一种碱水-超声波协同提取植物中有机酸的方法
【技术领域】
[0001 ]本发明涉及植物提取技术领域，特别涉及一种植物中有机酸的提取方法。
【背景技术】
[0002] 有机酸类（Organic acids)是分子结构中含有羧基(一C00H)的化合物。在中草药 的叶、根、特别是果实中广泛分布，如乌梅、五味子，覆盆子等。常见的植物中的有机酸有脂 肪族的一元、二元、多元羧酸如酒石酸、草酸、苹果酸、枸椽酸、抗坏血酸（即维生素 C)等，亦 有芳香族有机酸如苯甲酸、水杨酸、咖啡酸(Caffelc acid)等。除少数以游离状态存在外， 一般都与钾、钠、钙等结合成盐，有些与生物碱类结合成盐。脂肪酸多与甘油结合成酯或与 高级醇结合成蜡。
[0003] 常规的植物有机酸的提取方法一般有水提法、有机溶剂提取法、超声波提取法等。 例如中国专利201310472558.5"食用土当归总有机酸提取纯化工艺"先采用乙醇回流提取， 加入NaCl进行盐析，再加入低价(极)性有机溶剂萃取，加入Κ0Η进行碱化处理，加浓盐酸 进行酸沉，加入NaCl进行盐析，再加入低价性有机溶剂萃取，最后进行浓缩减压干燥，即得 到食用土当归总有机酸提取物。中国专利申请201410169677.8 "核桃柏提取物及其制备方 法和应用"是把核桃柏经石油醚或超临界提取后过滤得滤渣，滤渣再用水或醇溶液提取， 减压浓缩得浸膏，浸膏总有机酸含量在30%以上。中国专利201110239056.9"芫根有机酸制 备降血糖药物的用途"将芫根原料用乙醇溶液浸泡，加热回流提取数次，合并提取液，过 滤;减压浓缩成浸膏；浸膏加少量水溶解，大孔吸附树脂吸附，洗脱，收集洗脱液，浓缩、干 燥，芫根有机酸得率为〇. 5~2重量％，纯度为41 %~77 %。
【发明内容】
[0004] 本发明所要解决的技术问题是提供一种碱水-超声波协同提取植物中有机酸的方 法，该方法相比于现有的提取方法具有提取率更高，工艺稳定，重复性好，精密度高，省时节 能、安全可靠、操作简单的优点。
[0005] 本发明所要解决的技术问题通过以下技术方案予以实现： 一种碱水-超声波协同提取植物中有机酸的方法:取待提植物，加工成粉末或小块，加 碱性水溶液，超声波提取，滤过，滤液用稀酸调节pH至酸性，静置，过滤，所得沉淀物即所提 植物的有机酸。
[0006] 优选的，所述碱性水溶液为氢氧化钠水溶液、磷酸氢二钠水溶液、磷酸二氢钠水溶 液、磷酸氢钠水溶液、磷酸钠水溶液中的一种，优选为氢氧化钠水溶液。
[0007] 优选的，所述碱性水溶液的浓度为0.8~1.2 mol · I/1。
[0008] 优选的，所述碱性水溶液的pH为9~11。
[0009]优选的，滤液用稀酸调节pH至3~5。
[0010] 优选的，所述待提取的植物与碱性水溶液的料液比为1~10:10。
[0011] 优选的，超声提取的温度为50~80°C。
[0012]更进一步优选的，所述碱性水溶液的浓度为1. o mol · I/1，碱性水溶液的pH为10， 滤液用稀酸调节pH至4,所述待提取的植物与碱性水溶液的料液比为1:10。所述植物为草珊 瑚。
[0013] 本发明具有如下有益效果： 本发明的提取方法中，超声波具有剪切作用和冲击波能，使植物细胞璧破碎或变形，细 胞内化学成分容易渗出，碱能与有机酸结合生成盐，提高有机酸从细胞内渗出的速度和渗 出量，从而提高提取效率，再通过酸化作用，使有机酸游离出来，去除大部分的杂质，所得产 品纯度更高。本发明的碱水-超声波法提取草珊瑚中有机酸类成分，工艺稳定，提取率提高， 杂质减少，操作简单、速度快。
【附图说明】 [0014] 图1为富马酸与草珊瑚吸收光谱图。
[0015] 图2为富马酸标准曲线图。
[0016] 图3碱种类-吸光度变化。
[0017] 图4碱液浓度-吸光度变化。
[0018] 图5碱水pH-吸光度变化。
[0019]图6沉淀pH值-吸光度变化。
[0020]图7提取时间-吸光度变化。
