一种葛仙米多糖及其提取方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及化工技术领域，尤其涉及一种葛仙米多糖及其提取方法。
【背景技术】
[0002] 葛仙米是念珠藻属(Nostoc Vauch)中的拟球状念珠藻(Nostoc sphaeoides Κ? tzing)的俗称，它属于蓝藻门（Cyanophyta)，蓝藻纲（Cyanophyceae)，念珠藻目 (Nostocales)，念珠藻科(Nostocaceae)。又称天仙米、天仙菜、珍珠菜、水木耳、田木耳，是 我国传统出口的一种珍贵野生食药两用淡水固氮蓝藻。
[0003] 葛仙米在我国历史悠久，不仅是一道营养丰富的传统佳肴，而且具有较高的医疗 和保健功效。据记载，葛仙米有治疗夜盲症，脱肛，烫伤和兼具美容之功效，另外还具有明目 益气、解热清膈、利肠胃、久食延年、消除疲劳、收敛等功效。葛仙米富含蛋白质、维生素和微 量元素，还含有多种具有生物活性的多糖，早在东晋就被作为一种美食和中草药成分，在民 间广为流传。
[0004] 随着藻类产业的兴起与稳步发展，藻类多糖的抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、抗辐射以 及免疫调节等功效正逐渐被人们所认识和接受，为这类产物成为药物、功能食品或化妆品 提供了基础。
[0005] 目前，葛仙米多糖采用的传统提取方法耗能耗时，工序较多，并且要使用大量的乙 醇进行醇沉，成本较高。因此本发明提供了一种制备方法简单，而且不需要使用有机溶剂， 即可得到的较高纯度的葛仙米多糖及其提取方法。
【发明内容】
[0006] (一)要解决的技术问题
[0007] 本发明要解决的技术问题是提供了一种葛仙米多糖及其提取方法，既能够有效提 尚#仙米多糖的纯度，又能够有效提尚其制备效率并降低提取成本。
[0008] (二)技术方案
[0009] 为了解决上述技术问题，本发明提供了一种葛仙米多糖的提取方法，包括如下步 骤：
[0010]步骤一:备料:精选葛仙米为原料，将其烘干，干燥温度为50~80°C，时间1~5h，然 后将干燥后的葛仙米进行粉碎，过50~100目筛，得到葛仙米粉；
[0011] 步骤二:浸泡:用纯化水浸泡所述葛仙米粉，所述葛仙米粉与纯化水的重量比为1: 10~80，浸泡时间2~24h，得到浸泡后的葛仙米；
[0012] 步骤三:水提:在所述浸泡后的葛仙米中再加入纯化水，其中，所述葛仙米粉与纯 化水的重量比为1:8~20，提取温度为80~100°C，提取时间1~5h，过滤去渣，得到提取液；
[0013] 步骤四：酶解:将所述提取液加热到40~70°C，向所述提取液中加入占所述提取液 体积的〇. 〇〇 1 %~1. 〇 %的蛋白酶（1 〇4u/g) (w/v)，酶解1~6h，然后加热至90~100 °C，保持5 ~15min，灭活酶，再降至室温，离心去渣，得到酶解液；
[0014] 步骤五:超滤:使用超滤设备将所述酶解液一次分离、或者使用多种分子量规格的 超滤膜将所述酶解液进行多次分离，所述超滤膜的截留分子量规格范围为1000道尔顿~ 500万道尔顿，超滤过程中的压力控制为1.0~2. OMpa，得到分离液；
[0015] 步骤六:浓缩:对所述分离液进行反渗透膜浓缩或者真空浓缩，浓缩至原体积的 0.1~0.5倍，得到浓缩液;其中，所述反渗透膜浓缩的料液温度<40°C，压力控制为1.0~ 2. OMpa;真空浓缩的温度为40~80°C，真空度为-0.06至-0.0 IMpa;
[0016] 步骤七：灭菌：对所述浓缩液进行杀菌，杀菌温度为80~135 °C，杀菌时间为5~ 1200s，得到杀菌后的浓缩液；
[0017]步骤八:干燥:对所述杀菌后的浓缩液进行冷冻干燥或者真空干燥，即得葛仙米多 糖成品；其中，冷冻干燥的温度为-18°C至-24°C，时间为20~24h;真空干燥的温度为40~80 °C，时间为3~12h。
