足量氢气。室温搅拌过夜后，减 压过滤，滤液浓缩至干，得到2.8g (产率90 % )化合物6，为黄色粉末。
[0043] 实施例7制备N-[(4-氟苯基）甲基]-N-[(7-甲氧基-6-[2-(l-吡咯-2-基)羟乙基] 喹唑啉-4-基]氨基)苯基]氨基甲酸叔丁酯(化合物7)
[0044] 将2.8g4-氯-7-甲氧基喹唑啉-6-[2-(l-吡咯-2-基)羟乙基]喹唑啉（化合物3)， 3