[0021]图8提取温度-吸光度变化。
[0022]图9料液比-吸光度变化。
【具体实施方式】
[0023]下面结合实施例对本发明进行详细的说明，实施例仅是本发明的优选实施方式， 不是对本发明的限定。
[0024]下面以草珊瑚为例，通过实验来说明本发明的效果： 草珊瑚，又叫肿节风、九节茶、满山香、九节风、接骨木等，为金粟兰科植物草珊瑚 (Sarcandra glabra(Thunb.) Nakai)的干燥全草，含黄酮、有机酸、酸酸、縣质、香豆素和内 酯等成分，具有清热凉血、镇痛消炎、活血通络、祛风消斑等作用，已有草珊瑚含片、肿节风 注射液等多种剂型上市。王钢力、罗永明等发现草珊瑚含24种有机酚酸，如富马酸、琥珀酸、 原儿茶酸、棕榈酸、硬脂酸、绿原酸、迷迭香酸。
[0025] 1实验材料与方法 实验药品 富马酸(北京百灵威科技有限公司产品），分析纯试剂。草珊瑚药材，2014年10月购于广 西南宁北京同仁堂药店，经笔者鉴定为金粟兰科植物草珊瑚[Sarcandra glabra(Thunb.) Nakai ]的干燥全草，粉碎成粗粉，备用。
[0026] 主要仪器设备 三源超声波清洗器(东莞三源超声波设备有限公司产品）;UV-2550岛津-紫外可见分光 光度计(深圳市瑞盛科技有限公司销售）;pH计(上海一恒科学仪器有限公司产品）。
[0027]实验方法 1标准曲线的制备 对照品溶液的制备精密称取10 mg富马酸，60%乙醇溶解并定容到25 mL量瓶中，摇 勾，即得。
[0028]样品溶液的制备精密称取草珊瑚粉末0.500 g，置具塞锥形瓶中，加60%乙醇20 mL，密塞，混匀，超声提取30 min，滤过，取续滤液1 mL置10 mL量瓶中，加60%乙醇至刻度， 摇匀，即得。光谱扫描取对照品溶液和样品溶液各1 mL，分别置10 mL量瓶中，依次加无水 乙醇2 mL、0.08 mol · L-1的盐酸羟胺溶液1 mL、0.04 mol · L-1的DCC溶液1 mL，摇匀，60 °C水浴15 min，加0.04 mol .Γ1的高氯酸铁溶液1 mL，加无水乙醇至刻度，摇匀，在200~700 nm的范围进行波长扫描。结果表明，富马酸与草珊瑚吸收光谱图相似，在520 nm处有最大吸 收波长，见图1。
[0029]标准曲线的绘制分别取对照品溶液1~6 mL置10 mL量瓶中，加甲醇至刻度。按上 法在520 nm处测定吸光度，以浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方 程式7= 0.00451+0.0099，相关系数妒=0.9992，结果表明，富马酸在40~240以8.1111/1浓度 范围内与吸光度呈良好的线性关系，见图2。
[0030] 2提取方法的比较 冷浸法取0.5 g草珊瑚粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，加10倍量水，密塞，室温放 置3 d，每天振摇2次，每次5 min，滤过。
[0031] 煎煮法取0.5 g草珊瑚粉末，精密称定，置不锈刚锅中，加10倍量水，浸泡30 min 后，加热到沸，改用小火，保持微沸120 min，滤过。
[0032] 微波萃取法取0.5 g草珊瑚粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，加 10倍量水，浸泡 30 min置微波炉中，60 °C提取30 min，滤过。
[0033]超声波提取法取0.5g草珊瑚粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，加10倍量水，浸 泡30 min密塞，置超声波清洗器中，60 °C提取5 min，滤过。
[0034]以上各法所得滤液均置10 mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，60 min内按上法测定吸 光度