照药剂，本 发明的式(I)所表示的化合物对水稻白叶枯病菌和柑橘溃疡病菌等细菌，小麦赤霉病菌、辣 椒枯萎病菌、苹果腐烂病菌、黄瓜灰霉病菌、油菜菌核病菌和番茄灰霉病菌等真菌都表现出 了一定或优良的抑制活性，如化合物F11和F19在200和100 yg/mL浓度下对水稻白叶枯病菌 和柑橘溃疡病菌的抑制率都达到100%;另一方面，在六种受试真菌中该类化合物对油菜菌 核病菌表现出了最优良的抑制活性。
[0021] 实施例二十六:抗植物病原真菌活性实验(抑制菌丝生长速率法） 采用抑制菌丝生长速率法，用式（I)化合物对小麦赤霉病菌、辣椒枯萎病菌、苹果腐烂 病菌、黄瓜灰霉病菌、油菜菌核病菌和番茄灰霉病菌进行了抗真菌活性测试，以杀菌剂氟环 唑为阳性对照药剂，样品浓度为50 yg/mL。
[0022]用电子天平准确称量5 mg受试药剂，用1 mL DMS0溶解，加入9 mL 0.1%吐温-20溶 液定容至10 mL，将配好的药剂加入到90 mL PDA培养基(40-50 °C)中，充分摇匀，即配成浓 度为50 yg/mL试样，将其倒入灭菌后的培养皿中，设置三次重复，同时设置空白对照。以受 试菌种为筛选对象，用4 mm打孔器将生长正常的菌落打孔制成若干菌饼备用，用接种针将 菌饼移接到平板中央，每皿接一个菌饼，置于27 °C恒温培养箱培养24-72小时，测量菌斑直 径，每个菌落按十字交叉法测量2次。以其平均数代表菌落的大小，抑菌率计算公式如下： 抑菌率=(对照菌斑直径-样品菌斑直径)/(对照菌斑直径-0.4) X 100% 表1为式(I)中化合物对受试植物真菌的抑菌活性测定结果。
[0023]实施例二十七:抗植物病原细菌活性实验(浑浊度法） 采用浑浊度法，以水稻白叶枯病菌和柑橘溃疡病菌为测试对象，以商品化杀菌剂叶枯 唑为阳性对照药剂，在样品浓度为200和100 yg/mL浓度下，对式（I)化合物进行了离体抗细 菌活性筛选。
[0024] 将药剂和对照药剂分别配置成浓度为200和100 yg/mL，并将其分别加入到NB液体 培养基的试管中，测定0D值，该值为无菌培养基0D值。然后接入受试菌种，在28 °C、180 rpm 恒温摇床振荡培养24-48 h，将各个浓度的菌液在分 光光度计上测定0D值，该值为含菌培养基的0D值。
[0025]校正0D值=含菌培养基0D值-无菌培养基0D值 抑菌率=(校正后对照培养基0D值-校正后样品培养基0D值)/校正后对照培养基0D值X 100% 表2为式(I)中化合物对受试的植物细菌抑制活性测定结果。
[0026]本发明的化合物作为杀菌剂使用时，可将本发明的化合物与其他植保上允许的载 体和稀释剂混合，借此将其调制成通常使用的各种剂型，如混剂、颗粒剂、水乳剂等来使用， 也可以与其他农药如杀菌剂、杀虫剂、除草剂、植物生长调节剂等混合使用或同时并用。
【主权项】
1. 一种含I，2，4-三唑硫酮希夫碱的喹唑啉酮类化合物，其特征在于：其通式为下式 (I)：其中：R为苯基、2-吡啶基、3-吲哚基、3-甲氧基-4-羟基苯基、2-萘基、邻甲氧基苯基、对 叔丁基苯基、对甲基苯基、3-羟基-4-甲氧基苯基、邻/对氯苯基、2，3-二氯苯基、3，4-二氯苯 基、邻/间/对氟苯基、邻/间/对溴苯基、邻/间/对硝基苯基、2，3，4-三甲氧基苯基、3，4，5-三 甲氧基苯基、2,4,6_三甲氧基苯基。2. 