[0018]为了使本发明所述的葛仙米多糖的提取方法提取的葛仙米多糖具有纯度更高，外 观更佳的优点，对葛仙米多糖的提取方法进行优化，优选本发明所述的葛仙米多糖的提取 方法包括如下步骤：
[0019]步骤一:备料:精选葛仙米为原料，将其烘干，干燥温度为50~80°C，时间1~5h，然 后将干燥后的葛仙米进行粉碎，过50~100目筛，得到葛仙米粉；
[0020] 步骤二:浸泡:用纯化水浸泡所述葛仙米粉，所述葛仙米粉与纯化水的重量比为1: 10~80，浸泡时间2~24h，得到浸泡后的葛仙米；
[0021] 步骤三:水提:在所述浸泡后的葛仙米中再加入纯化水，其中，所述葛仙米粉与纯 化水的重量比为1:8~20，提取温度为80~100°C，提取时间1~5h，过滤去渣，得到提取液； [0022]步骤四：酶解:将所述提取液加热到40~70°C，向所述提取液中加入占所述提取液 体积的〇. 01 %-〇. 5 %的蛋白酶，酶解1~6h，然后加热至90~100°C，保持5~15min，灭活酶， 再降至室温，离心去渣，得到酶解液；
[0023] 步骤五:超滤:使用超滤设备将所述酶解液一次分离、或者使用多种分子量规格的 超滤膜将所述酶解液进行多次分离，所述超滤膜的截留分子量规格范围为1万道尔顿~100 万道尔顿，超滤过程中的压力控制为1. 〇~2. OMpa，得到分离液；
[0024] 步骤六:浓缩:对所述分离液进行反渗透膜浓缩或者真空浓缩，浓缩至原体积的 0.1~0.5倍，得到浓缩液；其中，所述反渗透膜浓缩的温度<40 °C，压力控制为1.0~ 2. OMpa;真空浓缩的温度为40~80°C，真空度为-0.06至-0.0 IMpa;
[0025] 步骤七：灭菌：对所述浓缩液进行杀菌，杀菌温度为80~135 °C，杀菌时间为5~ 1200s，得到杀菌后的浓缩液；
[0026] 步骤八:干燥:对所述杀菌后的浓缩液进行冷冻干燥或者真空干燥，即得葛仙米多 糖成品；其中，冷冻干燥的温度为-18°C至-24°C，时间为20~24h;真空干燥的温度为40~80 °C，时间为3~12h。
[0027] 为了确保本发明所述的葛仙米多糖的提取方法中，酶解效果好，优选地，在步骤四 中，所述蛋白酶为木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、猕猴桃蛋白酶中的一种或者几种。
[0028] 为了确保本发明所述的葛仙米多糖的提取方法中，所用的蛋白酶的活性高、热稳 定性好、天然卫生安全，优选地，在步骤四中，所述的蛋白酶为木瓜蛋白酶。
[0029]进一步优选的，在步骤四中，加入所述提取液体积的0.05%的木瓜蛋白酶。
[0030] 为了确保本发明所述的葛仙米多糖的提取方法中，为了确保过滤效果好、精度高， 优选地，在步骤五中，所述的一次性分离使用的超滤膜的截留分子量为1万道尔顿。
[0031] 为了确保本发明所述的葛仙米多糖的提取方法中，为了确保过滤效果好、精度高， 优选地，在步骤五中，所述的多次分离使用的超滤膜的截留分子量分别为1万道尔顿、10万 道尔顿、30万道尔顿、50万道尔顿、100万道尔顿。
[0032]优选地，在步骤五中，所述的多次分离为两次分离。
[0033]为了使本发明所述的葛仙米多糖的提取方法提取的葛仙米多糖具有纯度更高，外 观更佳的优点，对葛仙米多糖的提取方法进行进一步优化，优选所述方法包括如下步骤： [0034]步骤一：备料:精选所述葛仙米，将其烘干，干燥温度60°C，时间2h;将干燥的所述 葛仙米进行粉碎，过80目筛，得到所述葛仙米粉；
[0035] 步骤二:浸泡:用所述纯化水浸泡所述葛仙米粉，所述葛仙米粉与纯化水的重量比 为1:30，浸泡时间24h，得到浸泡后的葛仙米；
[0036] 步骤三:水提:在所述浸泡后的葛仙米中再加入所述纯化水，所述葛仙米粉与纯化 水的重量比为1:15,提取温度90°C，提取时间2h，降温至室温，离心去渣，得到所述提取液；
[0037] 步骤四：酶解:将所述提取液加热到55°C，向所述提取液中加入占所述提取液体积 的0.05%的木瓜蛋白酶，酶解2h后，然后加热到100°C，保持lO