根据权利要求1所述的化合物，其特征在于:部分合成的化合物如下： FI: 3-((4-(苄烯氨基）-5-硫酮-4,5-二氢-1H-1，2，4_三唑-3-基）甲基）喹唑啉-4 (3H)-酮； F2: 3-( (4-((吡啶-2-甲烯）氨基)-5-硫酮-4，5-二氢-1H-1，2，4-三唑-3-基）甲基）喹 唑啉-4(3H)_酮； F3: 3-((4-( ((IH-吲哚-3-甲烯）氨基)-5-硫酮-4,5-二氢-1H-1，2，4_三唑-3-基）甲 基)喹唑啉-4(3H)-酮； F4: 3-( (4-( (3-甲氧基-4-羟基苄烯)氨基)-5-硫酮-4，5-二氢-1H-1，2，4-三唑-3-基） 甲基)喹唑啉-4(3H)_酮； F5: 3-( (4-((萘-2-甲烯)氨基)-5-硫酮-4,5-二氢-1H-1，2，4_三唑-3-基）甲基）喹唑 啉-4(3H)_酮； F6: 3- ((4-( (2-甲氧基苄烯)氨基)-5-硫酮-4，5-二氢-1H-1，2，4-三唑-3-基）甲基)喹 唑啉-4(3H)_酮； F7: 3-((4-((4-叔丁基苄烯)氨基)-5-硫酮-4,5-二氢-1H-1，2,4-三唑-3-基）甲基）喹 唑啉-4(3H)_酮； F8: 3-((4-( (4-甲基苄烯)氨基)-5-硫酮-4,5-二氢-1H-1，2，4_三唑-3-基）甲基）喹唑 啉-4(3H)_酮； F9: 3-( (4-( (3-羟基-4-甲氧基苄烯)氨基)-5-硫酮-4，5-二氢-1H-1，2，4-三唑-3-基） 甲基)喹唑啉-4(3H)_酮； FlO: 3-( (4-( (2-氯苄烯)氨基)-5-硫酮-4,5-二氢-1H-1，2，4_三唑-3-基）甲基）喹唑 啉-4(3H)_酮； F11: 3-((4-( (4-氯苄烯)氨基)-5-硫酮-4,5-二氢-1H-1，2，4_三唑-3-基）甲基）喹唑 啉-4(3H)_酮； F12: 3-((4-((2,3-二氯苄烯)氨基)-5-硫酮-4,5-二氢-1!1-1，2,4-三唑-3-基）甲基） 喹唑啉-4(3H)-酮； F13: 3-((4-((3,4-二氯苄烯)氨基)-5-硫酮-4,5-二氢-1!1-1，2,4-三唑-3-基）甲基） 喹唑啉-4(3H)-酮； F14: 3-((4-((2-氟苄烯)氨基)-5-硫酮-4,5-二氢-1H-1，2,4-三唑-3-基）甲基）喹唑 啉-4(3H)_酮； F15: 3-( (4-( (3-氟苄烯)氨基)-5-硫酮-4,5-二氢-1H-1，2，4_三唑-3-基）甲基）喹唑 啉-4(3H)_酮； F16: 3-( (4-( (4-氟苄烯)氨基)-5-硫酮-4,5-二氢-1H-1，2，4_三唑-3-基）甲基）喹唑 啉-4(3H)_酮； F17: 3-( (4-( (2-溴苄烯)氨基)-5-硫酮-4,5-二氢-1H-1，2，4_三唑-3-基）甲基）喹唑 啉-4(3H)_酮； F18: 3-( (4-( (3-溴苄烯)氨基)-5-硫酮-4,5-二氢-1H-1，2，4_三唑-3-基）甲基）喹唑 啉-4(3H)_酮； F19: 3-( (4-( (4-溴苄烯)氨基)-5-硫酮-4,5-二氢-1H-1，2，4_三唑-3-基）甲基）喹唑 啉-4(3H)_酮； F20: 3-( (4-( (2-硝基苄烯）氨基)-5-硫酮-4,5-二氢-1H-1，2，4_三唑-3-基）甲基）喹 唑啉-4(3H)_酮； F21: 3-( (4-((3-硝基苄烯）氨基)-5-硫酮-4，5-二氢-1H-1，2，4-三唑-3-基）甲基）喹 唑啉-4(3H)_酮； F22: 3-( (4-((4-硝基苄烯）氨基)-5-硫酮-4，5-二氢-1H-1，2，4-三唑-3-基）甲基）喹 唑啉-4(3H)_酮； F23: 3-((4-((2，3，4_三甲氧基苄烯)氨基)-5-硫酮-4，5-二氢-1H-1，2，4_三唑-3-基） 甲基)喹唑啉-4(3H)_酮； F24: 3-((4-((3,4,5-三甲氧基苄烯)氨基)-5-硫酮-4,5-二氢-1!1-1，2,4-三唑-3-基） 甲基)喹唑啉-4(3H)_酮； F25: 3-((4-((2，4，6_三甲氧基苄烯)氨基)-5-硫酮-4，5-二氢-1H-1，2，4_三唑-3-基） 甲基)喹唑啉-4(3H)_酮。3.按照权利要求1或2所述的含1，2，4_三唑硫酮希夫碱的喹唑啉酮类化合物的合成方 法，其特征在于：以邻氨基苯甲酸甲酯、甲酰胺、溴乙酸乙酯、水合肼、二硫化碳、氢氧化钾和 芳醛为原料，经下列六步合成得到：4.如权利要求1或2所述的含I，2，4-三唑硫酮希夫碱的喹唑啉酮类化合物的合成方法， 其特征在于:合成步骤和工艺条件为： 第一步:喹唑啉-4-酮的制备 三口烧瓶内依次加入邻氨基苯甲酸甲酯、甲酸和甲酰胺，升温至130-140 °C回流反应； 6-8 h后停止反应，冷却至室温后，将反应液倒入适量的冷水中，有大量白色固体析出，继续 搅拌0.5 h，抽滤、水洗、烘干，无水乙醇重结晶得到白色絮状产物； 摩尔比：邻氨基苯甲酸甲酯：甲酰胺：甲酸=1:5.5:1.3 反应温度：130-140 °C 反应时间:6-8 h 第二步:2- (4-氧代喹唑啉-3- (4H)-基）乙酸乙酯的制备 单口瓶中加入喹唑啉-4-酮和碳酸钾，然后加入适量丙酮搅拌使其分散均匀，于室温下 缓慢滴加溴乙酸乙酯的丙酮溶液，滴加完毕后升温回流反应3-4 h后停止反应，冷却至室温 后将反应液倒入冰水中，析出大量白色固体，抽滤，水洗，烘干得产物； 摩尔比：喹唑啉-4-酮:碳酸钾:溴乙酸乙酯=1:1.5:1.5 反应温度:70-90 °C 反应时间:3-4 h 第三步:2-(4-氧代喹唑啉-3-(4H)_基）乙酰肼的制备 单口瓶中加入2-(4-氧代喹唑啉-3-(4H)_基）乙酸乙酯、无水乙醇和水合肼，升温回流 反应，2-3 h后停止反应，冷至室温，抽滤，无水乙醇重结晶得白色固体； 摩尔比：2-(4-氧代喹唑啉-3-(4H)-基）乙酸乙酯:水合肼=1:5.2 反应温度:80-100 °C 反应时间:2-3 h 第四步:2- (2- (4-氧代喹唑啉-3 (4H)-基）乙酰基)肼基二硫代甲酸钾盐的制备 单口瓶中加入氢氧化钾和无水乙醇，搅拌待其完全溶解后缓慢加入2-(4-氧代喹唑啉-3-(4H)_基）乙酰肼，此时体系为白色浑浊液;加入二硫化碳后于室温氮气保护下继续反应， 0.5 h左右体系产生大量白色沉淀，6 h后停止反应，抽滤，无水乙醇洗涤数次，烘干得淡黄 色固体，直接进行下一步反应； 摩尔比：2-(4-氧代喹唑啉-3-(4H)_基）乙酰肼:氢氧化钾=1:1.7 反应温度:20-25 °C 反应时间:6-8 h 第五步:3-( (4-氨基-5-硫酮-4，5-二氢-1H-1，2，4-三唑-3-基）甲基)喹唑啉-4(3H)-酮 的制备 单口瓶中加入2-(2-(4-氧代喹唑啉-3(4H)_基）乙酰基)肼基二硫代甲酸钾盐和无水乙 醇，搅拌均匀后加入水合肼并升温回流反应，体系由白色浑浊变为浅绿色溶液，待体系再变 为墨绿色澄清液时停止反应，冷却至室温后加适量水，用10%盐酸调pH至5.0左右，此时析出 大量白色固体，抽滤，滤饼重结晶后得到产物； 反应温度:80-100 °C 反应时间:5-7 h 第六步：3-( (4-(取代苄烯氨基)-5-硫酮-4，5-二氢-1H-1，2，4_三唑-3-基）甲基）喹唑 啉-4 (3H)-酮的制备 单口瓶中依次加入3-( (4-氨基-5-硫酮-4，5-二氢-1H-1，2，4-三唑-3-基）甲基）喹唑 啉-4(3H)_酮和醋酸，搅拌均匀后加入芳醛并升温回流反应，TLC跟踪反应待氨基三唑完全 转化后停止反应;冷却至室温后析出固体，抽滤，滤饼用无水乙醇洗涤； 摩尔比：3-((4-氨基-5-硫酮-4,5-二氢-1H-1，2，4_三唑-3-基）甲基）喹唑啉-4(3H)_ 酮:芳醛=1:1.3 反应温度：100-120 °C 反应时间:3-7 h 上述步骤适用于通式(I)中所有化合物的合成。5. 如权利要求1或2所述的一种含1，2,4-三唑硫酮希夫碱的喹唑啉酮类化合物的应用， 其特征在于:用作制备防治植物病原菌的药物和药剂。6. 如权利要求1或2所述的一种含1，2，4_三唑硫酮希夫碱的喹唑啉酮类化合物的应用， 其特征在于:用作制备防治水稻白叶枯病菌和柑橘溃疡病菌细菌，小麦赤霉病菌、辣椒枯萎 病菌、苹果腐烂病菌、黄瓜灰霉病菌、油菜菌核病菌和番茄灰霉病菌真菌的药物和药剂。7. 如权利要求2所述的一种含1，2，4-三唑硫酮希夫碱的喹唑啉酮类化合物的应用，其 特征在于:化合物Fl 1和F19对水稻白叶枯病菌和柑橘溃疡病菌都表现出较对照药剂叶枯唑 更为优良的抑制活性。8. 如权利要求2所述的一种含1，2，4-三唑硫酮希夫碱的喹唑啉酮类化合物的应用，其 特征在于:所合成的该类化合物对油菜菌核病原真菌表现出了中等到优良的抑制活性。9. 如权利要求2所述的一种含1，2，4-三唑硫酮希夫碱的喹唑啉酮类化合物的应用，其 特征在于:化合物F4、F5、F6、F8、F9、Fl 7和F25表现出了较广谱的抗真菌活性。
【专利摘要】本发明公开了一种防治植物病原菌作用的化合物—含1,2,4-三唑硫酮希夫碱的喹唑啉酮类化合物的制备方法及其抑菌活性，是由下列通式(<b>I</b>)表示的化合物及其制备方法。本发明介绍了以邻氨基苯甲酸甲酯、甲酰胺、溴乙酸乙酯、水合肼、二硫化碳、氢氧化钾和芳醛为原料，经闭环、烷基化、肼解、成盐、再闭环和希夫碱反应共六步合成了含1,2,4-三唑硫酮希夫碱的喹唑啉酮类目标化合物。本发明化合物<b>F11</b>和<b>F19</b>在200和100？mg/mL浓度下对水稻白叶枯病菌和柑橘溃疡病菌都表现出了较对照药剂叶枯唑更好的抑制活性；所合成的这类化合物对油菜菌核病菌表现出了中等到优良的抑制活性，化合物<b>F4</b>、<b>F5</b><b>、</b><b>F6</b>、<b>F8</b><b>、</b><b>F9</b><b>、</b><b>F17</b>和<b>F25</b>对六种受试真菌表现出了较广谱的抑制活性。
【IPC分类】A01P1/00, C07D403/14, A01P3/00, C07D401/14, C07D403/06
【公开号】CN105524047
【申请号】CN201510987905
【发明人】鲍小平, 闫柏任, 杨岚, 范治江
【申请人】贵州大学
【公开日】2016年4月27日
【申请日】2015年12月27日